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林涛: 作品数：15 被引量：41H指数：3; 供职机构：川北医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金四川高等学校成果转化重大培育项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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激活Akt/mTOR/p70S6K信号通路对大鼠脊髓损伤后神经再生的影响被引量：6: 2015年; 目的：探讨激活蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）/p70核糖体S6蛋白激酶（p70S6K）信号通路对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后神经再生及神经功能恢复的影响,为促进SCI修复提供分子学机制依据。方法：72只雌性SD大鼠建立轻型SCI模型后随机均分为激活组（Act组,SCI＋ATP）、对照组（Con组,SCI＋生理盐水）、阻断组（Int组,SCI＋ATP＋雷帕霉素）;24只大鼠仅打开椎板、不损伤脊髓,为假手术组（Sham组）。分别于术后1d、3d、7d、14d采用BBB运动功能评分评价各SCI组大鼠经不同治疗后的神经功能,并采用Western blot检测各组在术后各时间点脊髓组织中Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p70S6K、p-p70S6K、Nestin、Neu N蛋白表达情况,免疫组化检测各组在术后各时间点的Nestin和Neu N表达情况。结果：各SCI组术后1d BBB评分为3～5分,之后逐渐增加,术后1d和3d各组间BBB评分无显著性差异（P〉0.05）,Act组在SCI后7d和14d时的BBB评分明显高于Con与Int组（P〈0.05）。各SCI组在术后各时间点脊髓组织中Akt、m TOR及p70S6K磷酸化水平均明显高于Sham组（P〈0.05）,Act组的磷酸化水平在术后各时间点均明显高于Con组及Int组（P〈0.05）,术后7d时磷酸化水平增高最为显著（P〈0.01）。各SCI组大鼠在术后各时间点的Nestin表达水平均高于Sham组（P〈0.05）,Act组的表达水平较Con组、Int组显著性增高（P〈0.05）、Nestin阳性细胞数显著性多于Con组与Int组（P〈0.05）。各SCI组在术后各时间点的Neu N表达均显著性低于Sham组（P〈0.01）,各SCI组Neu N的表达在术后1d、3d无显著性差异（P〉0.05）;Act组在术后7d和14d时的Neu N表达水平明显高于Con组及Int组（P〈0.05）,Neu N阳性细胞数明显多于Con组与Int组（P〈0.05）。结论：激活Akt/m TOR/p70S6K信号通路可显著增加SCI后Nestin及Neu N的表达,促进SCI后神经恢复和功能改善,此信号�; 胡凌云张建英林涛苟林林宏李伟李伟刘康; 关键词：脊髓损伤 MTOR 雷帕霉素神经再生

mTOR／p70S6K信号通路在大鼠脊髓损伤后运动功能恢复中的研究被引量：3: 2013年; [目的]讨论哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)信号转导通路对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经运动功能恢复的影响,从而为改善SCI后神经运动功能、修复脊髓损伤提供分子学机制依据。[方法]采用改良Allen's打击器制成大鼠脊髓损伤模型。大鼠分为四组:SCI+ATP组、SCI+生理盐水组、SCI+ATP+雷帕霉素组和假手术组。分别于术后1、2、3、4周采用免疫组化、Western blot检测和实时荧光定量RT-PCR检测mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、nestin、NSE和NF200 mRNA及蛋白表达变化,并采用BBB运动功能评分评价大鼠脊髓损伤后经不同治疗后运动功能恢复的情况。[结果]假手术组大鼠脊髓中mTOR/p70S6K信号通路分子在蛋白和mRNA水平上呈低水平表达,在脊髓损伤后其表达增加。外源性ATP可显著增强大鼠受损脊髓中mTOR/p70S6K信号分子的表达,而雷帕霉素可明显抑制ATP诱导的表达上调。激活的mTOR/p70S6K信号通路可显著增强受损脊髓组织中的nestin、NSE和NF200的表达,促进SCI后BBB运动功能评分的增加,而雷帕霉素阻碍了由ATP诱导的上述效应。[结论]ATP通过诱导mTOR/p70S6K信号通路激活促进大鼠SCI后神经运动功能的改善,具有促进SCI修复的潜能,此信号通路可能是治疗SCI的重要干预环节。; 胡凌云张建英刘康苟林林涛李伟孙振刚; 关键词：MTOR 雷帕霉素脊髓损伤

手术治疗慢性化脓性骨髓炎41例被引量：1: 2012年; 目的:探讨慢性骨髓炎的手术治疗方法及治疗效果。方法:以2006年2月至2011年10月所收治41例经手术治疗的慢性骨髓炎患者作为观察对象,采用彻底清除坏死组织、植骨、外固定的手术方式结合敏感抗生素的使用,观察该术式对慢性骨髓炎的治疗效果。结果:41例患者总有效38例,一次手术总有效率为92.7%。无明显效果的3例患者中两例经2次手术治愈,1例经3次手术治愈。结论:术中彻底清除感染坏死组织结合后期植骨的外科手术方法,为治疗慢性化脓性骨髓炎的一种积极有效的治疗方法。; 吴凯张庆宏范恒俊张福利林涛; 关键词：慢性化脓性骨髓炎手术疗效

