杨志
- 作品数：9 被引量：36H指数：4
- 供职机构：第四军医大学航空航天医学系航空航天医学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 流体剪切应力对骨肉瘤成骨样细胞核结合因子α1基因的表达作用(英文)
- 2006年
- 背景:机械应力在成骨细胞功能调控中的作用是近年骨组织生物力学研究的一个重点。流体剪切应力是否可以诱导成骨细胞内核结合因子α1的表达,其规律如何?目前少见报道。目的:观察流体剪切应力对骨肉瘤成骨样细胞(MG-63)核结合因子α1基因表达的作用。设计:对比观察实验。单位:解放军第四军医大学航空航天医学系航空航天生物动力学教研室完成。材料:MG-63人源骨肉瘤成骨样细胞。方法:实验于2004-11/2005-04在解放军第四军医大学航空航天医学系航空航天生物动力学教研室完成。①对MG-63细胞进行培养,传代60h后,将细胞置于流室系统中进行刺激实验。流体剪切应力分别为0.5Pa(0.5Pa应力刺激组)和1.5Pa(1.5Pa应力刺激组),作用时间分别为15,30和60min。同时取盖玻片置于含培养基的培养皿中,作为流体剪切应力刺激组的即时对照(对照组)。②提取细胞总RNA,进行反转录聚合酶链反应,检测细胞内核结合因子α1mRNA的表达,并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。主要观察指标:不同流体剪切应力及不同作用时间核结合因子α1mRNA的表达值。结果:①与对照组相比,流体剪切应力刺激组的核结合因子α1mRNA的表达在作用30min和60min均显著增强,且在一定的时间范围内(15～60min),核结合因子α1mRNA的表达水平随着作用时间的延长、应力水平的增加而增强。②1.5Pa应力刺激组在作用30min和60min核结合因子α1mRNA的表达比0.5Pa应力刺激组均显著增强(P<0.01)。结论:流体剪切应力可以促进成骨细胞内核结合因子α1的表达。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：剪切强度骨肉瘤基因
- 成骨特异性转录因子Cbfα1被引量：1
- 2005年
- 0引言
随着老龄社会的到来，骨质疏松患者数成逐年增长趋势．人们在最初对破骨细胞分化和功能的分子机制研究较多，并以此为基础开发出以抑制骨吸收为目的的治疗骨质疏松的药物．到90年代，发现Cbfα1（core—binding factor α1）是促进骨发育和骨形成的关键因子．这一发现为治疗骨质疏松提供了新的思路．现将从Cbfα1的结构、功能和表达调节三方面对其作一综述．
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：成骨细胞软骨细胞破骨细胞
- MAPK／ERK信号转导通路的分子生物学特征及生物效应被引量：21
- 2005年
- 0引言
丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）家族是介导细胞反应的重要信号系统，普遍存在于多种生物中，包括酵母和哺乳动物细胞．在1989／1991间，研究者们得到了第一组MAP激酶的序列，即芽殖酵母信息素应答途径中的Kss1p和Fus3p，及哺乳动物MAP激酶ERK1、ERK2和ERK3，从而揭示出这些酶属于一个新的蛋白激酶家族。由于ERK1，ERK2的活性通常是用底物髓磷脂碱性蛋白（MBP）和微管相关蛋白2（MAP2）来检测的，因此曾被称作MBP激酶和MAP2激酶．规在仍然使用MAP缩写，但意义已经不同．由于早在20世纪80年代人们在研究酪氨酸激酶的底物时就检测到这些酶属于丝裂原激活的酪氨酸磷酸化蛋白，因此称为丝裂原激活的蛋白激酶．MAPK家族的信号转导通路采用高度保守的三级激酶级联传递信号．三级成员按激活顺序为丝裂原激活的蛋白激酶激酶激酶（MAPKKK／MKKK），丝裂原激活的蛋白激酶激酶（MAP-KK／MKK）及丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）．
- 王冰吴燕红杨志张舒
- 关键词：MAPK信号转导分子生物学生物效应
