陈欣
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
- 供职机构：沈阳农业大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家大学生创新性实验计划更多>>
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- 副猪嗜血杆菌辽宁株tbpA基因鉴定与分析被引量：1
- 2018年
- 副猪嗜血杆菌(HPS)是感染猪产生浆膜炎、关节炎、脑膜炎的病原菌,为明确辽宁省副猪嗜血杆菌tbp A基因的保守性、遗传变异情况以及功能,以复苏培养后的菌株为研究对象,利用细菌学常规技术和PCR方法对HPS及其血清型进行验证,将目的基因连接于T5载体上,并转化到大肠杆菌感受态细胞中,获得克隆质粒,对不同血清型该基因序列进行PCR鉴定。通过NCBI网站中BLAST进行序列比对,并且运用DNA star软件进行核苷酸同源性分析和遗传变异规律分析。通过在线软件对tbp A编码蛋白的氨基酸组成、分子量、等电点、亲疏水性以及二级结构等进行分析。结果表明:从保存菌的HPS中成功复苏了4型、5型、9型和14型菌株;经PCR扩增这4种血清型HPS的tbp A基因长度均为2700bp;tbp A基因与参考菌株核苷酸同源性范围为86.5%~97.9%,4型和5型tbp A基因与84^(-1)5995、84^(-1)7975、H425亲缘性较近,9型tbp A基因与SW124和174亲缘性较近;14型tbp A基因与NO.4亲缘性较近;4种血清型tbp A基因与瑞典菌株D74在两个不同分支上,具有较远的亲缘关系。4种血清型tbp A基因编码蛋白分别有874,871,918,915个氨基酸组成;等电点分别为9.51,9.30,8.65,8.76;该蛋白属于亲水性蛋白;该蛋白的二级结构主要由α螺旋、无规则卷曲和伸展链构成。tbp A基因与美国株84^(-1)5995(KT588784.1)、德国株H425(KT588778.1)、日本株NO.4(KT588774.1)同源性相对较高,亲缘关系较近,但是也存在一定的差异性,该结果可为建立HPS最新基因突变跟踪提供参考依据;同时,通过对tbp A蛋白进行生物学信息分析,为进一步研究tbp A基因的功能奠定了分子基础。
- 陈欣刘维哲王超黄晨李睿尹荣兰陈媛媛尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌毒力基因生物信息学分析
- 副猪嗜血杆菌阜新株的分离鉴定及OmpP5基因序列分析
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,Hps)是一种革兰氏阴性菌,属于巴斯德杆菌属,能够引起猪的多发性浆膜炎、脑膜炎以及关节炎综合征。外膜蛋白A(OmpA)是革兰氏阴性菌外膜成分的重要组成部分,高度保守,...
- 王超陈欣黄晨李睿刘梦志尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌thyA基因的序列分析被引量：1
- 2019年
- 为探究副猪嗜血杆菌thyA基因的遗传特性,针对于分离的副猪嗜血杆菌辽宁分离株的thyA基因进行测序,并运用软件对基因序列及氨基酸序列的同源性等进行分析研究。结果显示,thyA基因在副猪嗜血杆菌辽宁株亲缘性较高,其中基因序列与已公布的参考菌株同源性为95.7%~100%,氨基酸序列同源性为97.2%~100%,预测thyA基因编码蛋白的三级结构,发现thyA毒力基因在副猪嗜血杆菌中保守存在,为揭示thyA基因在副猪嗜血杆菌中功能奠定了一定基础。
- 黄晨王超姚龙泉陈欣李睿尹荣兰郑雨昕原婧刘宝山尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 副猪嗜血杆菌的分离鉴定及其OmpP5基因序列分析被引量：5
- 2018年
