孔佳
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：天津大学更多>>
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- 基于绿色荧光蛋白的多色系荧光多肽纳米颗粒的制备与应用
- 绿色荧光蛋白(Green fluorescent proteins,GFP)是一种存在于海洋生物维多利亚多管水母中的极具生物医学应用价值的天然发光蛋白。GFP的核心发光元件是由对羟基苄基2,3-二甲基咪唑啉酮(p-hyd...
- 孔佳
- 关键词：荧光蛋白生物成像
- 文献传递
- 人类肠道病毒68型3A蛋白可溶区的表达及其结构初步研究
- 2015年
- 为了解人类肠道病毒68型3A蛋白可溶区的结构,本研究构建了EV-D68 3A蛋白可溶区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化并对其结构进行了初步研究。首先,采用PCR的方法扩增EV-D68 3A（1~61）基因片段,克隆至原核表达载体pET-28a-His-SUMO中,转化进入BL21（DE3）感受态细胞,诱导表达出His-SUMO-3A（1~61）融合蛋白。经Ni-NTA树脂亲和层析初步纯化后得到大量融合蛋白,利用ULP酶酶切去除His-SUMO标签,通过Ni-NTA树脂亲和层析、阴离子交换层析柱、分子筛层析等方法分离标签并进一步纯化目的蛋白。最后通过化学交联反应检测目的蛋白的多聚化状态。结果显示,利用pET28a-His-SUMO-3A（1~61）原核表达载体能够在大肠杆菌中成功表达出大量可溶性的融合蛋白;经过多步纯化方法得到了大量高纯度的目的蛋白,平均每升大肠杆菌可得到约5mg目的蛋白,纯度达95%以上;通过化学交联反应证明了该蛋白的多聚化存在形式。本研究成功建立了EV-D68 3A蛋白可溶区的表达和纯化系统,为进一步获得3A蛋白晶体、研究3A蛋白功能以及设计以3A为靶点的抗病毒药物奠定了基础。
- 李婷孔佳于晓方韩雪
- 关键词：非结构蛋白交联反应
- HIV宿主天然限制因子SAMHD1与MxB结构与功能的研究
- SAMHD1与MxB是近期发现的两种具有抗HIV病毒活性的天然宿主免疫限制因子。其中，SAMHD1可通过多种手段对HIV病毒进行有效抑制：（1）通过其 dNTP水解酶活性（dNTPase）降低细胞内 dNTP水平来抑制病...
- 孔佳
- 关键词：艾滋病病毒
- 文献传递
