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转基因玉米Bt11品系特异性荧光RPA检测被引量：6: 2017年; 重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了特异性引物和探针,建立了快速准确的荧光RPA检测方法,在39℃条件下,20 min内完成扩增并且能够实时监测,可以准确有效地检测到50个拷贝的靶标片段。而且,对于背景复杂的植物基因组DNA能够得到准确的扩增曲线。本研究不仅可以满足常规实验室检测,通过RPA便携式仪器,还可以满足转基因植物现场检测,具有广阔的应用前景。; 李凯金芜军李亮李亮刘卫晓苗朝华; 关键词：转基因检测

一种用于转基因玉米核酸含量分析的质粒参考物及核酸含量分析方法: 一种用于核酸含量分析的质粒参考物的构建方法，是将核酸样品的内标基因和待检测基因，又称外源基因共同构建到质粒载体中，替代基因组DNA，实现对待测样品的含量确定。连入到质粒的两个片段中间含有酶切位点，质粒DNA提取纯化后，用...; 李亮董美金芜军宛煜嵩刘卫晓李凯王迪; 文献传递

转基因马铃薯检测用质粒标准分子研制被引量：4: 2017年; 依据全球转基因作物商业化的强势发展态势,转基因马铃薯的普遍商业化已呈大势所趋。马铃薯是世界第四大食用作物,仅次于水稻、小麦和玉米。目前,全球获批商业化种植的转基因马铃薯45种,主要涉及抗虫、抗病毒及品质改良等性状。转基因技术在给人们带来巨大经济效益的同时,也引起了人们的担忧,主要包括食品安全及环境安全问题等,由此转基因生物产品成分的检测及监管的重要性凸显。在转基因检测领域,标准质粒以容易获得、纯度高、成本低与稳定性好等优点逐渐被广泛应用。在调研了所有商业化的转基因马铃薯的重要信息的基础上,针对这些转基因马铃薯的主要外源基因类型,构建含有抗马铃薯甲虫cry3A基因、胭脂碱合成酶启动子P-nos基因、抗马铃薯Y病毒pvycp基因及内标准基因尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶PATA基因的多靶标质粒pB JGMM003。该质粒可用于大部分已批准转化体及部分在研转基因马铃薯的鉴定、检测与监管工作,解决了转基因马铃薯的阳性标准品匮乏等问题,保障了转基因马铃薯相关工作的顺利进行。; 安娜董美李凯宛煜嵩金芜军韩阳李亮; 关键词：转基因马铃薯安全监管

转基因成分低水平混杂问题的现状被引量：5: 2017年; 近20年来,转基因作物的种植面积持续增加,转基因产品的流通量和流通速度呈迅速上升趋势。在不同国家与地区间,非转基因产品内出现低含量转基因成分的问题,即转基因成分低水平混杂日趋严重。以此问题为立脚点,比较全面的阐述了7个不同国家与地区(组织)的转基因成分低水平混杂的定义,分析了共同特点;总结了各国的现行政策与允许值的规定;概述了低水平混杂问题对进出口贸易方面产生的影响,旨为我国制定低水平混杂的相关政策及检测标准提供基础资料。; 柳方方董美李凯宛煜嵩金芜军李亮; 关键词：转基因作物阈值

应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定: 本发明公开了一种应用RPA技术对转基因玉米BT11品系特异性鉴定的方法。该方法首先提取待测样品的DNA作为模板，利用筛选的引物及探针进行RPA快速扩增及实时荧光检测，如果得到扩增曲线，则证明所检样品含有转基因玉米BT11...; 李亮李凯宛煜嵩董美金芜军刘卫晓潘海会温洪涛王永高进王迪; 文献传递

应用RPA技术对转基因玉米Bt176品系特异性鉴定: 本发明公开了一种应用RPA技术对转基因玉米BT176品系特异性鉴定的方法。该方法首先提取待测样品的DNA作为模板，利用筛选的引物及探针进行RPA快速扩增及实时荧光检测，如果得到扩增曲线，则证明所检样品含有转基因玉米BT1...; 宛煜嵩李凯李亮董美金芜军刘卫晓温洪涛潘海会王永高进王迪; 文献传递

转基因水稻PA110-15基于RPA等温扩增及DNA试纸条联检的品系特异性检测方法被引量：7: 2017年; 水稻作为最重要的粮食作物之一,其转基因安全性一直受到各国政府和人民的广泛关注。为了保障和引导公众对转基因水稻的正确而全面的认识,转基因生物安全检测工作必不可少。在目前的转基因检测工作中,核酸扩增技术是最为常用的检测方法。PCR技术是最成熟、应用最广泛的一种核酸扩增技术。然而,PCR技术对温控条件的极度依赖性制约它在田间的现场快速检测。本研究以转基因水稻PA110-15为对象,建立了重组酶聚合酶等温扩增及DNA试纸条联检的品系特异性检测方法,减少了对专用仪器的依赖,为快速现场转基因检测提供了新的解决方案。; 贾玄李凯董美金芜军李亮李亮刘卫晓苗朝华; 关键词：RPA 转基因检测

一种基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法: 本发明公开了一种基于油滴生成技术的转基因玉米高通量检测方法。运用油滴生成技术对20种不同的转基因玉米成分进行多重PCR检测的实验方法。包括反应体系优化、微小油滴反应体系生成、多重油滴PCR扩增和毛细管电泳以及图像采集。本...; 李亮李凯宛煜嵩董美金芜军刘卫晓高进王迪; 文献传递

应用RPA-DNA试纸条联检对转基因水稻PA110-15品系特异性检测方法: 本发明首次公开了将重组酶聚合酶等温扩增技术（Recombinase Polymerase Amplification,RPA）及DNA试纸条联检应用于检测含有转基因水稻PA110‑15品系及其衍生品种成分的引物及探针组合...; 宛煜嵩金芜军贾玄王永李凯董美李亮苗朝华刘卫晓高进兰青阔王迪; 文献传递

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李凯