郭玉荣
- 作品数：9 被引量：51H指数：5
- 供职机构：柳州市中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 免疫组化染色的影响因素与质量控制被引量：3
- 2009年
- 近年来，免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。其中良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提，由于免疫组化染色过程中存在许多步骤或环节，且每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，把握好免疫组化的染色过程意义重大。从染色结果看，常见的有以下三种情况。
- 郭玉荣
- 关键词：免疫组织化学
- 黄芪注射液促进免疫功能低下小鼠T细胞增殖研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察黄芪注射液对地塞米松(Dex)所致免疫功能低下小鼠T细胞增殖的影响。方法连续腹腔注射给药5天,末次给药后2h称小鼠体重。结果与对照组相比,模型组小鼠胸腺指数、血清与胸腺IL-2的含量均有显著减少(P<0.05),而胸腺PCNA表达面积累积百分比无显著差异(P>0.05)。结论黄芪注射液可抑制Dex所致免疫功能低下模型小鼠的胸腺萎缩,促进免疫功能的恢复。
- 杨巧红赵自明李琳琳杜标炎谭宇蕙周联连至诚郭玉荣苏俊芳张书征张根水刘艳玲
- 关键词：免疫功能低下黄芪注射液地塞米松
- 六味地黄丸血清对恶黑B16细胞株自杀基因疗法增效作用及机制
- 目的：应用中药复方血清药理学的方法将自杀基因 HSV1-tk/GCV系统与六味地黄丸在体外实验中联合，以小鼠恶性黑色素瘤B16细胞为对象进行了杀伤实验研究与GJIC机制的初步探讨。通过研究以期为临床自杀基因疗法联合中药复...
- 郭玉荣
- 关键词：自杀基因疗法
- 文献传递
- 六味地黄丸入血成分对自杀基因杀伤肝癌细胞的增效作用被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨六味地黄丸主要入血成分对单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)自杀基因系统杀伤大鼠肝癌细胞(CBRH7919)的增效作用。方法:按CBRH7919/tk占总细胞数10%的比例混合CBRH7919与CBRH7919/tk细胞,分别接种96孔板,每孔加细胞悬液100μL(2×103个/孔),设置对照组、低、中、高3种浓度的六味地黄丸入血成分组、GCV组、各浓度六味地黄丸入血成分联合GCV组;培养24 h后分别加入入血成分马钱素和丹皮酚(质量浓度均为25,50,100μmol.L-1),莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸、獐牙菜苷(浓度均为37.5,75,150μmol.L-1)5种化合物和5种化合物混合组分(质量浓度为0.006 7,0.013 5,0.027 g.L-1);及其混合组分(质量浓度为0.034 g.L-1)作用后淋巴细胞培养上清(占培养液体积分数7.5%,15%,30%),设6个复孔,37℃,5%CO2培养箱培养72 h后MTT法测定细胞存活率,检测六味地黄丸主要入血成分及淋巴细胞培养上清对自杀基因系统杀伤肝癌细胞的影响。结果:自杀基因系统联合马钱素、莫诺苷、5-羟甲基-2-糠酸、獐牙菜苷和丹皮酚5种化合物及5种化合物的混合组分,均未显示其对肿瘤自杀基因疗法的直接增效作用;但含药上清联合GCV组对肝癌细胞生长抑制率分别为(22.72±3.12)%,(26.68±1.92)%,(30.50±3.53)%;与单独自杀基因(10%tk/GCV)组抑制率(15.37±3.96)%比较,差异均有统计学显著性意义;q值分别为1.50,1.75,2.24,均大于1.15,具有协同增效作用,并呈一定的量效关系。结论:六味地黄丸主要入血成分能刺激淋巴细胞产生某些活性物质,并发挥了对HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统对肝癌CBRH7919细胞杀伤的增效作用,这些淋巴细胞产生的内源性活性物质可能才是六味地黄丸对肿瘤自杀基因疗法增效作用的药效物质基础。
- 杜标炎周瑶易华张广献谭宇蕙吴映雅郭玉荣罗惠
- 关键词：肝癌自杀基因单纯疱疹病毒胸苷激酶六味地黄丸
- 六味地黄丸对自杀基因系统杀伤肝癌细胞增效作用的量效关系被引量：9
- 2009年
