刘秋荣
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
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- 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2和β-微管蛋白Ⅲ基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的检测三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）和β-微管蛋白Ⅲ（TUBB3）基因在乳腺癌组织中的表达，探讨ABCG2和TUBB3基因与乳腺癌病理特征的关系。方法196例浸润性乳腺癌组织标本及同标本正常乳腺组织，采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）检测ABCG2和TUBB3基因的表达，分析基因表达与临床病理学特征的关系。结果196例浸润性乳腺癌组织中ABCG2基因的表达率为58．7％，电泳条带灰度值为0．685±0．126，癌旁正常乳腺组织中的表达率为30．1％，基因电泳条带灰度值为0．271±0．143，差异有统计学意义（P〈0．05）。TUBB3基因的表达率为67．9％，电泳条带灰度值为0，793±0．115，癌旁正常乳腺组织中的表达率为23．0％，基因电泳条带灰度值为0．463β-β-0．127，差异有统计学意义（P〈0．05）。ABCG2基因在肿瘤组织的表达与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）有关（P〈0．05），与人类表皮生长因子受体-2（Her-2）、临床分期、脉管癌栓、腋淋巴结转移、肿瘤大小、细胞核增殖抗原（Ki-67）等无明显相关（P〉0．05）。TUBB3基因在肿瘤组织的表达与腋淋巴结转移、脉管癌栓、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、Ki-67、Her-2有关（P〈0．05），与ER、PR等无相关（P〉0．05）。结论ABCG2、TUBB3基因的异常表达可能在乳腺癌耐药、发生、发展中发挥作用。
- 李文涛贾琳娇丁超刘秋荣邓萌孙文聪张斌翟保平
- 关键词：乳腺癌耐药基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2分子分型
- 下调三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因对人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel的作用被引量：4
- 2014年
- 目的 下调人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel耐药相关基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）的表达,检测其生物学特性的改变.方法 采用中等浓度0.08 mg/L、间歇作用法建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,构建ABCG2的pRNAT-U6.2/Lenti小干扰RNA（siRNA）表达载体转染BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝（MTT）法测定转染前后细胞的耐药指数,高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度.结果 感染ABCG2si2、ABCG2si1、ABCG2siC后的BT549/Docetaxel细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞ABCG2mRNA与β-actin比较其相对表达水平分别为0.11 ±0.02、0.26 ±0.01、0.88±0.03、0.92±0.02.感染ABCG2si1、ABCG2si2的细胞内ABCG2的表达减少,与对照ABCG2siC、BT549/Docetaxel比较差异有统计学意义（P＜0.05）,分别下降了71.7％和88.0％.4种细胞经Western blot检测显示,ABCG2蛋白表达水平不同,ABCG2si1、ABCG2si2对该蛋白的表达均有抑制作用,其中后者效果显著（P＜0.05）.经MTT法检测,感染有ABCG2si2、ABCG2siC的细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞对Docetaxel的半数抑制剂量（IC50）分别是：31.12、69.55、76.21 mg/L,其耐药指数分别为：8.13、18.16、19.90.其中前者与后两者比较对Docetaxel的敏感性显著增加（P＜0.05）.高效液相色谱测定细胞内多西他赛的含量,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为7.9 ng/106个细胞,感染后BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为66.7 ng/106个细胞,正常培养基培养4h后,感染后BT549/Docetaxel细胞内药物的含量为53.1 ng/106个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量4.3 ng/106个细胞,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 通过调控与乳腺癌耐药密切相关的ABCG2基因可以逆转BT549/Docetaxel的耐药性.
- 李文涛邓萌翟保平孙文聪王磊丁超贾琳娇刘秋荣张斌
- 关键词：多西他赛耐药乳腺癌
- 人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞分选及三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因表达水平被引量：4
- 2015年
- 目的 分选人乳腺癌多西他赛（Docetaxel）耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,探讨其生物学特征.方法 采用悬浮培养联合多西他赛法分选耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,采用悬浮培养法富集BT549、BT549/Docetaxel干细胞,进行CD44、CD24细胞标记和流式细胞仪检测,反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测BT549、BT549/Docetaxel干细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 （ABCG2）基因表达.结果 BT549/Docetaxel与BT549干细胞的群体倍增时间分别为（39.22 ±0.65）、（29.20 ±0.50）h,差异有统计学意义（P＜0.05）.流式分析显示,BT549微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例为（13.8±0.5）％,高于单层培养BT549细胞的比例（2.8±0.6）％（P＜0.01）.BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例为（19.1±0.3）％,高于单层培养BT549/Docetaxel细胞的比例（5.0±0.4）％（P＜0.01）.BT549/Docetaxel微球体细胞的CD44^＋/CD24^-/low比例高于BT549微球体细胞的CD44^ ＋/CD24^-/low比例,差异有统计学意义（P＜0.05）.BT549干细胞内药物的含量为（46.9 ±0.5）ng/10^6个细胞,BT549/Docetaxel干细胞内药物的含量为（7.1±0.3）ng/10^6个细胞,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）.正常培养基培养4h后,BT549细胞内药物的含量为（28.3±0.6） ng/10^6个细胞,BT549/Docetaxel细胞内药物的含量（3.5±0.1） ng/106个细胞,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）.ABCG2的mRNA在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显高于在BT549干细胞内中的表达,两者差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 成功筛选人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel干细胞,生长及耐药性稳定.ABCG2基因在BT549/Docetaxel干细胞内表达量明显增高.
- 李文涛孙文聪邓萌王磊黄毅刘秋荣王冰冯淑曼刘秋雨胡文茄翟保平
- 关键词：多西他赛耐药乳腺癌干细胞
- 人乳腺癌多西他赛耐药细胞株相关耐药基因的筛选被引量：3
- 2014年
- 目的 建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,探讨其多药耐药基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2 （ABCG2）、三磷酸腺苷结合转运蛋白B1（ABCB1）、多药耐药相关蛋白1（ABCC1）、谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）、二氢叶酸还原酶（DHFR）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）和β-微管蛋白Ⅲ（TUBB3）的表达及意义.方法 采用多西他赛中等浓度、间歇作用法建立耐药细胞株BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝（MTT）法测定其对Docetaxel的耐药指数,细胞克隆形成法测定BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性；高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）测定人乳腺癌多药耐药细胞BT549/Docetaxel中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、DHFR、TopoⅡ和TUBB3的基因表达.结果 人乳腺癌耐药细胞株BT549/Docetaxel的耐药指数为18.3,冻存对耐药性无明显影响,撤药培养可使耐药性降低.BT549/Docetaxel对顺铂、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺等抗癌药物有一定程度的耐药性.BT549/Docetaxel对多西他赛的敏感性降低,其多西他赛的含量较BT549下降,BT549/Docetaxel细胞中ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π和TUBB3的基因表达水平分别为0.97±0.15、0.75±0.13、0.77 ±0.14、1.49±0.31、1.52±0.22,高于BT549细胞的基因表达水平（0.45±0.19、0.37±0.12、0.33±0.11、0.76±0.33、0.33±0.21）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 成功建立稳定的人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,其耐药机制可能与ABCG2、ABCB1、ABCC1、GST-π、MRP和TUBB3基因的高表达有关.
- 翟保平丁超贾林娇刘秋荣邓萌孙文聪李文涛张斌
- 关键词：多西他赛耐药乳腺癌
