李霞
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
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- 人脐带间质干细胞来源的exosomes对肝细胞过氧化损伤的保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes(hucMSC-Ex)对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用。方法将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组(常规培养)、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组(CCL4+hucMSC-Ex)。免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况;免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的表达水平;比色法检测培养上清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;western blot分析P38MAPK通路的活化情况。结果免疫荧光结果显示,hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞;比色法结果表明,与对照组相比,CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降,MDA上升(P<0.01),hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化;免疫组化结果显示,与对照组相比,CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞(胞核棕黄色)数量明显增高,而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化;western blot结果表明,CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升,而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降,其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍。结论 HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤。
- 王冰莹肖宇晴蒋留留李里明李霞贾浩源周颖叶惠慧许文荣严永敏钱晖
- 关键词：脐带间质干细胞四氯化碳肝损伤
- miR-1调控胃癌细胞SGC-7901迁移能力的实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨微小RNA-1(miR-1)对胃癌细胞系SGC-7901迁移能力的调控作用。方法脂质体转染寡核苷酸片段NCmimics及miR-1-mimics、NC-inhibitor及miR-1-inhibitor至SGC-7901细胞,定量RT-PCR检测转染后SGC-7901细胞中miR-1的表达水平,Transwell实验观察转染后细胞迁移能力,western blot检测转染后细胞上皮间质转化(EMT)指标。结果miR-1-mimics转染组miR-1的表达水平(900.10±240.40)明显高于NC-mimics转染组(1.01±0.18),差异有统计学意义(t=6.48,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组miR-1的表达水平(0.65±0.04)明显低于NC-inhibitor转染组(1.01±0.14),差异具有统计学意义(t=4.19,P<0.05)。miR-1-mimics转染组迁移细胞数量[(362±10)个]明显高于NC-mimics转染组[(112±10)个],差异有统计学意义(t=21.65,P<0.01)。miR-1-inhibitor转染组迁移细胞数量[(64±8)个]明显低于NC-inhibitor转染组[(133±14)个],差异有统计学意义(t=17.07,P<0.01)。与NC-mimics转染组比较,miR-1-mimics转染组上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)表达减弱(t=19.28,P<0.01),神经钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达增强(t=5.43,P<0.01;t=23.14,P<0.01);与NC-inhibitor转染组比较,miR-1-inhibitor转染组E-cadherin表达增强(t=6.14,P<0.01),N-cadherin和Vimentin表达减弱(t=6.78,P<0.01;t=7.94,P<0.01)。结论 miR-1过表达可促进胃癌细胞的迁移;miR-1低表达能可抑制胃癌细胞的迁移;miR-1可能通过EMT转化增强胃癌细胞的迁移能力。
- 杨欢付海龙毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：微小RNA-1胃癌迁移上皮间质转化
- 低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响
- 2016年
- 目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P<0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P<0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。
- 付海龙杨欢毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌细胞5-氟尿嘧啶低浓度转录因子
- 不同状态p53小鼠骨髓间质干细胞分泌外泌体的差异被引量：4
- 2017年
- 目的:比较3种p53状态(p53^(+/+)、p53^(+/-)和p53^(-/-))的小鼠骨髓间质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,m BMMSC)分泌的外泌体(exosome)是否存在差异。方法:采用透射电镜及蛋白质印迹鉴定和分析p53不同状态m BMMSC分泌的外泌体的形态及膜表面特异性标志蛋白CD9和CD63,采用Nanosight纳米颗粒跟踪分析仪比较外泌体浓度和大小的差异。结果:3种m BMMSC分泌的外泌体均为圆形或椭圆形的膜性囊泡,直径均在100 nm左右。p53^(-/-)m BMMSC和p53^(+/-)m BMMSC分泌的外泌体浓度明显高于p53^(+/+)m BMMSC,p53^(-/-)m BMMSC与p53^(+/-)m BMMSC分泌的外泌体浓度无显著性差异。3种细胞来源的外泌体均表达膜表面特异性标志蛋白CD9、CD63。结论:p53缺失的m BMMSC能分泌更多的外泌体。
- 毛佳慧梁照锋田伊卿潘昭吉李霞钱晖许文荣
- 关键词：P53外泌体
- 胃癌外体(exosome)内miRNA-1的检测分析被引量：9
- 2016年
- 目的检测胃癌细胞系来源外体（exosome）及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析。结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803（6.51±0.41）和SGC-7901（14.81±1.30）中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1（1.05±0.25）,差异有统计学意义（t分别为11.26、10.38,P均〈0.01）;而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平（49.98±11.77和28.68±4.66）显著高于GES-1来源exosome（1.00±0.02）差异有统计学意义（t分别为4.162、5.942,P均〈0.01）;25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110（0.070,4.307）]平均表达水平高于癌旁组织[1.149（1.110,2.075）],差异有统计学意义（Z=-1.897,P〈0.05）。miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130（0.151,12.720）]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704（0.077,7.243）]明显增高（Z=-2.407,P〈0.05）,且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.723 0,95%可信区间（CI）为0.627 0～0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66%,特异性为68%。结论胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物。
- 付海龙杨欢毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌微小RNA-1血清
- 血清外体内fibulin-1检测在胃癌诊断中的应用被引量：3
- 2016年
- 目的评价血清外体（exosome）内fibulin-1蛋白分子在胃癌诊断中的临床应用价值。方法 Exosome沉淀法提取胃癌细胞及胃上皮细胞上清、胃癌患者及体检健康人血清exosome;western blot、ELISA法检测exosome内fibulin-1蛋白的表达水平,绘制ROC曲线并进行诊断效能分析。结果胃癌细胞及其上清exosome内fibulin-1表达水平显著低于胃上皮细胞及其上清exosome;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的表达水平（31.94±16.92）μg/mL明显低于体检健康者（47.16±17.27）μg/mL（P=0.045）;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的ROC曲线下面积（AUC^ROC）是0.727 5,95%可信区间（CI）为0.569 4～0.885 6,cut off值为43.19μg/mL,敏感性为70%,特异性为75%。结论血清exosome内fibulin-1分子有望作为胃癌诊断的潜在新型分子标志物。
- 杨欢付海龙毛佳慧李霞王梅钱晖许文荣
- 关键词：胃癌
