孙强
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：吉林农业大学食品科学与工程学院更多>>
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- 抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备及其免疫学特性鉴定被引量：2
- 2013年
- 为制备抗柱状黄杆菌多克隆抗体,本研究利用颗粒性抗原免疫新西兰白兔,收集的抗血清通过辛酸-硫酸铵法纯化,采用间接ELISA法检测纯化后多克隆抗体的效价和交叉反应性。结果显示,制备的多克隆抗体蛋白质浓度为29.28mg/mL,效价在1∶6.4×104以上,与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及哈维氏弧菌等水生动物致病菌均无交叉反应。本研究成功建立了抗柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,可用于柱状黄杆菌的快速检测。
- 吕娜赵国坤孙强张虹茜殷晓平张懋岚张捷
- 关键词：柱状黄杆菌多克隆抗体免疫学特性
- 柱状黄杆菌双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2014年
- 为快速检测柱状黄杆菌,本研究以纯化的柱状黄杆菌单克隆抗体为捕获抗体,以多克隆抗体为检测抗体,建立了双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测法。最佳的方案为用0.08μg/孔纯化的单克隆抗体4℃包被过夜,30g/L牛血清白蛋白37℃封闭90min,多克隆抗体的工作浓度为0.11μg/孔,检测抗原、多克隆抗体、酶标抗体均为37℃作用1h,显色15min后终止反应,当D492nm值≥0.776且P/N≥2.1时判定为阳性。该方法特异性强,与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌等水产病原菌均无交叉反应。最低检测剂量为1×103 CFU。本研究首次建立了检测柱状黄杆菌的双抗体夹心ELISA方法,经验证该方法特异性强、灵敏度高。
- 吕娜殷晓平张虹茜张懋岚孙强赵国坤张捷
- 关键词：柱状黄杆菌双抗体夹心ELISA单克隆抗体
- 柱状黄杆菌胶体金免疫层析快速检测方法的建立被引量：1
- 2014年
- 为建立一种通过胶体金免疫层析技术快速检测柱状黄杆菌的方法,试验采用柠檬酸三钠还原法制备粒径为20nm的胶体金颗粒,将其标记纯化的抗柱状黄杆菌单克隆抗体(McAb)制备出金标抗体结合垫。纯化的兔抗柱状黄杆菌多克隆抗体(PcAb)和羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜的检测线(T)与质控线(C)上,制备出胶体金免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度、特异性及稳定性进行测定。结果显示,该试纸条检测灵敏度为1×103 CFU,检测时间为3.5min,制备的试纸条与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌均无交叉反应,且稳定性好。本研究首次成功建立了柱状黄杆菌胶体金快速检测方法,所制备的试纸条具有灵敏、特异、稳定、快速等优点,可用于柱状黄杆菌的检测。
- 吕娜张虹茜殷晓平张懋岚赵国坤孙强张捷
- 关键词：柱状黄杆菌胶体金
- 抗柱状黄杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定被引量：2
- 2013年
- 为制备针对柱状黄杆菌的单克隆抗体(McAb),利用颗粒性抗原免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合。经过有限稀释法筛选,得到2株稳定分泌抗柱状黄杆菌McAb的杂交瘤细胞株(2B5和4G7)。其分泌抗体亚类属于IgG1,轻链属于κ链。制备的McAb与迟钝爱德华氏菌、大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈维氏弧菌等水产病原菌均无交叉反应。表明首次成功建立了抗柱状黄杆菌McAb的制备方法,为柱状黄杆菌的快速检测奠定了基础。
- 吕娜张懋岚张虹茜殷晓平赵国坤孙强张捷
- 关键词：柱状黄杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞免疫学特性
