目的:利用si RNA沉默EPCAM基因,观察对结肠癌HCT116细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:将针对EPCAM基因不同位点的3个si RNA(分别命名为EPCAM-si RNA-1、EPCAM-si RNA-2、EPCAM-si RNA-3)以及阴性对照组和空白对照组分别转染结肠癌HCT116细胞,利用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞EPCAM m RNA和蛋白的表达。选取对目的基因沉默效果最强的一组si RNA转染结肠癌细胞,MTT法检测转染前后细胞的增殖活性,transwell实验检测转染前后细胞的侵袭能力。结果:3条EPCAM si RNA均能有效抑制EPCAM基因的表达,其中EPCAM-si RNA-1抑制效果最强,与空白对照组相比,EPCAM m RNA和蛋白表达量分别降低59.6%和54.5%。MTT结果表明EPCAM-si RNA-1组HCT116细胞生长速度明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),Transwell实验结果表明实验组细胞侵袭能力明显低于两个对照组(P<0.05)。结论:EPCAM si RNA可以有效抑制结肠癌HCT116细胞EPCAM的表达,可以明显降低HCT116细胞的增殖和侵袭能力。
