刘姝梅
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：湖南人文科技学院生命科学系更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省教育厅重点项目湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 红薯过氧化物酶的纯化与性质测定被引量：3
- 2012年
- 以红薯块根为材料,对红薯中的过氧化物酶进行提取、分离、纯化并测定其性质。结果表明:经40%～80%饱和度的硫酸铵分级分离、Sephadex G-100凝胶过滤、Concanavalin A亲和层析三个步骤,获得纯化的红薯过氧化物酶,酶纯化倍数为26.56倍,回收率0.92%,比活性3841.80 U/mg,SDS-PAGE电泳显示酶分子量为23 kDa。红薯过氧化物酶以愈创木酚为底物时λmax=470 nm,Km=3.031 mmol/L,酶的最适pH值为5.0,最适温度是35℃。酶的热稳定性较高,60℃保温20 min,残存相对活性为72.40%;酶的低温贮存稳定性很高,0～4℃冰箱中贮存20 d后,残存相对活性为97.28%。
- 吴娟金晨钟刘姝梅胡一鸿
- 关键词：红薯过氧化物酶纯化稳定性
- 阴离子交换树脂纯化甘薯POD及其酶学性质研究被引量：1
- 2012年
- 为得到高纯度的POD，采用阴离子交换树脂High—Q对红薯POD的粗酶结晶进行纯化并对其进行酶学性质初步研究。结果表明，粗酶结晶经过单步阴离子交换层析后达到电泳纯，SDS—PAGE检测结果为单条带，回收率为8．69％，纯化倍数为2．14；以愈创木酚为底物的Km值为0．62mmol／L，最适pH值为4．0，最适温度为45％；60℃保温25min后残存活性为71．27％，0～4~C贮存15d后残存活性为84．84％。该方法优于传统的亲和层析法纯化红薯POD。
- 刘姝梅吴娟李媚姝李拯中胡一鸿
- 关键词：阴离子交换树脂
- 泛素结合酶UFC1基因的原核表达载体构建
- 2012年
- 克隆人的泛素结合酶UFC1(ubiquitin-fold modifier conjugating enzyme 1)基因,并为实现UFC1基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备做准备。方法:采用RT-PCR方法从宫颈癌Hela细胞中扩增UFC1基因全长cDNA,双酶切后克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建并鉴定pGEX-4T-2-UFC1质粒。结果:双酶切鉴定和测序分析均证实,已成功构建pGEX-4T-2-UFC1重组载体。结论:成功构建泛素结合酶UFC1基因的原核表达载体,为在原核系统中表达UFC1重组蛋白,并制备多克隆抗体奠定了基础,也为进一步研究UFC1基因功能提供了工具。
- 周后兵黄文雄颜斌阳晨希刘姝梅吴娟贺爱兰
- 关键词：克隆原核表达载体
