马娇
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：宁夏医科大学基础医学院医用化学系更多>>
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- 热休克蛋白60基因定点诱变导致其在细胞内定位的改变被引量：1
- 2011年
- 目的研究将热休克蛋白60(HSP60)蛋白序列中第70位的丝氨酸(serine)突变为丙氨酸(alanine)后,HSP60在细胞内定位的改变。方法将PrC/CMV-HSP60P1重组质粒中HSP60P1编码第70位丝氨酸的碱基定点诱变为编码丙氨酸的碱基序列,转染至小胶质细胞BV-2细胞株中表达。细胞经10h缺氧处理后,裂解细胞,应用差速离心方法分离细胞膜、细胞质和线粒体,应用Western-blot方法检测各细胞器中HSP60的含量。结果在转染未诱变PrC/CMV-HSP60P1质粒的细胞中,正常情况下,HSP60大部分分布在线粒体,少部分在胞浆,细胞膜中未见表达;缺氧刺激后,HSP60在细胞膜、胞浆和线粒体中均有表达;然而70位丝氨酸突变为丙氨酸后,只观察到HSP60在胞浆和线粒体中的表达,而在细胞膜上未见表达。结论作为磷酸化位点的Serine70对HSP60在细胞内的定位具有关键作用。
- 王银李云鸿滕鹏成文静张玉梅苗珍花蒲静马娇张楠游丽琴
- 关键词：HSP60定点诱变磷酸化位点
- 热休克蛋白60在激活的小胶质细胞中的表达及基因调控
- 2011年
- 目的研究细菌脂多糖(LPS)激活的小胶质细胞中热休克蛋白60(HSP60)的表达情况及其基因调控。方法分离SD大鼠的小胶质细胞,经LPS激活后,应用Western-Blot方法检测细胞中HSP60蛋白的表达,real-time PCR法检测细胞中HSP60 mRNA的量,并进一步检测热休克因子1(HSF-1)表达的变化。结果在激活的小胶质细胞中,HSP60的蛋白及mRNA水平均显著升高,其转录因子HSF-1的水平也相应增高。结论在激活的小胶质细胞中,HSF-1蛋白表达显著提高,HSP60 mRNA及蛋白合成增强,参与细胞的应激反应。
- 李云鸿滕鹏王银张玉梅马春骥蒲静马娇张楠游丽琴
- 关键词：热休克蛋白60热休克因子1小胶质细胞
