万丹
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:扬州大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程更多>>
- 减毒沙门氏菌在消化系肿瘤中的研究进展被引量:1
- 2017年
- 消化系肿瘤在我国是最常见的恶性肿瘤,随着现代生活节奏的加快,消化系肿瘤的发病率有增高趋势,年轻化的趋势也愈加明显.减毒沙门氏菌作为一个胞内寄生菌,本省具有抗肿瘤特性,同时可以作为肿瘤基因治疗的载体进行抗肿瘤治疗.本文就减毒沙门氏菌及作为治疗载体在肝癌、胃癌、大肠癌的体内外应用进展进行综述.
- 朱晓舟孔桂美万丹孙国壮焦红梅阴银燕李国才
- 关键词:减毒沙门氏菌消化系肿瘤靶向
- 牡蛎共生菌Chaetomium globosum ML-4发酵液的化学成分及其体外抗肿瘤活性研究被引量:7
- 2017年
- 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层色谱和高效液相色谱等方法对牡蛎共生菌Chaetomium globosum ML-4发酵液的化学成分进行分离纯化,获得5个化合物。利用高分辨质谱、核磁共振谱及文献比对的方法,将上述化合物分别鉴定为chaetoglobosin V(1),chaetoglobosin Vb(2),tyrosol(3),5-methyluracil(4),uracil(5)。采用MTT法测定化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721的体外细胞毒活性,结果发现,化合物1对SMMC-7721细胞具有明显的增殖抑制活性,其IC50为60.5 mg·L-1,阳性对照药顺铂的IC50为19.96 mg·L-1。进一步研究发现,化合物1可引起SMMC-7721细胞G2期细胞周期阻滞,并能诱导SMMC-7721细胞凋亡;SMMC-7721细胞中Bcl-2/Bax的比值下降,Caspases-3,-8,-9的表达增加,Akt蛋白的表达和磷酸化水平下降。上述结果表明,化合物1对SMMC-7721细胞的体外抗肿瘤活性与诱导细胞周期G2期阻滞以及细胞凋亡相关;其诱导凋亡作用同时涉及线粒体途径和死亡受体途径,且与PI3K/Akt信号通路活性下降相关。
- 万丹陈曦朱力王凤舞孔桂美曹桂云申丽
- 关键词:牡蛎共生菌CHAETOMIUM化学成分
- 蜂毒素体外抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的实验研究被引量:2
- 2018年
- 目的探讨蜂毒素对小鼠结肠癌CT-26细胞的迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法 MTT法检测蜂毒素对小鼠结肠癌CT-26细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测蜂毒素对CT-26细胞迁移能力的影响;流式细胞技术检测蜂毒素对CT-26细胞凋亡的影响;Western Blot检测经蜂毒素作用后的CT-26细胞中Caspase-9,Caspase-3和PARP的蛋白水平。结果 Transwell小室实验显示,经1μg/ml、2μg/ml蜂毒素处理过的CT-26细胞穿膜数明显减少并呈一定的浓度依懒性(P<0.01)。流式细胞技术检测显示,经1μg/ml、2μg/ml蜂毒素处理过的CT-26细胞凋亡率明显提高并呈一定的浓度依懒性(P<0.01)。Western Blot结果显示,经1μg/ml、2μg/ml蜂毒素处理过的CT-26细胞,Caspase-9,Caspase-3和PARP的蛋白的表达水平明显降低(均P<0.01)。结论蜂毒素能明显抑制小鼠结肠癌CT-26细胞的增殖与迁移,促使细胞的凋亡,其机制可能与下调Caspase-9,Caspase-3和PARP蛋白水平直接相关。
- 朱晓舟孔桂美孔桂美万丹焦红梅万丹李国才
- 关键词:蜂毒素结肠癌凋亡蛋白表达
- 大肠杆菌表达的蜂毒素联合杜仲黄酮外用治疗关节炎小鼠模型的实验研究
- 研究背景:蜂毒素是蜜蜂蜂毒的主要成分,以小肽分子存在,具有抗炎、抑菌和抗肿瘤作用,自古以来,关节炎的蜂毒治疗都是采用抓取活蜂进行治疗,具有很大的局限性,为了达到同样的效果,本研究拟通过人工表达的蜂毒素也通过外用的方式研究...
- 孔桂美杨亚旭朱晓舟万丹邵丽娟
- 关键词:关节炎小鼠模型
- 肿瘤靶向递呈外源蛋白减毒沙门菌的构建与鉴定
- 2020年
- 利用沙门菌膜插入和分泌蛋白(MisL)能展示外源蛋白于细菌表面的能力,构建血管内皮生长因子受体单链抗体(scFv-KDR)的原核表达载体(pYA3332-misL-scFv-KDR),将scFv-KDR展示于减毒沙门菌表面,获得的KDR沙门菌(KDR-X4450)有助于沙门菌靶向肿瘤和肿瘤血管细胞;利用环氧合酶(COX-2)具有高度的肿瘤组织特异性,构建COX-2启动子介导的GFP真核表达载体(pGL3-basic-hCOX2-GFP)。将真核载体转化展示有scFv-KDR的KDR-X4550得到KDR-GFP沙门菌(KDR-GFP-X4550),KDR-GFP-X4550感染肿瘤细胞,COX-2启动子启动外源基因GFP的表达;SDS-PAGE检测scFv-KDR在沙门菌的表达,细菌计数KDR-X4550进入肿瘤细胞的数量;荧光显微镜观察COX-2启动子启动外源基因表达及KDR-GFP-X4550靶向递呈外源蛋白的能力。结果表明:scFv-KDR能展示在沙门菌表面,展示有KDR单链抗体的沙门菌比野生菌更容易进入肿瘤细胞;与正常细胞相比,COX-2启动子能在肿瘤细胞内启动GFP表达,KDR-GFP-X4550具有靶向递呈GFP的能力。这一研究为重组沙门菌进一步应用研究奠定了基础。
- 孔桂美王继军王继军黄小丽陶文华万丹
- 关键词:减毒沙门菌单链抗体血管内皮生长因子受体
- DLL4-RNAi影响胃癌细胞增殖和迁移
- 2018年
- 目的探讨Delta-like配体4(Delta-like ligand 4,DLL4)在胃癌中的表达情况及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法 RT-PCR验证胃癌细胞中DLL4 mRNA的表达。构建DLL4-RNAi质粒转染胃癌AGS细胞,0.2μg/m L嘌呤霉素筛选建立稳定细胞株。MTT检测细胞株细胞增殖情况;划痕实验观察细胞株细胞的迁移情况。结果RT-PCR结果显示,DLL4和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA在胃癌AGS细胞中的表达高于正常细胞GES-1中的表达(均P<0.05),且DLL4与VEGF mRNA的表达呈正相关(r=0.617,P=0.032)。DLL4-RNAi(34251)和DLL4-RNAi(34253)质粒转染可抑制胃癌AGS细胞DLL4 mRNA的表达(均P<0.05)。DLL4-RNAi(34251)可抑制VEGF mRNA的表达(P<0.05)。MTT实验结果显示,转染DLL4-RNAi(34253)和DLL4-RNAi(34251)的AGS细胞增殖速率减慢(均P<0.01)。划痕实验结果显示,转染DLL4-RNAi(34253)的AGS细胞的迁移率降低(P<0.01)。结论胃癌AGS细胞中DLL4表达上调,并影响细胞的增殖和迁移。
- 孔桂美邵丽娟朱晓舟杨亚旭孙国壮万丹卜平朱浩君
- 关键词:血管内皮生长因子A细胞增殖细胞运动