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王飞
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
南方医科大学
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相关领域:
生物学
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合作作者
刘心蕊
南方医科大学基础医学院基因工程...
高媛
南方医科大学基础医学院基因工程...
蔡翠霞
南方医科大学基础医学院基因工程...
王涵多
南方医科大学基础医学院基因工程...
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1篇
2016
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SUSD2基因真核表达载体构建及其在H322细胞中表达
被引量:2
2016年
[目的]构建SUSD2基因真核表达载体,并观察其在真核细胞H322细胞中的表达。[方法]从H322细胞中提取总RNA并逆转录为c DNA,采用PCR技术扩增出含有EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的人SUSD2基因片段,以质粒pc DNA3.1为表达载体,构建重组质粒pc DNA3.1-SUSD2。采用PCR、双酶切鉴定以及测序验证c DNA片段大小和序列正确。将重组载体pc DNA3.1-SUSD2转染H322细胞,Western Blot法检测SUSD2蛋白的表达。[结果]PCR、双酶切鉴定以及测序结果显示pc DNA3.1-SUSD2包含大小、序列正确的SUSD2片段;Western Blot结果显示SUSD2蛋白在转染pc DNA3.1-SUSD2的H322细胞中表达高于转染pc DNA3.1的H322细胞。[结论]成功获得SUSD2基因全长序列,并成功构建SUSD2基因真核表达载体,有效地在非小细胞肺癌细胞株H322中表达,为进一步研究该基因功能及机制奠定了基础。
蔡翠霞
刘心蕊
王涵多
高媛
王飞
关键词:
真核表达载体
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