高源
- 作品数：7 被引量：69H指数：5
- 供职机构：北京中医药大学中药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市科技新星计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 补骨脂异黄酮对炎症小体的调控作用及机制初探被引量：8
- 2019年
- 目的基于小鼠骨髓巨噬细胞系,建立NLRP3、NLRC4及AIM2炎症小体活化模型,探索补骨脂异黄酮对炎症小体的调控作用及初步机制。方法采用LPS联合ATP、Nigericin、Salmonella和Poly(dA∶dT)等刺激因子,分别构建NLRP3、NLRC4和AIM2炎症小体活化模型;Caspase-Glo~® 1 Inflammasome Assay检测caspase-1活性;免疫印迹法检测细胞培养上清中mature IL-1βp17、caspase-1 p20的蛋白水平,以及细胞裂解液中pro-caspase-1、pro-IL-1β、ASC、NLRP3等蛋白表达。结果补骨脂异黄酮可抑制LPS联合ATP、Nigericin、Salmonella和Poly(dA∶dT)诱导的pro-caspase-1自我剪切,抑制caspase-1介导的IL-1β产生,表明补骨脂异黄酮可抑制NLRP3、NLRC4及AIM2炎症小体活性。此外,研究发现补骨脂异黄酮对NLRP3炎症小体活性的抑制作用具有不可逆性,且不依赖于NF-κB通路。结论补骨脂异黄酮可通过抑制pro-caspase-1自我剪切活化,从而抑制NLRP3、NLRC4、AIM2炎症小体的激活,进一步抑制其介导的免疫炎症反应,本研究也在一定程度上为补骨脂异黄酮相关制剂治疗免疫炎症疾病提供依据。
- 秦楠徐广高源高源付书彬王智磊肖小河赵海平柏兆方
- 关键词：补骨脂巨噬细胞炎症反应CASPASE-1IL-1Β
- 甘草查尔酮A对NLRP3炎症小体的调控作用及机制初探被引量：14
- 2018年
- 利用小鼠原代骨髓巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages, BMDMs)构建NOD (nucleotide binding oligomerization domain)样受体家族3 (NOD-like receptors, NLRP3)炎症小体活化模型,探讨甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对NLRP3炎症小体的调控作用及初步机制。脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)预处理BMDMs细胞后给予LCA,分别再给予三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)和尼日利亚菌素(nigericin)刺激构建NLRP3炎症小体活化模型,采用Caspase-Glo~? 1 Inflammasome Assay和ELISA检测细胞培养上清液中半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶1 (caspase-1)的活性、白细胞介素(interleukin, IL)-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌;通过免疫印迹法(Western blot)检测细胞上清中的成熟IL-1β、caspase-1的产生及细胞裂解液中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein, ASC)和pro-caspase-1、pro-IL-1β的表达。Caspase-Glo~? 1 Inflammasome Assay和ELISA结果表明,LCA能显著抑制ATP和nigericin诱导的NLRP3炎症小体组成蛋白pro-caspase-1和pro-IL-1β剪切活化,同时对细菌鞭毛蛋白(Lfn-Flic)诱导的NOD样受体家族半胱天冬酶激活募集结构域4 (NOD-like receptor containing a caspase activating and recruitment domain 4, NLRC4)炎症小体活性也具轻微抑制作用,但是对poly(dA:dT)诱导的黑色素瘤缺乏因子2 (the absent in melanoma 2, AIM2)炎症小体活化无影响。免疫印迹法检测显示LCA对NF-κB介导的NLRP3炎症小体组成蛋白NLRP3和pro-IL-1β表达无影响。综上,研究表明LCA可通过抑制pro-caspase-1剪切,阻断caspase p20介导的pro-IL-1β的剪切成熟,最终抑制NLRP3炎症小体介导免疫炎症反应。本研究在中国人民解放军第302医院伦理委员会审批下进行,为甘草及LCA防治NLRP3炎症小体相关疾病提供了依据。
- 付书彬徐广高源王智磊秦楠刘慧敏柏兆方肖小河
- 关键词：CASPASE-1
- 壮骨关节丸及其组成药味淫羊藿、补骨脂致免疫特异型肝损伤的比较研究
- 目的 利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的药物特异质肝损伤模型,对壮骨关节丸及其组成药味补骨脂、淫羊藿致大鼠肝损伤进行比较研究.方法 采用SD雄性大鼠尾静脉注射LPS (2.8 mg·kg-1...
