汪波
- 作品数：24 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术生物学医药卫生更多>>
- 黄姑鱼肠道上皮细胞体外分离培养及鉴定
- 2022年
- 本研究旨在建立黄姑鱼(Nibea albiflora)肠道上皮细胞的体外分离培养及鉴定方法,为海水鱼类肠道功能及其发病机制相关研究提供细胞模型。以黄姑鱼肠道组织为研究对象,采用胰蛋白酶(0.25%)、胶原蛋白酶(1 mg/mL)和透明质酸酶(0.16 mg/mL)联合消化法对肠道组织进行不同时间(0、20、40、60和80 min)的消化,并对消化后的肠道细胞及残留肠道组织分别进行台盼蓝和苏木精-伊红(HE)染色,再通过显微镜观察确定终止细胞消化的最佳时间。在此基础上,对肠道上皮细胞进行原代培养并传代。在传代培养过程中,通过分析细胞形态、细胞生长曲线和肠道上皮细胞标志性蛋白表达等对培养细胞进行鉴定。结果表明:黄姑鱼肠道组织在消化40 min时便可以得到较多的肠道上皮细胞,在消化60 min时可以得到更多的细胞团,至80 min时肠道上皮细胞基本从基膜上全部消化下来,因此,本研究建议在40~60 min终止细胞消化为宜。所培养的传代肠道细胞呈"铺路石"形态,生长曲线呈明显的"S"形,经角蛋白-18(CK-18)免疫荧光染色呈阳性。进一步的实时荧光定量PCR分析表明上皮细胞标志性蛋白封闭蛋白(Claudin)、闭合蛋白(Occludin)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、碱性磷酸酶(AKP)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在培养的传代细胞中均有表达。综合上述结果表明,本研究所分离培养的细胞即为黄姑鱼肠道上皮细胞。综上所述,本研究成功建立了黄姑鱼肠道上皮细胞的体外分离培养及鉴定方法,为海水鱼类肠道功能及其相关机制研究提供了技术支撑。
- 王立改曾延清汪波汪波陈睿毅竺奇慧徐冬冬
- 关键词：黄姑鱼肠道上皮细胞细胞培养
- 一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用
- 本发明提供一种东星斑卵原细胞的分离纯化方法及其鉴定和应用，采用本发明的分离纯化方法，可从卵原细胞占比为10％左右的卵巢细胞悬液中，分离纯化得到占比在85.6～90.3％的卵原细胞；而且该方法对细胞的损伤小，获得的细胞活力...
- 胡景杰包振民汪波吴绍轩丁晖王梦娅王铭翊
- 一种在鱼类生殖系细胞中特异性表达基因的3’UTR区序列及其应用
- 本发明提供一种在牙鲆原始生殖细胞中调节基因表达的3′UTR区序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1；该3′UTR区序列用于调控基因在牙鲆原始生殖细胞中进行表达。本发明的3′UTR区序列为牙鲆鱼特有的序列，可以用于鲆鲽...
- 张全启汪波王慧贞齐洁王旭波于海洋贺艳刘金相王志刚
- 文献传递
- 一种鱼道式鱼类表型性状的图像无损采集设备
- 本实用新型公开了一种鱼类表型性状的图像采集设备，特别是一种鱼道式鱼类表型性状的图像无损采集设备，包括：工作流体管路、泵一、引射流体管路、环形射流管路、出口管路和鱼类表型性状图像获取装置；环形射流管路的一侧管口密封套接至引...
- 刘梦然包振民胡景杰汪波豆江灵
- 豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点及其应用
- 本发明提供了一种豹纹鳃棘鲈抗神经坏死病毒性状相关的SNP位点及其应用，包括6个SNP位点，各SNP位点前后碱基片段的序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.6所示。本发明提供的SNP分子标记可用于豹纹鳃棘鲈分子...
- 胡景杰汪波王靖雯韦存郭一兰丁晖王梦娅吴绍轩包振民
- 一种优化的牙鲆鱼β-肌动蛋白启动子
- 本发明的目的在于提供一种优化的牙鲆鱼β‑肌动蛋白启动子，本发明将在牙鲆中广泛表达的β‑肌动蛋白的启动子进行优化进而获得启动效率更强的重组启动子表达载体eGFP‑优β‑肌动蛋白。并且这一新的载体可使外源基因有效转入牙鲆不同...
- 齐洁汪波王慧贞张全启贺艳王志刚于海洋王旭波程杰
- 文献传递
- 一种豹纹鳃棘鲈的生长相关SNP分子标记及其应用
- 本发明提供了一种豹纹鳃棘鲈的生长相关SNP分子标记及其应用，包括75个SNP分子标记及一个与生长显著相关的基因型组合，其可用于豹纹鳃棘鲈分子标记辅助育种，加快选育具有优良生长性状的豹纹鳃棘鲈品种，为豹纹鳃棘鲈的选育工作提...
- 胡景杰汪波吴绍轩丁晖王梦娅王靖雯郭一兰包振民
- miR-430对斑马鱼原始生殖细胞迁移和性腺发育影响的初步研究被引量：2
- 2022年
- 为了探究microRNAs(miRNAs)在斑马鱼生殖细胞发育过程中所起的作用,本研究在斑马鱼胚胎期过表达miR-430,结果发现原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)迁移出现紊乱,并且通过qRT-PCR发现nanos3、piwil2及tdrd7等生殖质基因的表达水平显著下调。此外,在斑马鱼性腺发育过程中,通过组织学观察发现过表达miR-430会导致雌性斑马鱼卵母细胞发育异常、卵巢发育迟缓,但是对雄性生殖细胞及性腺的发育没有造成明显的影响,并且进一步统计分析表明,miR-430不影响斑马鱼的性别分化。综上所述,本研究初步明确了过表达miR-430对斑马鱼PGCs迁移、性腺发育以及性别分化的影响,并为进一步探究miR-430在斑马鱼生殖细胞发育过程中的功能及分子机制奠定了理论基础。
- 林小涵金超凡高晨汪波贺艳齐洁齐洁
- 关键词：斑马鱼显微注射PGCS
- 一种凡纳滨对虾表型数据测定方法
- 本发明公开了一种凡纳滨对虾表型数据测定方法，收集凡纳滨对虾的侧视图图像和俯视图图像后利用GCN图像分割算法对图像进行图像分割，分割出凡纳滨对虾身体的不同部位，得到不同部位所占像素的大小；根据预先在容器中计算出参照物的单位...
- 邵雪源曾启繁刘梦然汪波王浩胡景杰王师包振民
- 文献传递
- 牙鲆(Paralichthys olivaceus)生殖系细胞特异性基因筛选及Ddx19a在原始生殖细胞迁移中的功能研究
- 生殖细胞是多细胞生物进行遗传繁殖的一类细胞，在物种维持、延续以及进化发育中发挥着不可替代的作用。生殖细胞及其调控因子等始终是科学研究的热点，新的生殖细胞特异性表达基因及其功能也陆续被揭示。本研究应用多种生物信息学方法对牙...
- 汪波
- 关键词：牙鲆RNA-SEQ原始生殖细胞
