陈玥颖
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目高等学校学科创新引智计划教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小麦条锈菌PsMAPK1基因克隆及功能验证
- 由小麦条锈菌引起的小麦条锈病是小麦生产上的一种重要病害,其大流行年份常常造成小麦产量的减产甚至绝收,严重威胁我国粮食生产。由于小麦条锈菌是一种严格专性寄生菌,其遗传转化体系还不成熟,在分子水平上对小麦条锈菌基因进行的研究...
- 代西维段迎辉陈玥颖郭军黄丽丽康振生
- 关键词：条锈菌基因表达
- 文献传递
- 小麦条锈菌PsMAPK1基因克隆及功能验证
- 由小麦条锈菌引起的小麦条锈病是小麦生产上的一种重要病害，其大流行年份常常造成小麦产量的减产甚至绝收，严重威胁我国粮食生产。由于小麦条锈菌是一种严格专性寄生菌，其遗传转化体系还不成熟，在分子水平上对小麦条锈菌基因进行的研究...
- 代西维段迎辉陈玥颖郭军黄丽丽康振生
- 关键词：条锈菌基因表达
- 小麦条锈菌PsNCS1基因的克隆及转录表达特征被引量：2
- 2010年
- 【目的】克隆小麦条锈菌神经钙离子感应蛋白基因PsNCS1,分析其在病菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用文库筛选和RT-PCR技术克隆PsNCS1的cDNA序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,构建系统发育树;运用实时荧光定量RT-PCR技术分析PsNCS1在病菌不同生长发育时期的表达水平。【结果】PsNCS1全长cDNA为1007bp(GenBank登录号GU134621),开放阅读框为573bp,编码190个氨基酸,分子量为22.17kDa,等电点为4.96。编码蛋白含有4个钙结合蛋白的保守结构域EF-hand,并且具有N末端豆蔻酰化特征。编码蛋白与担子菌门真菌NCS蛋白相似性最高,其中与小麦秆锈菌的NCS亲缘关系最近,序列相似性达96%。PsNCS1在夏孢子和芽管时期表达量较高,均超过其他发育阶段基因表达量的2倍。【结论】PsNCS1可能参与了条锈菌夏孢子的形成和芽管的延伸。PsNCS1的克隆与表达分析为进一步研究条锈菌细胞钙信号传导机理和致病机制奠定了基础。
- 郭军张洪丁可代西维陈玥颖段迎辉黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌基因克隆实时定量RT-PCR
- 小麦条锈菌一个产孢相关基因PsCon1的克隆及表达特征分析被引量：6
- 2010年
- 【目的】克隆小麦条锈菌产孢相关基因PsCon1,分析其在病菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用RT-PCR和PCR技术克隆PsCon1的cDNA序列和基因组序列,采用生物信息学技术预测分析该基因的DNA序列结构及其编码蛋白的保守域等基本特性,运用实时荧光定量RT-PCR技术分析PsCon1在夏孢子,芽管以及不同侵染时间的表达水平。【结果】PsCon1由3个外显子和2个内含子构成,开放阅读框长为252bp,编码83个氨基酸;编码的蛋白PSCON1不含跨膜区,无信号肽,定位在细胞质,具有2个conidiation-specific protein6保守结构域。PsCon1与小麦秆锈菌核苷酸序列的一致性在外显子区为78%,内含子区为43%,与小麦秆锈菌(Puccinia graminis)的亲缘关系最近,与烟曲霉(Aspergillus fumigatus)和费氏新萨托(Neosartorya fischeri)的亲缘关系次之。PsCon1在小麦条锈菌萌发夏孢子时期基因表达量为新鲜夏孢子中的1.69倍。在亲和组合中,PsCon1在小麦条锈菌接种小麦后6h和24h表达量最高,分别为在新鲜夏孢子中表达量的3.21倍和2.91倍;在接种后24h至168h,基因表达基本呈下调趋势,在接种后168h的表达量最低,仅为夏孢子时期的0.0004倍,在接种后216h和264h,表达量有所增加,表达量约为接种后168h的15倍。在非亲和组合中,PsCon1在小麦条锈菌接种小麦后36h表达量最高,但仅为新鲜夏孢子基因表达量的0.13倍,基因表达总体呈下调趋势。【结论】PsCon1参与了小麦条锈菌对小麦的侵染,可能作为一个致病相关基因影响了条锈菌芽管和吸器的形成,同时促进了条锈菌在侵染过程中的产孢。PsCon1的克隆为进一步研究该基因在小麦与条锈菌互作过程中的功能奠定了基础。
- 陈玥颖郭军代西维段迎辉魏国荣黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌实时荧光定量PCR
- 小麦条锈菌PsCdc2基因的克隆及在条锈菌侵染小麦后的转录表达分析被引量：7
- 2010年
- 【目的】克隆小麦条锈菌细胞分裂基因PsCdc2,分析该基因在条锈菌接种小麦后不同时间点的表达特征。【方法】利用PCR和RT-PCR技术克隆PsCdc2的cDNA序列和基因组序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,对该蛋白进行系统发育分析,构建进化树;运用实时荧光定量RT-PCR技术,以PsCdc2在夏孢子时期的表达情况为对照,分析该基因在亲和及非亲和互作中不同时间点的表达特征。【结果】PsCdc2基因组序列长2279 bp,由11个外显子和10个内含子构成,开放阅读框为885 bp,编码294个氨基酸,分子量为33.14 kDa,等电点为6.26。编码蛋白含两个保守的激酶特征位点,一个跨膜螺旋区域。PsCdc2基因编码蛋白与小麦秆锈菌、新型隐球菌、玉米瘤黑粉菌等多种真菌的Cdc2高度相似,其中与小麦秆锈菌的Cdc2亲缘关系最近,序列相似性达73.1%。实时荧光定量RT-PCR结果表明,在亲和组合中,该基因在条锈菌接种小麦的前期上调表达,其中接种后12 h时表达量最高,约为夏孢子中表达量的1.62倍,接种后24-268 h,基因表达基本呈下调趋势,其中96 h基因表达量最低,仅为夏孢子时期的0.07倍。在非亲和组合中,该基因表达基本呈下调趋势,在接种后各个时间点的表达量均低于在夏孢子中的表达量,其中接种后12 h时表达量最高,但仅为夏孢子中表达量的0.34倍;接种后96 h表达量最低,为夏孢子中表达量的0.02倍。【结论】PsCdc2可能通过调控条锈菌的细胞周期循环参与了侵染前期初生菌丝生长和吸器母细胞的形成,与条锈菌的致病性相关。本文首次报道了小麦条锈菌的Cdc2基因,为进一步揭示条锈菌细胞周期调控的本质及研究开发靶向Cdc2的新型农药,以及实现对小麦条锈病的新型药剂防治提供了理论基础。
- 代西维郭军陈玥颖段迎辉夏宁魏国荣黄丽丽康振生
- 关键词：细胞周期蛋白依赖性激酶进化树实时定量PCR
