宋刚
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全人源抗人肿瘤坏死因子α单克隆抗体注射液对食蟹猴的长期毒性试验被引量：1
- 2015年
- 目的评价全人源抗人肿瘤坏死因子α单克隆抗体(抗-h TNF-αFHMA)注射液对食蟹猴的长期毒性。方法将40只食蟹猴随机分成5组,分别为阴性对照组、阿达木单抗10 mg·kg^(- 1)对照组和抗-h TNF-αFHMA 2,10和50 mg·kg^(- 1)组,经皮下注射每周给药1次,连续给药5次,停药后恢复期4周。实验期间进行临床观察、体质量、体温、心电图、血细胞计数、凝血功能、血液生化、尿液、眼科、免疫指标、脏器及组织病理观察,同时进行血药浓度检测,分析毒代动力学参数。结果实验期间各组食蟹猴的观察、体质量、体温、心电图参数、眼科检查、血细胞计数、凝血功能、血生化、尿液分析、淋巴细胞亚群、细胞因子、血清免疫球蛋白和血清补体等指标均未见与给药相关的具有毒理意义的改变;抗-h TNF-αFHMA和阿达木单抗均可引起食蟹猴体内产生抗药抗体,且具有中和活性。抗-h TNF-αFHMA在体内基本呈线性动力学特征。相同剂量下与阿达木单抗呈现相似的免疫原性和代谢动力学特征。结论抗-h TNF-αFHMA未观察到不良反应的剂量为50 mg·kg^(- 1),相当于临床拟用剂量(0.67 mg·kg^(- 1))的75倍,表明抗-h TNF-αFHMA临床应用安全性较好。
- 张囡王炯张雅婷宋刚詹珊珊潘勇兵
- 关键词：阿达木单抗毒性试验
- 竞争ELISA法检测抗新型冠状病毒RBD单抗阻断活性方法的建立及验证
- 2020年
- 目的:建立竞争ELISA法测定抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2) RBD单克隆抗体对RBD与ACE2蛋白结合的阻断活性,并对方法进行验证,同时与蚀斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)测得的活病毒中和活性进行比较及相关性分析。方法:以RBD-Fc为包被抗原,加入ACE2-His和抗SARS-CoV-2 RBD单抗,两者竞争性结合RBD,使用辣根过氧化酶标记的抗6×His抗体作为二抗,建立检测抗SARS-CoV-2 RBD单抗阻断RBD与其受体ACE2结合的竞争ELISA法,并对该方法进行专属性、相对准确度、精密度、线性和范围的验证。采用该方法对7株SARS-CoV-2单抗阻断活性进行检测,并将结果与PRNT法检测结果进行比较及相关性分析。结果:建立的竞争ELISA法能有效检测抗SARS-CoV-2 RBD单抗阻断RBD与ACE2蛋白结合的作用,其阻断能力存在量效关系,且符合四参数方程;理论效价为64%,80%,100%,125%,156%的样品测定10次,相对偏倚均在±20%范围内;以效价理论值的对数(横坐标)对其相应的效价测定值的对数(纵坐标)作直线回归,回归方程为y=1.156x-0.021 3,斜率在0.8~1.25之间,相对准确度良好。每个效价水平相对效价测定值的几何变异系数(geometric coefficient of variation,GCV)分别为2.6%,5.2%,3.6%,3.4%和10.2%,均<20%,精密度良好;直线回归方程相关系数为0.985,线性符合要求。本方法相对准确度、中间精密度和线性均符合要求的效价水平范围为64%~156%。7株SARSCoV-2 RBD单抗的检测结果与PRNT法检测结果具有较好的相关性。结论:成功建立了抗SARS-CoV-2 RBD单抗竞争ELISA的检测方法,该方法具有良好的专属性、相对准确度、精密度和线性,并与PRNT法检测结果具有较好的相关性,可用于间接评价相关SARS-CoV-2单抗对活病毒的中和活性。
- 潘勇兵张囡詹珊珊桂芳王炯宋刚吴小丽杨晓明
- 关键词：新型冠状病毒单克隆抗体竞争ELISA
