徐冬冬
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一种新颖的毕赤酵母酸性蛋白酶基因的克隆和异源表达以及酶学性质研究被引量：1
- 2015年
- 采用基因克隆方法获得酸性蛋白酶基因,在毕赤酵母KM71表达系统中进行表达,并将重组酵母酸性蛋白酶r Pr A经过浓缩后研究其酶学性质,初步探究了r Pr A对大豆蛋白和酪蛋白的水解情况。结果表明:经过异源表达后的重组毕赤酵母酸性蛋白酶分子量约为44 ku,在p H3.0的发酵条件下酶活最高,可达46.92U/m L。该酸性蛋白酶的最适p H值为3.0,最适温度为35℃。Mn2+对该酶活性有激活作用,多种金属离子对该酶有抑制作用;0.1 mmol/L的Pepstain A即可完全抑制酶活,说明此重组酶的活性中心有天冬氨酸残基。对大豆蛋白和酪蛋白的初步水解试验可知,当E/S为4 000 U/g时,此重组酶对大豆分离蛋白和酪蛋白的水解度分别为9.0%和8.34%。优化发酵条件以及与多种蛋白酶进行复配,该重组蛋白酶将在蛋白水解中有很好的应用前景,有望应用到畜禽饲料加工行业。
- 马纳纳徐冬冬黄伟谦游子娟罗晓春
- 关键词：毕赤酵母酶学性质蛋白水解
- 刺激隐核虫感染诱导斜带石斑鱼MHCIα和β_2m基因的表达谱分析被引量：1
- 2016年
- 【目的】检验石斑鱼(Epinephelus coioides)MHCIα和β_2m基因是否参与诱导抗寄生虫免疫应答,为揭示鱼类免疫系统启动抗刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)感染的细胞免疫应答分子机制打下基础。【方法】以实时荧光定量PCR对刺激隐核虫感染斜带石斑鱼前后MHC Iα和β_2m基因在感染局部位点和免疫器官中的表达变化进行检测。【结果】MHCIα和β_2m基因在健康斜带石斑鱼的组织中均呈组成性表达,且以在外周血、腮、头肾和脾脏中的表达量较高。经刺激隐核虫感染后,MHCIα和β_2m基因在斜带石斑鱼皮肤中的表达明显上调,均在感染后第5 d达峰值,其中MHCIα基因的最大表达量为2.6倍、β_2m基因的最大表达量为6.1倍;在腮中二者呈波动性变化,而在头肾中以显著下调为主。在脾脏中,MHCIα基因在刺激隐核虫感染后第5 d显著上调表达,为对照组的2.0倍,至感染后第7 d其表达水平略微下调,为对照组的1.5倍;β_2m基因表达于感染后12 h即升高至对照组的4.0倍,此后呈下调表达趋势,至感染后第5 d其表达水平再次上调为对照组的3.4倍。【结论】在刺激隐核虫感染过程中,斜带石斑鱼MHCIα和β_2m基因的相对表达量在皮肤、鳃、头肾和脾脏中均发生了明显变化,即鱼类MHCⅠ类分子可能参与了机体的细胞免疫,在抗寄生虫感染的特异性免疫应答过程中发挥重要作用。
- 徐冬冬徐舜吴凤依罗晓春
- 关键词：石斑鱼刺激隐核虫表达谱分析