- 【目的】观测六味地黄丸含药血清对自杀基因HSV-tk/GCV系统杀伤大鼠肝癌CBRH7919细胞的增效作用,探讨建立自杀基因联合中药方药的肿瘤基因治疗联合方案的可行性。【方法】构建HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统,并确定丙氧鸟苷(GCV)的工作浓度(39.2μmol/L);制备SD大鼠4 d和8 d六味地黄丸(剂量为32.gkg-.1d-1)灌胃含药血清和生理盐水灌胃空白血清;用大鼠肝癌细胞CBRH7919/tk-或tk+与tk-1∶9比例混合细胞按3×103个/孔铺96孔板,分为空白血清组、GCV加空白血清组、10%tk+/GCV加空白血清组、含药血清组、GCV加含药血清组及10%tk+/GCV联合含药血清组;含药血清又再分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组6个复孔,用完全培养基培养24 h后,各组分别加入相应空白血清或含药血清,孵育12 h,加入终浓度39.2μmol/L的GCV,培养60 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Q值法分析自杀基因系统与含药血清联合的相互作用是否具有协同性。【结果】空白血清组、含药血清组、GCV加空白血清组、GCV加含药血清组细胞均未显示明显的细胞毒性。10%tk+/GCV加空白血清组及10%tk+/GCV联合不同浓度的含药血清组均具有显著杀伤作用(与空白血清组比较,P<0.05),联合组存活率显著低于10%tk+/GCV加空白血清组(P<0.05);含药血清中剂量和高剂量组的联合作用具有协同性(Q>1.15),且有浓度依赖性。给药4 d血清和给药8 d血清结果无显著性差异(P>0.05)。【结论】六味地黄丸含药血清对自杀基因系统10%tk+/GCV杀伤大鼠肝癌CBRH7919细胞具有协同增效作用,且有一定的量效关系。
- 杜标炎张爱娟谭宇蕙易华吴映雅郭玉荣
- 关键词：基因治疗
- 六味地黄丸含药血清调控黑色素瘤B16细胞株缝隙连接蛋白表达的作用被引量：15
- 2009年
- 【目的】观察六味地黄丸含药血清调控小鼠黑色素瘤B16细胞株缝隙连接蛋白(Cx)表达的作用。【方法】采用SD大鼠灌胃8 d制备六味地黄丸含药血清(药物剂量为32 g.kg-1.d-1)和对照血清(灌胃等容积生理盐水);选择对B16细胞生长和形态影响不大的血清浓度(体积分数为10%)作为大鼠血清的工作浓度;采用Western blot技术和间接免疫荧光法及流式荧光法检测六味地黄丸含药血清对黑色素瘤B16细胞株缝隙连接蛋白(Cx26/30/32)表达的影响。【结果】Western blot检测显示空白组(无鼠血清)3种Cx几乎不表达,而对照血清和六味地黄丸各浓度含药血清均能提高Cx蛋白的表达,但含药血清的作用更为明显且有显著的量效关系;间接它被荧光法和流式荧光法检测显示类似的结果:对照血清组和中、高剂量含药血清组的Cx蛋白荧光强度均较空白组显著增加(P<0.01),但与对照血清组比较,只有高剂量含药血清组荧光强度显著增加(P>0.05),低剂量含药血清组Cx蛋白表达反而下降(P<0.01)。【结论】六味地黄丸含药血清具有调控小鼠黑色素瘤B16细胞株缝隙连接蛋白表达的作用。
- 杜标炎张小贺谭宇蕙吴映雅易华郭玉荣
- 关键词：黑色素瘤基因治疗
- 六味地黄丸增强黑色素瘤自杀基因系统旁观者效应的体外研究被引量：3
- 2010年
- 【目的】探讨六味地黄丸含药血清对单纯疱疹病毒核苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)系统杀伤小鼠黑色素细胞瘤B16细胞株的增效作用,为提高临床基因治疗肿瘤疗效提供新思路。【方法】构建并鉴定恶性黑色素瘤B16细胞HSV-tk/GCV治疗系统,制备六味地黄丸含药血清及对照血清,将B16、B16/tk细胞按20%(1:4)的比例混合制成细胞悬浮液接种于96孔培养板上,分为对照血清组、含药血清组、对照血清联合GCV组、含药血清联合GCV组,其中含药血清组及含药血清联合GCV组按血清体积分数计又分高(10%)、中(5%)、低(2.5%)3组,GCV的终浓度为25μmol/L,按分组添加相应的含药血清,每孔培养液总体积200μL,37℃、体积分数5%的CO2培养箱培养。48h后采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测杀伤效应。采用金正钧Q值法分析六味地黄丸含药血清与自杀基因治疗系统联合作用对旁观者效应是否具有协同性。【结果】MTT实验表明联合用药组对B16细胞的抑制率明显高于其他组,六味地黄丸含药血清对B16细胞株HSV-tk/GCV系统的增效作用存在量效关系:2.5%、5%、10%含药血清联合20%tk/GCV组的实际抑制率(48.75%、59.39%、69.28%)显著高于理论抑制率(38.13%、38.67%、39.92%),金正钧Q值分别为1.28、1.54、1.74,均大于1.15,具有协同增效作用。【结论】六味地黄丸含药血清对B16细胞株HSV-tk/GCV系统旁观者效应有明显的增效作用,且具有一定的量效关系。
