周广玉
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- 去甲基药5-氮杂胞苷对Caspase-8缺乏的神经母细胞瘤细胞化疗敏感性的影响
- 2010年
- 目的探讨去甲基药5-氮杂胞苷能否恢复神经母细胞瘤(NB)细胞中Caspase-8的表达水平,从而提高NB细胞SY5Y对常用化疗药物依托泊苷的敏感性。方法采用反转录-PCR(RT-PCR)技术检测5-氮杂胞苷作用前后Caspase-8mRNA的表达。Elivi-sion二步法检测5-氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞中Caspase-8蛋白的表达。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Caspase-8缺乏的NB细胞中加入化疗药依托泊苷后细胞存活率,比较加入5-氮杂胞苷后再加入依托泊苷后细胞存活率的变化。结果 RT-PCR方法未检测到SY5Y细胞中Caspase-8mRNA表达,5-氮杂胞苷单独作用3d可以检测到Caspase-8mRNA表达,5d组Caspase-8mRNA表达较3d组明显增强,且Caspase-8mRNA表达水平随5-氮杂胞苷水平增高而增高。Elivision二步法检测SY5Y细胞中Caspase-8蛋白表达阴性,5-氮杂胞苷作用3d后Caspase-8蛋白表达呈阳性。MTT法检测发现不同质量浓度的依托泊苷(0.1、0.3、1.0、2.5)mg.L-1单独作用24h组细胞存活率分别为94.16%±5.89%、76.46%±5.83%、44.31%±5.05%、36.15%±5.71%;5-氮杂胞苷+同质量浓度依托泊苷组细胞存活率分别为84.23%±6.95%,61.00%±4.98%,31.64%±3.84%,23.75%±1.89%,联合作用组细胞存活率较单独作用组细胞存活率明显下降,其差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论 SY5Y细胞不表达Caspase-8mRNA及蛋白,5-氮杂胞苷可诱导SY5Y细胞Caspase-8mRNA及蛋白表达,且随时间延长,Caspase-8mRNA表达随之增加。依托泊苷对NB细胞SY5Y具有增殖抑制作用,5-氮杂胞苷可增强其对SY5Y的增殖抑制作用,并提高化疗的敏感性。
- 周广玉李爱敏初清王晓莉
- 关键词：神经母细胞瘤5-氮杂胞苷
