蔡颖
- 作品数：21 被引量：20H指数：3
- 供职机构：南华大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市医学重点学科建设基金湖南省研究生科研创新项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- PM2.5对HBE细胞致癌致突变相关基因表达的影响被引量：5
- 2020年
- 目的:采用基因芯片技术与生物信息学分析方法,筛选PM2.5染毒后的人支气管上皮细胞(HBE)与未染毒细胞比较的差异表达基因和通路,为进一步研究PM2.5对HBE细胞致癌致突变作用的相关机制提供科学依据。方法:用50μg/mL的PM2.5水溶液处理HBE细胞,染毒24 h,用未染毒的细胞作为空白对照组,设立3组平行样品。提取RNA,荧光标记与纯化后进行芯片杂交,用Rosetta Resolver® System (Rosetta Biosoftware)进行数据前处理与统计分析,得到差异表达基因。将数据经过Cluster Profiler软件进行主成分和聚类分析、Pathway及GO(Gene Ontolog)分析,初步探讨PM2.5染毒前后HBE细胞中基因的差异表达;通过String蛋白互作数据库分析差异表达基因的蛋白互作关系,筛选出节点数最多的核心蛋白。结果:根据预设的筛选条件,筛选出245个PM2.5染毒前后HBE细胞中的差异表达基因,其中上调基因27个,下调基因218个,经过进一步分析,筛选出PHACTR2、SFRP1、WFDC1等排名前10的上调和下调的核心基因。排名前10的核心差异基因通过GO功能注释富集分析显示,差异表达基因主要富集在跨膜受体活性、受体活性、细胞信号传导、细胞分子传导等分子功能。同时富集于离子跨膜转运、细胞对脂多糖无机离子跨膜转运、细胞营养转运等生物过程;排名前10的差异表达基因通过KEGG富集分析显示,差异表达基因主要富集在涉及肿瘤细胞迁移、胆汁代谢相关、神经活性、遗传毒性等方面的7个核心通路;蛋白互作用网络图筛选出SST、BDNF、NCAM1、SSTR1和Bcl2L11等5个核心蛋白。结论:PM2.5可引起HBE细胞致癌致突变相关基因的差异表达,可为进一步研究PM2.5的致癌致突变作用机制提供科学依据。
- 王冰玉蔡颖蔡颖谢红卫谢红卫
- 关键词：细颗粒物人支气管上皮细胞
- 一种简易大鼠非暴露式气管滴注方法的建立被引量：1
- 2020年
- 常用的呼吸道染毒方法有暴露式气管滴注、鼻内滴注和非暴露式气管滴注。非暴露式气管滴注通过气管插管将滴注液输送到肺部,无需手术切口暴露气管,染毒剂量准确且对实验动物伤害较小。非暴露式气管滴注的方法有:盲探插管、透射光插管,使用光纤、喉镜、头戴式放大镜、内窥镜等辅助插管,但这些方法大多需要特殊设备,对于大鼠等小型哺乳类动物而言,由于其口腔、咽部解剖学情况使得插管较为困难,现今还没有标准的气管插管设备供大鼠使用,且操作技能要求较高[1-7].
- 王烨孙梦婷谭滇湘雷媛娣李鹏袁小燕刘艳萍蔡颖张朝晖
- 关键词：气管插管滴注
- 内源性硫化氢对硫酸铍诱导人支气管上皮细胞自噬的影响
- 2019年
- 目的探讨内源性硫化氢(H2S)对硫酸铍(BeSO4)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)自噬的影响。方法用0、100、150、200、250和300μmol/L BeSO4处理16HBE细胞48 h,MTT法测定细胞活力,亚甲基蓝分光光度法测定细胞内H2S含量,Western blot测定自噬标志蛋白LC3-B、Beclin-1及P62表达;用300μmol/L硫氢化钠(NaHS)或10 mmol/L DL-炔丙基甘氨酸(PPG)预处理16HBE细胞6 h后,用BeSO4处理细胞,研究H2S含量对上述指标的影响。结果 (1)BeSO4作用16HBE细胞48 h的半数致死浓度为249μmol/L;与对照组相比,BeSO4组自噬蛋白LC3-II/LC3-I和Beclin-1表达升高,细胞活力、H2S含量和P62蛋白表达降低,当BeSO4浓度>100μmol/L时,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)与BeSO4组比较,NaHS+BeSO4组细胞活力、H2S水平和P62蛋白表达均升高(P<0.05),LC3-II/LC3-I和Beclin-1蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义;(3)与BeSO4组比较,PPG+BeSO4组细胞活力、H2S水平及P62蛋白表达降低,LC3-II/LC3-I和Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论在本试验条件下,BeSO4染毒能致16HBE细胞活力和内源性H2S含量下降,并引起细胞自噬;内源性H2S能抑制BeSO4诱导的16HBE细胞自噬、减轻细胞毒性,发挥保护功能。
- 李寻亚易珊王烨袁小燕蔡颖刘艳萍张朝晖
- 关键词：内源性硫化氢硫氢化钠自噬
- PM_(2.5)混悬液对3种癌细胞侵袭和迁移能力的影响
- 2022年