- 易华郭玉荣杜标炎谭宇蕙吴映雅
- 关键词：自杀基因疗法
- 黄芪注射液对诱发性小鼠胸腺萎缩的干预作用及对胸腺淋巴细胞凋亡相关基因Bcl-2的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:观察黄芪注射液(AI)对小鼠胸腺萎缩的干预作用。方法:将昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、IL-2组、黄芪注射液高(2 g/kg)、中(1 g/kg)、低(0.5 g/kg)剂量组,除正常对照组外,均采用地塞米松(25 mg/kg)腹腔注射复制小鼠胸腺淋巴细胞凋亡模型。观察黄芪注射液对小鼠胸腺指数的影响及胸腺的形态学改变,TUNEL及胸腺琼脂糖凝胶电泳测胸腺淋巴细胞凋亡,采用免疫组织化学与医学图像分析系统结合的方法检测小鼠胸腺淋巴细胞相关凋亡基因Bc l-2的表达。结果:黄芪注射液能明显改善萎缩的胸腺,增加胸腺指数(P<0.05);黄芪各剂量组小鼠胸腺皮质细胞明显增多,胸腺淋巴细胞凋亡数目及阳性细胞百分比与模型组比较显著减少(P<0.05或P<0.01),DNA琼脂糖凝胶电泳与模型组相比有显著变化,DNA的梯状图谱显色变浅甚至消失,同时还发现黄芪注射液能提高Bc l-2的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:黄芪注射液有明显的抗胸腺萎缩及抑制胸腺淋巴细胞凋亡的作用,其作用机制可能与上调Bc l-2基因表达相关。
- 杨巧红苏俊芳李长福郭玉荣易华杜标炎谭宇蕙连至诚
- 关键词：黄芪注射液胸腺萎缩BCL-2
- 六味地黄丸含药血清对自杀基因治疗黑色素瘤增效作用的缝隙连接机制初探被引量：11
- 2013年
- 目的探讨六味地黄丸含药血清对HSV-tk/GCV自杀基因系统杀伤小鼠黑色素细胞瘤B16细胞增效作用的缝隙连接机制。方法制备六味地黄丸含药血清(分别为2.5%、5.0%、10.0%六味血清)及10.0%对照血清。采用RT-PCR法检测六味地黄丸含药血清对B16细胞株的缝隙链接蛋白(Cx)26和Cx43 mRNA的影响,Western blot法和间接免疫荧光法检测其对B16细胞Cx26和Cx43蛋白表达的影响;RT-PCR检测Cx26-309、Cx26-337、Cx26-367、Cx26-2098 SiRNA对Cx26的干扰效率,选用干扰效率最高的Cx26-2098 SiRNA干扰Cx26基因后观察六味地黄丸联合HSV-tk/GCV的旁观者效应;MTT法检测细胞间缝隙连接通讯功能(gap junctional intercellular communication,GJIC)抑制剂甘草次酸(GA)对六味地黄丸联合tk/GCV系统对B16细胞杀伤作用的影响,实验设为对照血清组,2.5%、5.0%、10.0%六味血清组(简称低、中、高剂量组)及对照血清联合GCV组,低、中、高剂量联合GCV组,低、中、高剂量联合GCV加GA组。GCV终浓度为20mol/L,GA终浓度为50mol/L。结果六味地黄丸含药血清能提高B16细胞中Cx43mRNA及蛋白的表达,且具有量效依赖关系;对Cx26 mRNA与蛋白的表达具有双向调节作用,低剂量时具有抑制作用而高剂量是能上调其表达;SiRNA干扰Cx26基因表达后,六味地黄丸联合自杀基因治疗的旁观者效应与没有干扰前比较无明显的变化;低、中、高剂量联合GCV组在GA阻断前细胞抑制率(48.75%、59.39%、69.28%)与阻断后细胞抑制率(29.14%、38.71%、58.13%)比较,显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论六味地黄丸含药血清对HSV-tk/GCV自杀基因系统杀伤恶性黑色素瘤B16细胞的增效作用与缝隙连接机制有关,可能是通过提高Cx26和Cx43等缝隙连接蛋白表达而达到协同增效作用。
- 杜标炎郭玉荣易华谭宇蕙吴映雅
- 关键词：恶性黑色素瘤基因治疗自杀基因六味地黄丸血清药理学