- 为研究辽宁省副猪嗜血杆菌(Hps)OmpP5基因的遗传变异规律,从辽宁省阜新市某猪场疑似患有副猪嗜血杆菌病的患猪肺部采取组织病料进行细菌分离,通过革兰染色、生化鉴定、卫星现象及Hps 16S rRNA PCR检测,鉴定为副猪嗜血杆菌。根据已发表的Hps OmpP5基因设计1对特异性引物,对分离株OmpP5基因进行扩增、克隆及测序,得到长度为1 116bp的OmpP5基因序列。将该序列与已发表Hps参考株的OmpP5基因进行同源性比对及系统发育树分析,发现核苷酸同源性为89.8%~99.5%,分离株与参考菌株№4在同一分支,表明OmpP5基因具有一定的保守性,分离株和№4亲缘关系较近。研究结果为阐明辽宁省Hps毒力基因及致病机理提供了参考依据。
- 王超陈欣张梦南黄晨李睿刘梦志刘宝山姚龙泉陈新亮尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 蜂蜜对三聚氰胺与三聚氰酸攻毒小鼠免疫细胞的调节作用研究
- 2017年
- 为研究蜂蜜对三聚氰胺及其同系物作用对小鼠免疫细胞的影响,同时研究蜂蜜作为天然解毒剂的作用,本试验以KM小鼠作为试验动物,分为三聚氰胺组、三聚氰胺+三聚氰酸联合组、三聚氰胺+蜂蜜组、联合+蜂蜜组及对照组5个试验组。小鼠隔天灌胃28d后,经眼球采血,采用全自动血液分析仪和流式细胞仪检测外周血和淋巴细胞亚群的变化。结果表明:三聚氰胺与三聚氰酸联合攻毒能导致白细胞和淋巴细胞数目显著升高(p<0.05);与空白对照组相比,联合攻毒组小鼠CD4^+/CD8^+值显著下降(p<0.05);从CD138^+表达率上看,单独及联合攻毒组均显著降低(p<0.05)。三聚氰胺类物质能够影响机体免疫细胞的应答反应,对小鼠免疫功能产生一定的抑制作用,而蜂蜜对这种抑制具有一定的缓解作用。
- 董俏陈欣李文王超刘梦志原婧尹荣兰李曦婷尹荣焕
- 关键词：三聚氰胺三聚氰酸蜂蜜免疫功能
- 副猪嗜血杆菌疫苗研究进展被引量：7
- 2020年
- 近年来,副猪嗜血杆菌所引起的全身性炎性疾病使全球的养猪业造成巨大的经济损失,如何预防和控制副猪嗜血杆菌病发生成为关注的焦点,疫苗的研究开发也受到了重视。近年使用的疫苗有灭活苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和基因工程疫苗等,论文对目前副猪嗜血杆菌应用的疫苗种类、研究现状以及发展方向进行了综述。
- 王静周媛媛张学谅陈欣原婧尹荣兰李睿黄晨尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌疫苗
- 副猪嗜血杆菌辽宁株tbpA基因鉴定与分析
- 【目的】副猪嗜血杆菌（HPS）是感染猪产生浆膜炎、关节炎、脑膜炎的病原菌,明确辽宁省副猪嗜血杆菌tbpA基因的保守性、遗传变异情况以及功能对该病的预防和治疗有重要意义。【方法】本试验以复苏培养后的菌株为研究对象,利用细菌...
- 陈欣原婧尹荣焕
- 关键词：副猪嗜血杆菌毒力基因生物信息学分析
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF3蛋白的表达及抗原性鉴定被引量：4
- 2017年
- 为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF3蛋白的免疫活性,对其进行了表达及初步鉴定。根据NCBI上PCV-2ORF3的基因序列(FR823451)设计特异性引物,扩增后将其插入pET28a表达载体构建了重组表达质粒pET-PCV-2-ORF3,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达后用SDS-PAGE和免疫印迹进行了鉴定。随后又用圆环病毒野毒感染猪和重组ORF2免疫小鼠的阳性血清对表达蛋白的免疫原性进行了检测。结果表明,构建成功的pET-PCV-2-ORF3表达菌被诱导后能大量表达PCV-2 ORF3蛋白。ORF3表达蛋白能与圆环病毒野毒感染猪的阳性血清发生特异性反应,与重组疫苗免疫鼠的阳性血清不能发生反应,表明ORF3蛋白具有很好的免疫原性和反应原性,有望作为圆环病毒野毒感染检测的靶抗原。
- 刘梦志陈欣金淑秀张艺凡蒋佳羲刘宝山
- 关键词：PCV-2ORF3