- 目的:探讨PM_(2.5)混悬液对人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞和人肾癌A498细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用10、50μg/mL的PM_(2.5)混悬液分别对A549、HepG2和A498细胞染毒24 h,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果:迁移实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞穿膜细胞数分别为(356.33±30.92)、(476.33±28.50)和(563.33±74.00)个;HepG2细胞分别为(86.42±4.75)、(140.00±16.15)和(234.17±9.06)个;A498细胞分别为(42.33±6.43)、(80.00±6.08)和(174.67±25.01)个。侵袭实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞的穿膜细胞数分别为(188.33±9.45)、(313.00±7.94)和(404.00±57.66)个;HepG2细胞分别为(48.33±3.26)、(97.75±6.63)和(123.92±8.57)个;A498细胞分别为(5.67±5.03)、(21.33±5.13)和(40.67±6.81)个。在迁移实验和侵袭实验中,与阴性对照组相比,PM_(2.5)染毒组中的3种细胞穿膜细胞数均增加(P<0.05或0.01)。结论:PM_(2.5)可增强A549、HepG2和A498细胞的迁移和侵袭能力。
- 李柏茹秦双建蔡颖蔡颖关岚关岚肖芳曾明
- 关键词：大气细颗粒物A549细胞HEPG2细胞
- K-ras基因沉默对PM_(2.5)染毒HBE细胞癌基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨K-ras基因对PM_(2.5)染毒人支气管上皮(HBE)细胞部分癌基因和抑癌基因表达的影响。方法于2019年9月,根据K-ras基因mRNA序列,设计合成干扰序列,转染HBE细胞构建K-ras基因沉默细胞。用10、50μg/ml PM_(2.5)混悬液及10μmol/L Cr^(6+)分别染毒HBE细胞和K-ras基因沉默细胞,实时荧光定量PCR检测c-myc、c-fos、N-ras、cyclin-D1、p16、p53基因的mRNA表达水平,Western blot检测c-myc和p53蛋白表达水平。结果K-ras基因沉默细胞中K-ras基因mRNA表达水平下降(80.5%±3.6%),K-ras蛋白表达水平下降(58.9%±4.7%)(P<0.01)。各浓度PM_(2.5)染毒HBE细胞组、K-ras沉默细胞组及10μmol/L Cr^(6+)染毒HBE细胞组、K-ras沉默细胞组c-myc、c-fos、N-ras、cyclin-D1基因mRNA表达水平均高于未染毒相应细胞对照组,p16和p53基因mRNA表达水平低于未染毒相应细胞对照组(P<0.01);10μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-myc、c-fos、p16基因mRNA表达水平低于10μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组,p53基因mRNA表达水平高于10μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组(P<0.01);50μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-fos、N-ras、cyclin-D1、p16和p53基因mRNA表达水平均低于50μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组(P<0.01)。50μg/ml PM_(2.5)染毒HBE细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒HBE细胞组,p53蛋白表达水平低于未染毒HBE细胞组(P<0.05);50μg/ml PM_(2.5)染毒K-ras沉默细胞组c-myc蛋白表达水平高于未染毒K-ras沉默细胞组(P<0.05)。结论PM_(2.5)可引起HBE细胞癌基因表达升高,K-ras基因沉默能抑制PM_(2.5)诱导HBE细胞癌基因的表达。
- 李闰冰蒲桔宁李柏茹蔡颖蔡颖张朝晖
- 关键词：基因沉默K-RAS人支气管上皮细胞癌基因
- 大气PM_( 2.5)对支气管上皮细胞凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨深圳地区大气PM_(2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)凋亡基因和DNA损伤修复基因表达的影响。方法分别以0、10、50μg/ml PM_(2.5)悬液染毒HBE细胞,并设阳性对照组(10μmol/L Cr^(6+)),以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、Bcl-2和DNA损伤修复基因hOGG1、h MTH1的mRNA表达水平变化,以Western blot法检测目的蛋白质的表达变化。结果与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bax、hOGG1、hMTH1基因表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2基因表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blot实验结果显示,与对照组比较,10、50μg/ml染毒组及阳性对照组的caspase-3、caspase-8、caspase-9、hOGG1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Bax和hMTH1蛋白在50μg/ml染毒组及阳性对照组表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);Bcl-2蛋白在10、50μg/ml染毒组及阳性对照组则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PM_(2.5)染毒引起HBE细胞中凋亡基因、DNA损伤修复基因表达升高,抑凋亡基因表达降低,提示PM_(2.5)对凋亡基因和DNA损伤基因表达具有明显影响。
- 王冰玉李闰冰蔡颖蔡颖徐新云秦双建李柏茹
- 关键词：人支气管上皮细胞凋亡基因DNA损伤
