赵然
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SND1通过激活SLUG表达促进SKOV3细胞上皮间充质转化(EMT)
- 研究目的：肿瘤的转移是一个错综复杂的过程，不同信号通路和多种调控分子在其中交互影响，彼此发挥不可替代的作用。这种生物学行为的发生是由肿瘤细胞形态伴随分子特性向间充质表型转化所导致的，在细胞获得了间充质特性后会更容易迁移和...
- 赵然
- 关键词：上皮间充质转化乙酰转移酶
- SND1通过激活SLUG表达促进SKOV3细胞上皮间充质转化（EMT）
- 研究目的:肿瘤的转移是一个错综复杂的过程,不同信号通路和多种调控分子在其中交互影响,彼此发挥不可替代的作用。这种生物学行为的发生是由肿瘤细胞形态伴随分子特性向间充质表型转化所导致的,在细胞获得了间充质特性后会更容易迁移和...
- 赵然
- 关键词：SLUG上皮间充质转化
- 文献传递
- SND1激活SLUG的表达促进卵巢癌的转移
- 目的:卵巢癌是一种常见的妇科肿瘤,由于缺乏早期诊断的方法以及后期对化疗药物的抵抗,导致卵巢癌的致死率很高。SND1在多种肿瘤中高表达,且与肿瘤的增值和转移关系密切。SND1可以作为转录共激活因子促进下游基因的表达。但是S...
- 辛灵彪赵然雷静杨洁
- 关键词：SLUGEMT卵巢癌
- 文献传递
- 过表达和敲除SLUG基因卵巢癌SKOV3细胞稳定株的建立被引量：3
- 2017年
- 目的利用慢病毒载体和改良的CRISPR/Cas9基因编辑系统分别构建过表达和敲除SLUG基因的卵巢癌SKOV3细胞稳定株。方法 (1)以质粒p CMV-Myc-SLUG为模板扩增出HA-SLUG基因,将其连接到慢病毒表达质粒p LVX-IRES-Hyg中。将此重组表达载体p LVX-HA-SLUG通过病毒感染法感染SKOV3细胞(实验组),以相同条件制备p LVX-IRES-Hyg空载体的慢病毒作为阴性对照,Western blotting法检测两组SLUG蛋白表达。(2)将一对能特异结合SLUG基因的sgRNA分别连接到载体PX462中,获得的一对重组质粒通过脂质体法共转染SKOV3细胞,筛选稳定株,挑取单克隆细胞(实验组),用Western blotting法检测SLUG蛋白表达,另设空白对照组,不加任何处理。结果 (1)对挑取的单克隆菌液进行PCR扩增,阳性者提取质粒进行PCR和双酶切,两者验证正确后进行DNA测序鉴定,结果证实重组质粒构建成功。阴性对照组与实验组SLUG蛋白相对表达量分别为0.92±0.02和3.14±0.04,实验组SLUG蛋白表达高于阴性对照组(P<0.01)。(2)挑取4个单克隆细胞进行测定,SLUG蛋白的相对表达量分别为0.07±0.01、0.06±0.01、0.21±0.02、0.20±0.01,空白对照组为0.56±0.03。实验组SLUG蛋白相对表达量低于空白对照组(P均<0.01)。结论过表达和稳定敲除SLUG基因的SKOV3细胞株构建成功,为进一步探讨SLUG在卵巢癌中的作用提供了细胞模型。
- 雷静赵然高茹辛灵彪刘欣
- 关键词：SLUG基因慢病毒载体SKOV3细胞卵巢癌细胞模型
- SND1激活SLUG的表达促进卵巢癌的转移
- 目的：卵巢癌是一种常见的妇科肿瘤，由于缺乏早期诊断的方法以及后期对化疗药物的抵抗，导致卵巢癌的致死率很高.SND1在多种肿瘤中高表达，且与肿瘤的增值和转移关系密切.SND1可以作为转录共激活因子促进下游基因的表达.但是S...
- 辛灵彪赵然雷静杨洁
- 关键词：SLUGEMT卵巢癌
- 雷公藤多苷联合小檗碱对糖尿病肾病大鼠肾小球足细胞相关因子的干预研究
- 目的: 糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(Diabetes mellitus，DM)主要的微血管并发症之一，以高血压、蛋白尿和进行性肾功能丧失为特征，是导致终末期肾病(End sta...
- 赵然
- 关键词：糖尿病肾病雷公藤多苷小檗碱肾小球足细胞损伤中药疗效
- 文献传递
- 人SND1基因慢病毒载体构建及稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株筛选被引量：3
- 2016年
- 目的构建人SND1基因慢病毒载体,筛选稳定表达SND1蛋白的人卵巢癌SKOV3细胞株,为探讨SND1基因对卵巢癌的调控作用提供细胞系模型。方法采用PCR法从pCMV-FLAG-SND1质粒中扩增FLAG-SND1基因片段,连接到慢病毒载体表达质粒pLVX-IRES-Hyg中,获得重组慢病毒载体pLVX-FLAG-SND1。以pLVX-FLAGSND1瞬时转染293T细胞48 h,采用Western blotting法检测SND1蛋白表达量。pLVX-FLAG-SND1重组质粒通过与包装质粒共转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。以慢病毒感染SKOV3细胞48 h,在细胞培养基中加入1μg/mL潮霉素B,筛选稳定表达SND1蛋白的细胞株,采用Western blotting法检测该细胞株内SND1蛋白表达量。结果重组慢病毒载体经双酶切和基因测序比对鉴定正确。重组慢病毒载体在瞬时转染的293T细胞中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。SKOV3细胞经慢病毒感染、药物筛选后获得的稳定表达株中SND1蛋白表达量高于野生型SKOV3细胞(P<0.01)。结论成功构建了SND1基因慢病毒载体pLVXFLAG-SND1,并筛选出稳定表达SND1蛋白的SKOV3细胞株,为进一步明确卵巢癌发生、发展机制奠定了基础。
- 任媛媛雷静赵然辛灵彪苏超高星杰杨洁
- 关键词：慢病毒载体SKOV3细胞卵巢癌