- 失重性骨质疏松与老年性骨质疏松的比较被引量：4
- 2005年
- 0引言
失重性骨质疏松是航天员长期太空飞行面临的亟待解决的医学难题之一，目前认为它是由航天失重环境引起的一种特殊的废用性骨质疏松．老年性骨质疏松是由于增龄所致的体内性激素减少及生理性退变所致的最常见的一种原发性骨质疏松．老年性骨质疏松是现今医学界发病机制研究比较全面透彻、治疗对抗措施比较完备的一种骨质疏松．本文对两种骨质疏松在发病机制、危害与防护措施方面作以总结，给两种骨质疏松的相互借鉴研究提供帮助．例如失重性骨质疏松的原因——无机械应力刺激的废用因素，也同样是老年性骨质疏松的重要原因之一．另外甲状旁腺激素、降钙素、活性维生素D等激素调节功能的改变在两类骨质疏松发病机制上都起着重要作用．发病机制的比较还可为对抗措施的提出和开发开拓思路，同时两类骨质疏松现有的对抗措施，有些可以互相借鉴。
- 王攀王冰杨志孙喜庆张舒
- 关键词：骨质疏松失重老年
- 流体剪切应力对模拟失重条件下MG-63成骨样细胞Cbfα1表达的影响
- 2007年
- 目的观察模拟失重条件下培养的人骨肉瘤MG-153成骨样细胞受流体剪切应力（FSS）作用后核心结合因子α1（Cbfα1）表达的改变，初步探讨失重情况下骨质减少的可能机制。方法MG-153成骨样细胞传代于25ml培养瓶中，培养24h后细胞被随机分为模拟失重组和1G组（每组又下设立FSS作用组和无FSS作用组）。48h后，将细胞置于流室系统中进行刺激实验。FSS强度设为0．5Pa，作用时间分别为15、30和60min。其后提取细胞总RNA，进行反转录PCR，检测细胞内Cbfα1 mRNA的表达，并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。同时提取细胞总蛋白，Western Blotting检测Cbfα1蛋白的表达。结果和无FSS作用组相比，FSS作用组的Cbfel的表达在30min和60min均显著增强，且在一定的时间范围内（15～60min）Cbfα1的表达水平随着作用时间的延长而增加。和1G组相比。模拟失重组的Cbfα1表达水平降低，在30min、60min时有显著的统计学意义。结论FSS可以促进MG-63成骨样细胞内Cbfα1的表达，模拟失重可显著抑制FSS对MG-63成骨样细胞内Cbfα1表达的诱导作用。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：流体剪切应力核心结合因子Α1
- 模拟失重对流体剪切应力诱导MG-63细胞ERK2激活的影响
- 2007年
- 目的研究成骨细胞力学信号转导功能中酪氨酸磷酸结合结构域适应蛋白(Shc)和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK2)的关系,并观察模拟失重条件下流体剪切应力(FSS)诱导ERK2活性的变化,以期从信号转导水平探讨模拟失重对成骨细胞力学信号转导功能的影响。方法将负性缺失突变体质粒Shc-SH2和活性ERK质粒Myc-ERK2共同转染入MG-63细胞中,同时将真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2也共同转染入MG-63细胞中作为转染平行对照组,对转染细胞进行1.5Pa流体剪切应力处理15min。利用回转器模拟失重60h,对转染细胞进行1.5PaFSS处理15min。结果在转染平行对照组中,FSS组中的Myc-ERK2的活性显著升高;在Shc-SH2转染组中,Myc-ERK2的活性与转染平行对照组相比显著降低(P<0.05),在FSS组中未见Myc-ERK2活性的变化。转染了真核表达载体pcDNA3和Myc-ERK2的细胞在模拟失重条件培养及FSS作用15min后,Myc-ERK2的活性升高,但与未进行模拟失重的对照组相比,Myc-ERK2的活性显著降低(P<0.05)。结论在力学信号转导通路中,Shc可以介导力学信号以激活ERK2。模拟失重对细胞的力学信号转导功能具有不良影响。
- 吴燕红王冰曹新生杨志张舒
- 关键词：失重模拟流体剪切应力ERK2SHC