- PM_(2.5)对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因表达的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨PM_(2.5)对人肾上皮细胞(HK-2)部分癌基因和凋亡基因表达的影响。方法:利用CCK-8试剂盒测定PM_(2.5)混悬液对HK-2细胞的半数抑制浓度(IC50);实验设阴性对照组、PM_(2.5)混悬液低剂量(10μg/mL)、高剂量(50μg/mL)染毒组和阳性对照组(Cr6+10μmol/L),分别对HK-2细胞处理24 h后利用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot检测癌基因(c-myc、c-fos、p53)和凋亡基因(Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2)mRNA和蛋白的表达水平。结果:PM_(2.5)混悬液对HK-2细胞的IC50为95.98μg/mL;经PM_(2.5)混悬液染毒24 h,qPCR结果显示,与阴性对照组比较,PM_(2.5)混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9 mRNA表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p53和Bcl-2 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示,与阴性对照组比较,PM_(2.5)混悬液高剂量组和阳性对照组c-myc、c-fos、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.01);p53和Bcl-2蛋白表达均降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:PM_(2.5)可引起HK-2细胞中部分癌基因表达上升、抑癌基因表达下降、促凋亡基因表达上升和抑凋亡基因表达下降,提示PM_(2.5)对HK-2肾细胞部分癌基因和凋亡基因具有一定的促进与激活作用。
- 李柏茹秦双建李闰冰蔡颖蔡颖王冰玉曾明曾明肖芳
- 关键词：大气细颗粒物HK-2细胞癌基因凋亡基因
- 硫酸铍致16HBE细胞miRNAs差异表达及其初步分析
- 【目的】探讨microRNA (miRNA)在硫酸铍(BeSO4)处理的人支气管上皮细胞(16HBE)中的差异表达,并初步分析差异表达miRNA的生物学功能。【方法】用150μM硫酸铍处理16HBE细胞48小时,同时设对...
- 易珊李寻亚袁小燕王烨刘艳萍蔡颖张朝晖
- 关键词：MIRNAS
- 文献传递
- 硫酸铍致16HBE细胞miRNAs差异表达及其初步分析
- 【目的】探讨microRNA （miRNA）在硫酸铍（BeSO4）处理的人支气管上皮细胞（16HBE）中的差异表达,并初步分析差异表达miRNA的生物学功能。【方法】用150μM硫酸铍处理16HBE细胞48小时,同时设对...
- 易珊李寻亚袁小燕王烨刘艳萍蔡颖张朝晖
- 关键词：MIRNAS
- 沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞癌基因和凋亡相关基因表达的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨沉默c-fos基因对PM2.5染毒人支气管上皮细胞(HBE细胞)癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法:采用RNA干扰技术,根据GenBank提供的c-fos mRNA序列,设计合成shRNA干扰序列,将重组慢病毒载体转染HBE细胞,构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象,用浓度为50μg/mL的PM2.5混悬液染毒24 h,同时设立阴性对照组,qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果:转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中,经qPCR和Western blot检测发现,与对照组HBE细胞相比,c-fos m RNA表达水平下降70.1%,c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM2.5染毒HBE细胞后,与未染毒的对照组比较,c-myc和k-ras mRNA表达水平分别升高30.46%、27.17%,差异均有统计学意义(P<0.05),c-fos、Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别升高50.78%、71.91%、74.16%,p53 mRNA表达水平下降12.27%,差异均有统计学意义(P<0.01)。PM2.5染毒c-fos基因沉默细胞后,与未染毒组比较,c-myc、k-ras mRNA表达水平分别下降13.08%、5.39%,Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达水平分别下降25.03%、21.37%(P<0.05),p53 mRNA下降53.39%(P<0.01)。此外,c-fos基因沉默细胞染毒后,与HBE正常细胞染毒后比较,c-myc、k-ras、p53、c-fos、Caspase-3和Caspase-8的mRNA表达水平均有所下降(P<0.05);仅c-myc蛋白表达下降(P<0.01)。结论:成功构建c-fos基因沉默细胞株;PM2.5可引起HBE细胞癌基因和凋亡相关基因表达水平明显升高,c-fos基因沉默在一定程度上能抑制PM2.5对癌基因和凋亡相关基因的激活作用。
- 蔡颖蔡颖秦双建李柏茹余淑苑余淑苑刘宁季佳佳张朝晖
- 关键词：人支气管上皮细胞癌基因凋亡相关基因
