胡正龙
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：海南大学农学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- P型PRSV-VPg蛋白与寄主eIF4E蛋白的互作被引量：3
- 2009年
- 为研究番木瓜环斑病毒P型株系(PRSV-P)的病毒基因组连接蛋白(VPg)与寄主eIF4E蛋白的互作,采用双分子荧光互补技术(BiFc),通过基因枪转化法轰击洋葱表皮,在荧光显微镜下观察两者间的互作结果。结果表明:番木瓜eIF4E与P型PRSV-VPg,西瓜eIF4E与P型PRSV-VPg蛋白均发生互作。eIF4E与VPg的互作为研究通过转基因方法抑制或过量表达突变关键位点的寄主因子,阻断关键因子互作获得抗病植株提供了可行性依据。
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- 关键词：番木瓜环斑病毒
- 以P型PRSV-VPg为模板多位点突变获得W型PRSV-VPg的研究被引量：2
- 2009年
- 以P型PRSV-VPg(Papaya Ringspot Virus,VPggene)基因为模板利用高保真酶通过两对引物(突变4个位点),PCR扩增获得一条276bp和一条141bp的两个小片段.以此为基础,利用长引物延伸和套叠PCR的方法,定点突变剩余5个位点,最后拼接获得W型PRSV-VPg基因.结果表明通过上述方案可以成功改造P型PRSV-VPg基因,获得与W型PRSV-VPg同源的目的基因,成功率为100%.该技术可以绕开传统的通过寻找毒源进行RT-PCR方法和人工合成方法获得病毒基因,其技术操作简单,且节约时间和成本,并在人工合成基因、多位点基因定点突变等方面具有很好的借鉴作用和应用价值.
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- 关键词：基因改造
- A、O型FMDV T/B细胞抗原表位融合基因合成及植物表达载体构建被引量：1
- 2009年
- 人工合成A、O型FMDV的7个细胞表位基因,应用套叠PCR将其中5个T细胞表位基因融合为T,2个B细胞表位基因融合为B,分别克隆进pMD-18T载体,再利用同尾酶的酶切及连接构建了不同组合的克隆载体(pMD-BT/BTT),然后将克隆载体改造为中间载体(pMD-xsB/xsT/xsBT/xsBTT),最终获得4个重组植物表达载体(pBI-xsB/xsT/xsBT/xsBTT).这为进行热研2号柱花草遗传转化及进一步研究同型与异型FMDV之间多表位基因的不同融合方式的免疫效果奠定了基础,为口蹄疫可饲植物疫苗的应用研究提供借鉴.
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- 关键词：口蹄疫病毒植物表达载体
- 利用转基因植物生产口蹄疫可饲疫苗研究进展
- 2009年
- 介绍了转基因植物生产可饲疫苗的原理、方法和优点,综述了利用转基因植物生产口蹄疫可饲疫苗的研究进展,分析其存在的问题并进行了展望。
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- 关键词：口蹄疫转基因植物
