杨树青
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目国家公益性行业科研专项国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 2015年～2016年江苏盐城地区市场活禽与野生鸟类中J亚型禽白血病分子病原学调查被引量：4
- 2016年
- 为调查江苏省盐城地区市场活禽与野生鸟类中J亚型禽白血病病毒（ALV-J）的感染情况，本研究于2015年～2016年采集市场活禽粪便样品636份、野生鸟类粪便样品826份，提取RNA后利用荧光定量PCR方法检测ALV-J；利用普通PCR扩增阳性样品gp85基因，并进行克隆测序。荧光定量PCR结果显示，636份活禽粪便样品中有7份为阳性、826份野生鸟类粪便样品为阴性。PCR扩增、克隆测序得到2个当地土鸡ALV-J分离株的gp85基因，与国内外ALV-J参考病毒株同源性为87.6 %～95.3 %，并且2个样品在进化树的不同分支。本研究结果显示，市场活禽存在ALV-J感染，野生鸟类并未发现ALV-J，表明加强活禽流通过程中禽白血病的防控工作势在必行，同时需继续加强对野生鸟类中ALV-J的监测。
- 杨树青贠鲁祥王丽媛王海明鞠孜敬孙淑红
- 关键词：活禽市场野生鸟类J亚型禽白血病病毒
- 江苏盐城地区活禽市场与野生鸟类中J亚型禽白血病分子病原学调查
- 杨树青孙淑红
- 肠炎沙门菌SDBL-1分离株的生物学特性及传播途径探究被引量：2
- 2017年
- 为研究肠炎沙门菌(S.enteritidis)的生物学特性和传播途径,选择1株来自于AA肉鸡的肠炎沙门菌SDBL-1分离株,探究其半数致死量、生长特性、药敏试验、毒力因子;将SDBL-1分离株定量至7.09×109CFU·mL-1,感染组灌服0.5mL,同时对照组和空气传播组灌服等量的生理盐水,在灌服后不同时间测定空气传播组、感染组和对照组血液常规、淋巴细胞亚群指标,运用细菌分离的方法分析鸡在灌服后0~20d排毒规律,同时对空气传播组口腔拭子、泄殖腔拭子、羽毛囊以及剖检脏器等分离与鉴定沙门菌,测定环境(饲料、饮水、蚊蝇等)中沙门菌;应用平板凝集方法测定空气传播组抗体变化。结果显示:1)血液指标方面,空气传播组、感染组淋巴细胞比率下降,粒细胞比率、粒细胞数量以及中间细胞比率上升,同时淋巴细胞亚群CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比例出现下降;2)脏器指数方面,空气传播组肝指数显著增大(P<0.05),胸腺指数显著减小(P<0.05);3)感染情况,空气传播组发生感染,感染鸡通过粪便间歇性排毒,其口腔拭子、羽毛囊、泄殖腔拭子和部分脏器分离到沙门菌,其中沙门菌在食道的分离率最高,空气传播组在感染后第4天初次检测到沙门菌抗体,在感染后第14天血清均呈现抗体阳性;4)环境沙门菌检出情况,水线及饲料中分离到沙门菌,但羽毛和蚊蝇中没有分离到沙门菌。可见SDBL-1分离株能通过空气传播并引起鸡的感染,导致机体炎症反应,造成免疫功能紊乱和器官不同程度损伤;感染鸡通过粪便、口腔、泄殖腔间歇性排毒,环境拭子(如料槽中的饲料、水线)可分离到沙门菌,本研究探究了肠炎沙门菌的生物学特性和不同传播途径,为控制、预防沙门菌的流行和传播提供借鉴。
- 李金鑫杨树青王莉莉吴少鹏杨杰林海焦洪超孙淑红
- 关键词：肠炎沙门菌抗体
- 用RT-PCR检测海兰褐蛋鸡禽戊型肝炎病毒被引量：3
- 2016年
