闫珂
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎患者血清HBV-DNA与常用血清标志物的相关分析
- 目的评估乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量与血清免疫和生化标志物之间的关系。方法收集乙型病毒性肝炎患者血清214例,分别用荧光定量PCR法、化学发光法和速率法检测血清中的HBVDNA、乙肝病毒表面抗...
- 闫珂钟政荣丁淑琴张伦军丁晓琳
- 关键词：HBV-DNA
- 文献传递
- 日本血吸虫果糖二磷酸醛缩酶的重组表达及其在血吸虫生活史各阶段的表达分析
- 2015年
- 目的在大肠杆菌中原核表达、纯化日本血吸虫果糖二磷酸醛缩酶(rSjFBPA),观察其在血吸虫生活史各阶段的表达。方法以日本血吸虫成虫c DNA为模板扩增rSjFBPA基因,克隆至pET28a(+)质粒后,再转化入E.coli BL21。含重组质粒的菌株经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定重组蛋白rSjFBPA是否表达,用层析法纯化rSjFBPA并用SDS-PAGE鉴定其纯度。同时,用RT-PCR方法分析SjFBPA在血吸虫尾蚴、童虫、成虫和虫卵各阶段的表达情况。结果经PCR扩增出目的基因,含目的基因的TA克隆质粒经双酶切和测序鉴定,证明插入片段与预期目的基因序列相符。Western blotting结果显示,表达后的重组蛋白可与His-tag单克隆抗体发生特异性反应。经镍亲和层析法制备了纯化的重组SjFBPA蛋白,纯化重组蛋白浓度达4 mg/ml。RT-PCR结果显示,SjFBPA在日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫和虫卵阶段均有表达。结论 SjFBPA基因被成功克隆和表达,其在日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫和虫卵各阶段均有表达。
- 闫珂钟政荣徐云侠丁淑琴胡建国徐元宏罗庆礼沈继龙
- 关键词：日本血吸虫克隆纯化
