于占红
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- PON2单克隆抗体的制备与初步鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:制备PON2(paraxonase2)单克隆抗体(mAb),并进行初步鉴定。方法:利用生物信息学方法分析人类PON2蛋白序列,选取与小鼠同源性低,而免疫原性与亲水性均较强的片段,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-PON2和PET-32a-PON2,GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白在大肠杆菌中进行表达,以HIS-PON2作为免疫原制备鼠mAb,以GST-PON2作为筛选抗原。采用Western blot、间接免疫荧光鉴定mAb的特异性。结果:GST-PON2和HIS-PON2融合蛋白均在大肠杆菌中获得高效表达,经常规的细胞融合和筛选获得2株可稳定分泌抗PON2的杂交瘤细胞株,这2株抗体可以识别HepG2细胞中的靶蛋白。结论:成功制备出2株抗PON2的mAb,并通过免疫荧光技术检测了该蛋白在HepG2细胞中的分布,为进一步进行PON2蛋白的的研究提供了有效的工具。
- 于占红杨金菊刘静迟俊陈苗柳晓兰刘莹高建恩孙启鸿
- 关键词：原核表达单克隆抗体
