徐慧慧
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 在钙离子敏感性方面与RCH1遗传互作的酿酒酵母基因的筛选
- 2018年
- 酿酒酵母ScRCH1是白念珠菌CaRCH1的同功基因,作为人体溶质转运蛋白SLC10A7的同源蛋白,两者都是细胞质膜上钙离子内流的抑制因子。为了研究酿酒酵母RCH1与基因组中其他基因之间的遗传互作,利用合成遗传阵列(Synthetic Genetic Array,SGA)方法构建了RCH1分别与其他非必需基因之间的双基因缺失株文库。钙离子表型筛选表明RCH1与17个基因之间存在遗传互作,其中4个基因BUD9、THR1、RAS2和CPR7在钙离子敏感性方面的功能以前没有报道过。这些结果为深入研究Rch1对钙离子稳态的调控提供了参考。
- 王立通徐慧慧蒋伶活
- 关键词：酿酒酵母
- 通过CRISPR/Cas9基因编辑手段构建白念珠菌CaHSL1基因的失活突变体及其表型分析
- 2018年
- 钙离子稳态和钙离子信号途径对白念珠菌的形态发生、耐药性以及毒力都十分重要。白念珠菌和酿酒酵母菌的细胞质膜蛋白质Rch1p均富集在母细胞和子细胞之间的芽颈部位,负向调控胞外钙离子的内流。与细胞周期调控相关的蛋白激酶Hsl1p也存在于白念珠菌和酿酒酵母菌的芽颈部位。该研究发现,抑制CaHSL1基因的表达或者通过CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeat)/Cas9新方法失活CaHSL1基因,均可导致白念珠菌对钙离子敏感,这种钙离子敏感性可以被钙调磷酸酯酶的专一性抑制剂环孢霉素抑制。这个结果表明,钙离子稳态和钙信号转导途径可能与细胞周期调控有关。此外,CaHSL1基因失活突变体对十二烷基磺酸钠、氟康唑、酮康唑、刚果红、潮霉素B、卡泊芬净和Anidualafungin敏感,表明CaHsl1p与细胞质膜和细胞壁胁迫的应答相关。
- 徐慧慧蒋伶活Malcolm Whiteway
- 关键词：白念珠菌CRISPR
- 酵母细胞内离子稳态的调控机制被引量：2
- 2015年
- 活有机体都需要营养矿物质来维持生长,并形成了捕获、利用以及贮存营养矿物质的有效机制。过量的离子对细胞也可能是有毒性的,因此细胞形成了复杂的稳态调节机制来调节它们的胞内水平,以维持细胞的正常生长和避免过量的离子对细胞造成的毒性。该文综述了酿酒酵母细胞内p H的调控,细胞对金属离子的吸收、贮存和外排的机制,包括一价金属离子Na+和K+、二价阳离子Ca2+和Mg2+,以及微量金属离子Fe2+、Zn2+、Cu2+和Mn2+等。并提出有待研究的问题和措施,也对今后的研究趋势和研究意义进行了展望。
- 赵运英徐慧慧张艳蒋伶活
- 关键词：酿酒酵母转运体交换器离子通道
- CRISPR/Cas9方法失活白念珠菌CaMIT1基因及其突变株表型分析
- 2018年
- 目的构建白念珠菌CaMIT1基因突变株,研究CaMIT1基因在白念珠菌中的功能。方法本文采用CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeat)/Cas9这种新的方法构建CaMIT1失活突变株,并通过倍比稀释的方法初步研究CaMIT1的功能。结果成功获得了CaMIT1基因的纯合子失活突变株,表型实验结果显示该基因突变株对钙离子、锂离子、十二烷基磺酸钠、克霉唑、酮康唑、Anidualafungin敏感,对刚果红耐受。结论 CaMIT1与白念珠菌的细胞质膜和细胞壁完整性以及钙离子的稳态相关。
- 徐慧慧蒋伶活
- 关键词：白念珠菌CRISPR表型分析