- 为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒（hepatitis E virus,HEV）,从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份。提取RNA后,进行禽HEVORF2基因片段的RT-PCR（reverse transcription PCR）检测,阳性样品进行克隆测序。同时采集疑似HEV感染鸡的肝,在两周龄SPF鸡进行了人工接种试验。结果表明,来自海兰褐蛋鸡群的40份粪便和10份血浆样品中,27份粪便样品和4份血浆样品为禽HEV RNA阳性。随机选取两个阳性样品的序列进行分析,其与国内外参考序列相似性为78.1%~98.3%。进化树分析显示与中国、欧洲参考株在同一分支,属于禽HEV基因3型。人工接种试验结果显示,接种后14d的SPF鸡肝中均鉴定出HEV RNA阳性（4/4）。我国蛋鸡群存在基因3型禽HEV。本研究首次发现并报道国内蛋鸡存在禽HEV,这为进一步了解禽HEV在我国鸡群的流行状况及其危害提供了依据。
- 杨树青孙嘉孔祥伟贠鲁祥孙淑红
- 关键词：海兰褐蛋鸡
- 贵州省地方品种鸡禽白血病病毒流行株的亚型鉴定及其分子特征分析被引量：8
- 2017年
- 为了解贵州省9个地方品种鸡群中禽白血病病毒(ALV)流行株亚型与分子特征,本研究2016年从该省8个地区9个地方品种鸡群共采集380份鸡蛋样品。采集卵白用ELISA试剂盒检测ALV-P27抗原,阳性卵白接种CEF和DF1细胞分离病毒,培养7 d后检测细胞培养液中ALV-P27抗原,对感染细胞cDNA以4对ALV特异性引物进行PCR鉴定与分型。并选取9个鸡群的部分ALV分离株进行gp85基因的克隆测序与序列分析。结果表明,9个鸡群的卵白样品ALV-P27抗原阳性率为0~36%;阳性卵白的CEF和DF1细胞培养上清P27抗原检测结果相同,阳性率为26.8%(15/56),并鉴定出其亚型全部为J亚型(ALV-J)。已测序的21株ALV-J gp85基因序列与国内外ALV-J参考株同源性为86.6%~100%;进化树分析显示,21株ALV-J分离株在不同的分支,其进化关系和来源之间未发现明显规律。本研究表明,贵州省9个地方品种鸡群有6个存在ALV-J感染。其中,3个当地培育的品种鸡ALV感染率为0;而来自3个地区的绿壳蛋鸡ALV-P27抗原阳性率普遍较高(26.7%~36.0%)。本研究补充了我国禽白血病流行病学的数据并为该病的防制提供了调查依据。
- 杨树青王丽媛贠鲁祥黄新鞠孜敬孙淑红
- 关键词：禽白血病病毒
- 地方品种JS鸡多发肿瘤病的病原学分析
- 2018年
- 为探究江苏地方品种JS鸡种易发肿瘤病的原因,本研究从病原学方面进行相关分析。通过剖检发现JS鸡疑似发生肿瘤病;观察组织切片发现禽白血病病毒(ALV)、马立克病毒(MDV)引起其的特征性病变;分别应用2对可区分MDV野毒和疫苗毒的鉴别引物、1对ALV群特异性引物、5对可区分不同亚型ALV的鉴别引物,以及3对网状内皮组织增生症病毒(REV)特异性引物对病料样品和细胞培养物进行PCR检测;同时,采用间接免疫荧光试验(IFA)检测培养细胞中的禽REV,ELISA检测细胞上清中ALV-p27抗原。检测结果显示,鉴定出的MDV为血清1型MDV野毒,ALV为J亚型(ALV-J),REV为阴性。采集同群发病鸡血液分离MDV、ALV-J,将获得的病毒株人工接种1日龄SPF鸡,感染后5 d自实验鸡血液中分离到MDV、ALV-J,表明该分离株可感染SPF鸡,具有良好的生物学活性。本研究从JS品种鸡中检测到了致瘤性病毒MDV和ALV-J,这可能是该品种鸡肿瘤病多发的主要原因之一,这一研究结果对JS鸡肿瘤病的防制提供了科学依据。