- 模拟失重对骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导的ROS17/2.8细胞中ERK活性的影响被引量：4
- 2006年
- 目的观察回转器模拟失重对骨形态发生蛋白2(BMP-2)诱导的大鼠骨肉瘤成骨样细胞(ROS17/2.8)中蛋白激酶ERK活性及c-fos/c-junmRNA表达的影响。方法在地面1G和回转器模拟失重条件下培养ROS17/2.8细胞,按培养时间再分为24h和48h组,各组又分为有或无BMP-2(500ng/ml)组。提取细胞总蛋白,应用免疫沉淀和WesternBlotting法检测磷酸化Elk(p-Elk)含量的变化,以反映蛋白激酶ERK的活性。提取细胞总RNA,采用反转录PCR法检测c-fos和c-jun的mRNA表达量。结果BMP-2诱导组的p-Elk表达量明显高于无BMP-2组,各时间点模拟失重组p-Elk表达量均低于1G重力对照组。模拟失重条件下24h和48h组的c-fosmRNA表达较1G对照显著降低(分别为P<0.05,P<0.01)。模拟失重条件下48h组的c-junmRNA的表达显著低于1G对照水平(P<0.01)。结论模拟失重降低了ROS17/2.8细胞中BMP-2诱导的ERK的活性,且抑制了c-fos和c-jun的基因表达。
- 王冰曹新生吴燕红杨志张舒
- 关键词：失重模拟骨形态发生蛋白-2C-JUN
- 模拟失重对成骨细胞整合素亚单位表达的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:观察回转器模拟失重对成骨细胞整合素亚单位表达的影响.方法:培养的大鼠乳鼠颅骨成骨随机分为对照组和失重组(用回转器模拟失重条件),在实验的24,48和72h提取细胞总RNA,进行反转录PCR,检测整合素的α5,αv和β1亚单位mRNA表达,并计算与内参照β肌动蛋白(beta-actin)mRNA水平的比值.同时用Westernblotting检测各种整合素亚单位的蛋白表达变化.结果:从模拟失重24h开始,整合素亚单位的基因表达即发生改变,但在对照组中,基因表达无明显变化.整合素α5mRNA在模拟失重的24,48和72h分别下降了11.3%,18.7%和9.8%;整合素αvmR-NA分别下降了23.0%,12.3%和16.7%;整合素β1mRNA分别下降了15.3%,11.4%和26.4%.与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).整合素亚单位蛋白和基因表达的变化相似.整合素α5在模拟失重的24,48和72h分别下降了13.1%,20.3%和11.9%;整合素αv的蛋白表达分别下降了7.4%,18.2%和25.2%;整合素β1蛋白表达分别下降了18.6%,25.9%和27.5%.与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论:在模拟失重环境下,整合素α5,αv和β亚单位mRNA的表达发生了下调性变化.
- 杨志王冰李莹辉聂婕霖孙喜庆张舒
- 关键词：失重成骨细胞整合素类
- 流体剪切应力对人骨肉瘤成骨样MG-63细胞Cbfα1基因表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察流体剪切应力（FSS）对人骨肉瘤成骨样细胞（MG-63）Cbfα1基因表达的影响。方法对MG-63骨肉瘤细胞进行培养，传代60h后，将细胞置于流室系统中进行应力刺激实验。FSS分为0．5Pa和1．5Pa两个水平，每个水平下作用时间分别为15min、30min和60min。提取细胞总RNA，进行反转录PCR，检测细胞内Cbfα1mRNA的表达，并计算与内参照GAPDHmRNA的比值。结果与对照组相比，FSS作用组的Cbfα1 mRNA的表达在30min和60min均显著增强，且在一定的时间范围内（15—60min），Cbfα1 mRNA的表达水平随着作用时间的延长、应力水平的增加而增强，在30min和60min的变化具有显著性意义（P〈0．01）。结论FSS可以促进成骨细胞内Cbfα1的表达。
- 杨志王冰孙喜庆张舒
- 关键词：流体剪切应力骨肉瘤细胞核心结合因子
