张兴峰
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：福建农林大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 人血清白蛋白基因的克隆及其真核表达载体构建
- 2013年
- 利用RT-PCR扩增并克隆了含人血清白蛋白序列长约1.8 kb的片段,酶切鉴定并进行序列分析,测序结果与GenBank中登录的人血清白蛋白cDNA序列的同源性为97%;以鹌鹑卵清蛋白5’调控区POV来启动HAS的表达。用限制性内切酶kpnⅠ和HindⅢ双酶切质粒pOV和pHSA,然后用T4连接酶定向连接成重组质粒pOV-pHSA,经酶切鉴定,两者成功融合。
- 洪志勇李玉芳张兴峰林秀娇李鸿翔庄益芬张文昌
- 关键词：人血清白蛋白鹌鹑
- 鹌鹑PGCs的传代培养及鉴定
- 2013年
- 试验采用鸡胚胎制作的成纤维细胞饲养层培养细胞,成功实现鹌鹑原始生殖细胞(PGCs)的传代培养;并通过对比试验,验证了生长因子LIF、SCF、bFGF能够显著提高PGCs存活率和抑制其分化。
- 李玉芳洪志勇李明张兴峰林秀娇李鸿翔庄益芬张文昌
- 关键词：鹌鹑PGCS传代
- 人血清白蛋白基因在鹌鹑两种细胞上表达的研究
- 2013年
- 培养鹌鹑输卵管上皮细胞和鹌鹑胚胎成纤维细胞作为检测平台,将重组后的人血清白蛋白表达载体用脂质体包埋法转染以上两种细胞,通过荧光显微镜观察到报告基因绿色荧光蛋白的表达,结果表明构建的表达载体在成纤维细胞上未见表达;而原代输卵管上皮细胞上有表达。取转染细胞的基因组DNA,设计特异性的检测引物,用PCR筛选法检测了报告基因表达的阳性细胞克隆,SDS-PAGE银染色法确定鹌鹑输卵管上皮细胞分泌蛋白的分子量,结果显示在转染的鹌鹑输卵管上皮细胞培养上清中含有分子量约为68kDa的HSA。表明构建的表达载体是有效的,而且表达构件已经初步整合到阳性鹌鹑输卵管上皮细胞的染色体中。
- 洪志勇李玉芳李明张兴峰林秀娇李鸿翔庄益芬张文昌
- 关键词：人血清白蛋白鹌鹑细胞表达