- 刘新勃孙嘉杨树青王莉莉鞠孜敬李舫孙淑红
- 关键词：肿瘤病病原学分析
- 12株禽痘疫苗毒中禽网状内皮组织增生病病毒5′LTR整合位点的比较研究被引量：1
- 2016年
- 为探究近年来禽痘（FP）疫苗中禽网状内皮组织增生病病毒（REV）5′长末端重复序列（LTR）的整合情况,收集2012—2014年不同地区不同批次的12株FP疫苗,稀释后接种鸡胚成纤维细胞（CEF）,提取细胞DNA,扩增REV相关基因并测定序列。结果表明,12个禽FP疫苗株均扩增出含REV-5′LTR和FPV片段在内的产物,其中2株国外疫苗扩增序列长度为745bp,10株国产疫苗扩增序列长度为485bp。经DNA-Star比对分析,2株国外疫苗整合了446bp的几乎完整的REV-LTR序列,另外10株国产疫苗整合的REV-LTR片段相对较小,仅为194bp。这12个FP疫苗株中整合的REV-LTR与中国近年分离到的REV野毒株HA1101的LTR的相似性为70.3%-82.6%,与国外已发表的FP毒株AY255632整合的REV-LTR的相似性高达98.6%-100%。结果提示,国内外FP疫苗整合有REV-LTR序列的现象普遍存在。本研究检测的12个FP疫苗株均整合有REV-LTR序列,一部分疫苗株整合了几乎完整的REV-LTR序列,而大部分疫苗株整合片段则相对较小,并且与国外已分离到的FP毒株的序列同源性更接近。
- 孔祥伟王丹王世新王海明杨树青孙淑红
- 关键词：禽网状内皮组织增生病病毒
- 禽戊型肝炎病毒与马立克病毒混合感染的鉴定及禽戊肝病原学调查
- 禽戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus,HEV）是鸡大肝大脾病(Big liver and spleen disease,BLS）或肝脾肿大综合征（Hepatitis-Splenomegaly,HS）的主要病...
- 杨树青
- 关键词：马立克病毒
- 采用血液、羽毛等材料鉴别鸡性别PCR方法的应用研究被引量：5
- 2016年
- 公母鸡染色体上的染色体螺旋蛋白基因(chromobox-he-licase-DNA binding gene,CHD 1基因)的内含子基因序列存在差异,通过PCR方法可扩增该基因内含子的保守序列,可对鸡等非平胸禽类的性别进行鉴定。本研究首先采集42只28日龄肉鸡抗凝血,完成血液DNA PCR鉴定性别,结果表明,42只商品肉鸡中22只公鸡、20只母鸡,与剖检结果相同;其次,采集20只90日龄SPF鸡(13只公鸡、7只母鸡)和15只2日龄SPF鸡的抗凝血和羽毛,完成其DNA的PCR鉴定以及与微量血的PCR检测结果的比较。结果表明,90日龄、2日龄SPF鸡的微量血PCR与抗凝血、羽毛提取DNA的PCR鉴定结果均相同,其中,90日龄SPF鸡与其外观性别完全吻合;另外,采集12枚15日龄鸡胚的尿囊液、羽毛、肌肉,提取DNA后PCR方法可扩增出区分性别的特异性条带,鉴定结果一致,12枚15日龄鸡胚中均为7个雄性、5个雌性。本研究表明,微量血PCR和血液、羽毛等材料提取DNA后的PCR方法均可准确快速鉴定鸡和鸡胚的性别,可作为家禽育种过程中常规鉴定方法的有力补充,适合大型养殖场规模化鉴定,也满足科研领域区分鸡和鸡胚性别的需求。
- 孙嘉杨树青孙珂党斌鞠孜敬孙淑红
- 关键词：血液羽毛性别鉴定
