姚东校
- 作品数:2 被引量:7H指数:1
- 供职机构:贵州师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:长江学者和创新团队发展计划星火计划贵州省农业科技攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 马铃薯X病毒外壳蛋白基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量:1
- 2017年
- 采用RT-PCR技术从感染马铃薯X病毒贵州分离物PVX-GZ的普通烟叶片中扩增出该病毒的外壳蛋白基因CP。测序结果表明,该CP基因全长714 bp,编码237个氨基酸残基。构建原核表达载体p ET32a(+)-CP,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),在25℃条件下以0.6 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-Dthivgalactopyranoside,简称IPTG)诱导表达重组蛋白基因;SDS-PAGE分析表明,重组蛋白分子量约为45 ku;以该重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备的抗体效价达1∶12 800;间接酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunsorbent assay,简称ELISA)检测显示,该多抗能与PVX病叶汁发生特异性免疫反应,而与其他5种同属或不同属病毒叶汁无血清学交叉反应。结果为病毒血清学检测试剂盒的研发奠定了基础。
- 万晴姣李欲轲姚东校姚东校洪鲲
- 关键词:马铃薯X病毒外壳蛋白原核表达多克隆抗体CP基因RT-PCR技术
- 马铃薯X病毒贵州分离物的分子鉴定被引量:6
- 2013年
- 从贵州威宁县染病马铃薯植株中分离得到马铃薯X病毒贵州分离物(PVX—GZ),采用RT—PCR扩增并克隆了该分离物的外壳蛋白基因(CP)。经测序,该CP基因长714bp,编码237个氨基酸残基,分子量25-2ku;与19种已报道的PVX各地分离物的同源性相比,其核苷酸和氨基酸序列分别在78.6%~97.5%和84.8%-99.6%之间,其中,与两种典型的PVXX。株系(荷兰分离物X3和英国分离物UK3)的基因序列同源性达97.1%以上。结合寄主鉴别结果,判断该分离物属PVX的X3株系。
- 姚东校洪鲲杨立昌乙引万晴姣
- 关键词:马铃薯X病毒外壳蛋白