蛋白激酶信号级联Akt在大鼠脊髓损伤后的诱导表达被引量：3: 2014年; 目的研究蛋白激酶信号级联蛋白激酶B(Akt)在大鼠脊髓损伤(SCI)后的表达变化,以及对SCI后运动功能恢复的影响,从而为SCI的修复提供分子学机制依据。方法采用改良Allen′s打击器制成大鼠SCI模型。大鼠分为3组:假手术组(Sham组)、干预组(Int组)、对照组(Con组)。分别于术后1、7、14d采用免疫组织化学、蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Akt mRNA和蛋白的表达,并采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动功能评分评价大鼠SCI后运动恢复情况。结果 Sham组在Akt蛋白和mRNA水平上呈低水平表达,SCI后Akt的表达水平明显提高;Akt上游磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的抑制剂LY294002可明显抑制Akt的表达,并阻止SCI后自发性运动功能恢复。结论 SCI后激活的蛋白激酶信号Akt可能是参与SCI后神经保护和修复的重要干预环节。; 胡凌云张建英苟林刘康林涛冯刚; 关键词：脊髓损伤蛋白激酶B

条件性敲除骨髓间充质干细胞中3-磷酸肌醇依赖蛋白激酶1基因后的成骨细胞分化: 2022年; 背景:国内外对于3-磷酸肌醇依赖蛋白激酶1(3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK-1)的研究主要集中在内分泌和肿瘤学等学科领域,在骨科学中关于其对成骨分化的影响尚未有系统研究与报道。目的:通过使用稳定表达cre酶的腺病毒(pHBAd-cre-EGFP)转染PDK-1^(flox/flox)小鼠骨髓间充质干细胞,观察PDK-1在成骨细胞分化中的作用。方法:体外培养获得来源于纯合子PDK-1^(flox/flox)小鼠的骨髓间充质干细胞,设立对照组、空载病毒组(pHBAd-EGFP)和pHBAd-cre-EGFP组,对照组仅用成骨细胞诱导培养基诱导培养骨髓间充质干细胞,空载病毒组使用pHBAd-EGFP转染骨髓间充质干细胞,pHBAd-cre-EGFP组使用含Cre重组酶的重组腺病毒(pHBAd-cre-EGFP)干扰骨髓间充质干细胞中的PDK-1基因,然后进行成骨诱导,采用碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性、茜素红染色和qPCR检测成骨相关基因表达来评价各组成骨细胞的分化成熟情况。结果与结论:pHBAd-cre-EGFP组细胞的碱性磷酸酶分泌、碱性磷酸酶活性、矿化能力均明显低于其他2组(P<0.05,P<0.01),成骨细胞相关基因Runx2、骨钙素和Ⅰ型胶原的表达也明显低于其他2组(P<0.01)。结果表明,体外干扰PDK-1基因表达可显著抑制骨髓间充质干细胞成骨分化。; 陈巧玲白亦光刘康林涛罗栩伟; 关键词：转移性骨肿瘤骨破坏成骨细胞

前路减压带锁钢板内固定治疗下颈椎损伤被引量：1: 2008年; 目的探讨下颈椎损伤手术及疗效。方法采用颈椎前路减压自体髂骨移植或钛网加自体骨移植带锁钢板内固定治疗下颈椎损伤32例。结果32例术后随访6月-4年6月,平均2年7月,术后神经功能均有一级以上改善,未见内植物松动、脱落及断裂者,植骨在4个月内融合。结论采用颈椎前路减压植骨融合治疗下颈椎损伤可使损伤节段获得早期稳定(方便术后护理及功能锻炼),有利于脊髓功能的恢复。; 刘清毅苟林林涛; 关键词：颈椎前路减压钢板骨折固定术内固定

移植同种异体脂肪干细胞对兔椎间盘退变早期的干预实验研究被引量：2: 2019年; 目的观察同种异体兔脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSC)在退变早期对椎间盘的修复效果。方法采用穿刺抽吸法建立兔椎间盘退行性变模型,体外培养ADSC对模型进行移植治疗。27只5月龄日本大耳白兔随机分为3组:正常对照组(NC组,n=9),ADSC移植组(ADSC组,n=9)和DMEM培养基组(DMEM组,n=9)。每只实验动物的L 3-4、L 4-5和L 5-6作为实验干预椎间盘。术后4,8,12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色以及Ⅱ型胶原(collagenⅡ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果术后4,8,12周,DMEM组的%ST2WI值、collagenⅡ和aggrecan的mRNA表达量均明显低于其他各组(P<0.05),NC组和ADSC组组间无明显差异;NC组和ADSC组退变分数明显低于DMEM组(P<0.05),NC组和ADSC组间无明显差异;NC组和ADSC组的collagenⅡ免疫组化均显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。结论在退变早期移植同种异体的兔ADSC能有效抑制椎间盘的退变。; 白亦光刘康杨泽龙罗栩伟林涛肖东琴冯刚; 关键词：脂肪干细胞椎间盘退行性变干细胞移植

