闫金明
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：吉林正大实业有限公司更多>>
- 发文基金：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 吉林白鹅α干扰素基因的克隆与序列分析
- 2012年
- 从吉林白鹅(Anser cygnoides)肝脏组织提取基因组DNA,应用Primer 5.0软件设计一对加入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的特异性引物,PCR扩增得到α干扰素基因(IFN-α),将PCR产物克隆至pMD18-T克隆载体,转化DH5α感受态细胞,挑取阳性菌落进行鉴定和测序。结果表明,IFN-α已被成功克隆。序列分析结果显示该基因序列与GenBank中已知的狮头鹅(A.anser)IFN-α序列(登录号HQ009755)同源性为99.5%。
- 李公美李茂辉闫金明李玉梅刘可越钱爱东
- 关键词：克隆
- 吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备被引量：1
- 2012年
- 采用PCR方法扩增了吉林白鹅ɑ干扰素(JL-GoIFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-ɑ,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-ɑ)。SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-ɑ融合蛋白(rJL-GoIFN-α)的分子量大小约为43 ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林白鹅α干扰素,经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25 mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN-ɑ抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN-ɑ,并制备了兔抗鹅的IFN-ɑ抗血清,为下一阶段鹅ɑ干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。
- 李公美胡静涛李玉梅李茂辉闫金明刘可越钱爱东
- 关键词：吉林白鹅抗血清
