魏艳秋
- 作品数：8 被引量：34H指数：3
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中国科学院重点部署项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 鸭甲型肝炎病毒1型抗体检测方法及其专用试剂盒
- 本发明公开了一种检测鸭甲型肝炎病毒1型抗体的方法及其专用试剂盒。本发明提供了一种检测或辅助检测待测样本是否感染鸭甲型肝炎病毒1型的化学发光酶联免疫试剂盒，包括抗原蛋白，所述抗原蛋白为如下a或b或c：a)序列表中序列2所示...
- 刘文军杨利敏魏艳秋李芸李晶
- 文献传递
- 登革病毒血清型特异单克隆抗体的制备和鉴定被引量：1
- 2020年
- 登革病毒(Dengue virus,DENV)是全球传播最为广泛的虫媒病毒,由于缺乏快速鉴别感染病毒血清型的诊断技术,导致异型交叉感染引起重症登革出血热病例居高不下。为实现免疫学方法快速鉴别诊断不同血清型DENV感染,本研究采用哺乳动物细胞293T表达并纯化了4种DENV血清型NS1蛋白,免疫小鼠后通过杂交瘤技术制备了针对NS1蛋白的单克隆抗体。利用酶联免疫吸附方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、间接免疫荧光法(Indirect immunofluorescence assay,IFA)、免疫斑点杂交试验(Dot blotting)以及蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)确认所制备的单克隆抗体能够有效识别天然病毒NS1以及重组NS1蛋白。获得的单克隆抗体包含2株可识别1–4型DENV NS1蛋白的通用型抗体及3株分别针对DENV-1、DENV-2和DENV-4的血清型特异抗体。以所制备的DENV NS1抗体为基础,采用双抗体夹心ELISA可快速鉴别不同血清型DENV。DENV血清型特异单克隆抗体的制备和甄别DENV血清型ELISA方法的建立为快速鉴别感染DENV血清型的临床诊断奠定了基础。
- 刘杨张元魏艳秋张元魏艳秋贾晓娟陈启军
- 关键词：登革病毒NS1蛋白单克隆抗体
- 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测方法及其专用检测卡
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测方法及其专用检测卡。本发明采用荧光微球代替胶体金作为标记探针，制备了免疫荧光侧流层析试纸条，灵敏度较胶体金试纸条技术提升10倍以上。本发明提供的检测技术，既具备ELISA技术...
- 杨利敏刘文军魏艳秋孙蕾李晶范文辉
- 文献传递
- 一种超高灵敏的埃博拉病毒胶体碳侧流免疫层析检测方法的建立被引量：5
- 2018年
- 埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever, EHF)由于其高感染性和高致死率特点,快速鉴别诊断并实施隔离是最有效的防止疫情扩散的措施。文中建立了一种可以快速、高灵敏筛查埃博拉病毒(Ebolavirus,EBOV)感染的现场检测技术,用碳纳米颗粒标记抗EBOV基质蛋白VP40兔多克隆抗体,组装成一种可在15min内检测埃博拉病毒的胶体碳侧流免疫层析试纸条。将标记胶体碳颗粒的兔多抗喷涂于玻璃纤维素膜上制备碳标垫;以1mg/mL的抗VP40单克隆抗体(McAb,4B7F9)和羊抗兔IgG,按照2μL/cm的包被量印迹于硝酸纤维膜上,分别作为检测线与质控线,组装试纸条。该试纸条能够特异地检测EBOV重组VP40蛋白、EBOV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLP)和灭活EBOV,而与马尔堡病毒样颗粒(MARV-VLP)、流感病毒A/PR/8 (IAV/PR/8)、黄热病毒(YFV-17D)、登革热病毒2型(DEN2)无交叉反应,显示良好的特异性,对1 500份阴性血清进行检测,假阳性率为1.3‰,仅为WHO授权ReEBOV^(TM)胶体金试纸的1/100;该胶体碳试纸条检测灭活EBOV的最低检出限为100 ng/mL (相当于10~6 copies/mL),远优于ReEBOV^(TM)胶体金试纸条检出限(10μg/mL,相当于10~8 copies/mL)。热稳定性评价显示试纸条可在室温稳定保存1年以上。文中建立的EBOV胶体碳免疫层析试纸条能够快速、超高灵敏、特异地检测EBOV,为现场快速筛查EBOV感染提供一种新方法。
- 魏艳秋段勇成毕玉海王萌李云龙王选林玮范文辉王晶刘文军杨利敏
- 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测方法及其专用检测卡
- 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测方法及其专用检测卡。本发明采用荧光微球代替胶体金作为标记探针，制备了免疫荧光侧流层析试纸条，灵敏度较胶体金试纸条技术提升10倍以上。本发明提供的检测技术，既具备ELISA技术...
- 杨利敏刘文军魏艳秋孙蕾李晶范文辉
- 文献传递
- 鸭甲型肝炎病毒1型抗体CLEIA检测方法的建立被引量：5
- 2017年
- 为建立一种快速检测鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)抗体的化学发光酶联免疫分析方法(CLEIA),本研究从DHAV-1中国流行株中扩增获得病毒结构蛋白VP1编码基因,构建重组原核表达质粒pET-32a-VP1,并进行重组蛋白的诱导表达。将纯化后的重组VP1蛋白作为检测抗原建立了CLEIA检测方法。结果显示,利用建立的CLEIA方法对AIV、AMPV、DPV、ARV、MPV、RAV等病毒血清进行检测,均无交叉反应,特异性强;灵敏度高于ELISA方法;重复性试验变异系数为2.18%~4.33%,具有较好的重复性;且与中和试验的阳性符合率和阴性符合率分别为100%和80%。本研究建立的CLEIA方法可以用于DHAV-1感染监测及疫苗接种后的免疫评价。
- 银凤桂侯力丹魏艳秋杨宝芝李芸李晶张爽刘文军杨利敏
- 关键词：鸭病毒性肝炎VP1
- 分子诊断实验室去除核酸污染的方法学研究被引量：23
- 2021年
- 核酸检测因具有良好的灵敏度和特异性而被广泛应用于体外诊断、动植物商品检疫、法医鉴定等领域。然而操作过程中易受到核酸污染导致的假阳性结果,严重影响了检测准确性。因此寻找一种有效的防止和清除核酸污染的方案对于实验室正常运转及保障检测结果的可靠性具有重要意义。文中比较了几种不同清除核酸污染的方法,确认了84消毒液和PCRguard试剂可有效清除液体中及不同材质表面的核酸污染。另外,84消毒液和PCRguard试剂配合使用,可很好地解决核酸气溶胶污染。研究结果对于分子诊断实验室日常预防核酸污染及清除已发生的气溶胶污染提出了解决方案。
- 李云龙张健魏艳秋贾晓娟李小燕谭立明刘文军杨利敏
- 关键词：核酸检测PCR气溶胶
- 一种热稳定性埃博拉治疗性抗体的制备及应用
- 本发明公开了一种热稳定性埃博拉治疗性抗体的制备及应用。本发明提供了一种埃博拉病毒抗体的制备方法，包括如下步骤：采用重组病毒免疫禽类动物，得到所述抗体；所述重组病毒是采用埃博拉病毒糖蛋白替换水疱性口炎病毒的糖蛋白得到的重组...
- 杨利敏刘文军魏艳秋范文辉
- 文献传递