脊髓损伤模型大鼠星形胶质化形成与Akt/mTOR/p70S6K信号通路的激活被引量：2: 2015年; 背景:既往研究集中于如何促进大鼠脊髓损伤后的神经再生,但对于如何抑制脊髓损伤后星形胶质细胞过度增殖反应的因素、从而改善神经再生的环境研究尚少。目的:观察Akt/m TOR/p70S6K蛋白激酶信号转导通路对大鼠脊髓损伤后反应性星形胶质化形成的影响,从而为改善脊髓损伤后神经再生环境、修复脊髓损伤提供分子学机制依据。方法:建立SD大鼠轻型脊髓损伤模型,分为4组:实验组造模后行ATP治疗7 d;对照组造模后行等量生理盐水治疗7 d;干预组造模后行等量的ATP联合雷帕霉素治疗7 d;假手术组椎板切除后行等量生理盐水治疗7 d。分别于造模后1,3,7,14 d采用免疫组化、Western blot法检测Akt、p-Akt、m TOR、p-m TOR、p70S6K、p-p70S6K、胶质纤维酸性蛋白表达变化,并采用BBB运动功能评分评价大鼠脊髓损伤后经不同方法治疗后运动功能的恢复情况。结果与结论:假手术组大鼠脊髓中Akt/m TOR/p70S6K信号通路分子呈低水平表达,在脊髓损伤后其表达增加。外源性ATP可显著增强大鼠受损脊髓中Akt/m TOR/p70S6K信号分子的表达,而雷帕霉素可明显抑制ATP诱导的表达上调。激活的Akt/m TOR/p70S6K信号通路可显著减弱受损脊髓组织中胶质纤维酸性蛋白的表达、抑制脊髓损伤后过度的星形胶质细胞增生反应,促进脊髓损伤后BBB运动功能评分增加,而雷帕霉素阻碍了由ATP诱导的上述效应。结果证实,ATP通过诱导Akt/m TOR/p70S6K信号通路激活抑制大鼠脊髓损伤后星形胶质瘢痕的形成,具有改善脊髓损伤后神经再生环境、促进脊髓损伤修复和改善神经功能的潜能,此信号通路是治疗脊髓损伤的重要干预环节。; 胡凌云张建英林宏苟林林涛李伟刘康孙振刚; 关键词：雷帕霉素神经系统损伤神经胶质轴突再生

壳聚糖水凝胶复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究: 目的:利用脂肪间充质干细胞作为种子细胞复合实验室自主研发的壳聚糖水凝胶支架构建组织工程软骨,并修复兔关节软骨缺损,探讨一种适用于临床治疗的关节软骨缺损修复方法。方法:(1)脂肪间充质干细胞的体外培养和鉴定:取24周龄新西...; 林涛; 关键词：脂肪间充质干细胞关节软骨缺损

移植同种异体骨髓间充质干细胞对兔椎间盘退变早期的干预实验研究被引量：1: 2020年; 目的:在诱导椎间盘退变的早期移植同种异体兔骨髓间充质干细胞(BMSC),观察BMSC对退变椎间盘的修复效果。方法:体外分离、培养BMSC,并通过组织化学染色、免疫组织化学和免疫荧光染色对其进行鉴定。采用穿刺抽吸法建立兔椎间盘退行性变模型,造模同期进行细胞移植治疗。27只5月龄日本大耳白兔随机分为正常对照组(NC组)、BMSC移植组(BMSC组)、DMEM培养基组(DMEM组),每组各9只。每只实验动物的L 3-4、L 4-5和L 5-6作为实验干预椎间盘。术后4、8、12周分别利用标准化T2加权像信号强度(%ST2WI)、病理组织学、退变分数、免疫组化染色、免疫荧光染色以及二型胶原(CollagenⅡ)和蛋白聚糖(aggrecan)mRNA表达水平评价修复效果。结果:术后12周,DMEM组的%ST2WI值、CollagenⅡ和aggrecan的mRNA表达量均低于其它各组(P<0.05),NC组和BMSC组比较,差异无统计学意义(P>0.05);NC组和BMSC组退变分数低于DMEM组(P<0.05),NC组和BMSC组比较,差异无统计学意义(P>0.05);NC组、BMSC组的CollagenⅡ免疫组化和aggrecan免疫荧光染色均显示强阳性,而DMEM组随着时间的推移阳性逐渐减弱。结论:在退变早期移植同种异体的兔BMSC能有效抑制椎间盘的退变。; 白亦光陈巧玲刘康肖东琴罗栩伟林涛杨泽龙冯刚; 关键词：骨髓间充质干细胞椎间盘退行性变干细胞移植

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