江一帆
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 快速检测App-Hps的双重PCR方法
- 2013年
- 猪的细菌性呼吸道疾病是危害养猪业的重要疾病征候群。猪胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus pleuropneumoniae , App）和副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis , Hps）是猪常见的呼吸道病原菌，导致呼吸道的急慢性炎症，严重时引起猪只死亡。
- 曹靖雨朱玲徐志文江一帆钟晓霞陈莉群鲁力
- 关键词：PCR方法HPS猪胸膜肺炎放线杆菌副猪嗜血杆菌
- 猪细小病毒四川株的分离鉴定及其一步生长曲线
- 2013年
- 为了研究猪细小病毒(PPV)的增殖规律,利用PK-15细胞从流产胎儿的肝、肠系膜淋巴结和肾样品中分离到1株病毒,经PCR检测、蚀斑纯化、病毒理化试验、微量中和试验和血凝试验证实该分离株为猪细小病毒,命名为SC-L。针对PPV的VP1和NS1基因设计特异性引物,建立PPV的荧光定量PCR方法。以SC-L分离株感染PK-15细胞,感染后每隔4h分别收集感染细胞与上清液,利用荧光定量PCR方法对不同样品中的病毒DNA进行定量分析,绘制PPV SC-L的一步生长曲线。PPV SC-L株感染PK-15细胞,细胞外病毒含量在第4～20小时缓慢增加,20h后呈对数增长,第56小时达到最大值,随后病毒含量迅速下降,在第68小时时趋于稳定;在细胞内感染4h检测到微量的病毒粒子,第4～24小时细胞内病毒缓慢增长,24h细胞内病毒粒子呈对数增长,第44小时达到最大量,随后胞内病毒粒子逐渐降低。表明PPV在细胞内增殖到一定数量后逐步释放到细胞外,且细胞外病毒最大量高于细胞内。
- 江一帆吴云飞朱玲徐志文阳爱国廖珊陈蕾黄仆郭万柱
- 关键词：猪细小病毒实时荧光定量PCR
- 托样受体3(TLR-3)信号通路介导的病毒免疫逃逸被引量：1
- 2016年
- 天然免疫是机体抵御病毒入侵的首道防线,对病原快速有效地识别是激发天然免疫的前提。动物的天然免疫依赖一类能够识别微生物特定组分的模式识别受体（Pattern recognition receptors,PRRs）。其中,托样受体3（Toll like receptor-3,TLR3）通过识别病毒感染时产生的dsRNA,启动下游的信号转导,上调Ⅰ型干扰素α和β（Interferonα/β,IFNα/β）的表达,Ⅰ型干扰素能够诱导细胞产生抗病毒蛋白（Antivirus protein,AVP）,同时也有助于激发机体的适应性免疫。
- 江一帆汪铭书程安春
- 关键词：模式识别受体病毒入侵免疫逃逸信号通路介导
- 猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2013年
- 为制备猪巨细胞病毒(PCMV)gB优势抗原表位区重组蛋白的多克隆抗体,进一步分析PCMV gB蛋白的生物学特性,建立PCMV抗体血清学检测方法。对PCMV gB基因优势抗原表位区进行了PCR扩增,将回收的目的片段连接入pET32a(+)表达载体,转化入E.coli Rosetta(DE3),构建了重组表达菌E.coli Rosetta-pET32a(+)-gB,经IPTG诱导表达了gB优势抗原表位区重组蛋白。对重组蛋白进行纯化后,通过Western-blot试验验证了重组蛋白的反应原性,并免疫家兔制备了多克隆抗体。结果表明,该重组蛋白大量可溶性表达,且具有良好的反应原性。琼脂扩散试验及Western-blot检测表明,多克隆抗体效价达到1∶8,且能与gB优势抗原表位区重组蛋白特异性结合。证实,成功制备了PCMV gB优势抗原表位区重组蛋白多克隆抗体。
- 江一帆刘骁廖珊朱玲周远成
- 关键词：多克隆抗体