- 高源秦楠徐广石伟刘慧敏付书彬左晓彬王伽伯肖小河柏兆方
- 关键词：壮骨关节丸淫羊藿补骨脂
- 壮骨关节丸及其组成药味淫羊藿、补骨脂致免疫特异型肝损伤的比较研究
- 目的：利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导的药物特异质肝损伤模型,对壮骨关节丸及其组成药味补骨脂、淫羊藿致大鼠肝损伤进行比较研究.方法：采用SD 雄性大鼠尾静脉注射 LPS(2.8 mg·kg-...
- 高源秦楠徐广石伟刘慧敏付书彬左晓彬王伽伯肖小河柏兆方
- 关键词：壮骨关节丸淫羊藿补骨脂
- 基于类器官3D培养和高内涵成像的药物肝毒性评价模型研究被引量：11
- 2017年
- 本研究采用HepaRG细胞建立类器官(organoids)3D培养模型,并结合高内涵成像技术建立药物肝毒性体外评价方法。通过氢化可的松和二甲基亚砜(DMSO)诱导,使HepaRG细胞分化为明显的肝细胞形态和胆管样结构,并诱导药物代谢酶、药物转运体、核受体及肝细胞特异标志性分子白蛋白(ALB)等相关基因的表达,形成稳定的模拟肝脏功能的类器官体外评价模型;采用高内涵成像技术,通过荧光染料进行特异性、多靶点染色,从类器官球体表型、活/死细胞数量、线粒体膜电位(MMP)和细胞内活性氧(ROS)评价药物肝毒性。结果表明,采用HepaRG细胞建立的类器官体外评价模型可以准确地评价肝毒性阳性对照药胺碘酮(amiodarone,AMD)、环孢霉素(cyclosporin,CSP)及阴性对照药阿司匹林(aspirin,ASP)的毒性差异:其中AMD和CSP均浓度依赖地导致类器官球体的总细胞数和活细胞数下降,并且AMD浓度超过50μmol·L^(-1)时,还导致类器官球体中死细胞数急剧增多,而ASP对类器官无明显损伤作用;AMD和CSP均浓度依赖地导致MMP下降和ROS水平增高,且AMD的作用强度大于CSP,而ASP对类器官无明显损伤作用。综上,HepaRG细胞建立的类器官高内涵成像评价方法可用于药物肝毒性的体外评价,并且具有多靶标高通量、结果直观且可定量等优势。
- 李朋彦李春雨陆小华石伟高源崔鹤蓉李婷婷柏兆方肖小河王韫芳王伽伯
- 关键词：线粒体膜电位活性氧
- 基于免疫应激的白鲜皮致特异质肝损伤评价研究被引量：10
- 2019年
- 利用脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)介导的药物特异质肝损伤模型,评价白鲜皮水提物(Cortex Dictamni aqueous extract, AE)和醇提物(Cortex Dictamni ethanol extracts, EE)致大鼠肝损伤的作用。首先采用大鼠急性毒性实验评价了AE和EE致肝损伤作用,进一步采用SD雄性大鼠构建LPS (2.8 mg·kg^(-1))模型(伦理审批号:IACUC-2018-008),通过血清谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)等肝功能指标检测,肝脏病理变化(hematoxylin-eosin staining, HE染色)、肝组织TUNEL染色、血清细胞因子检测及网络药理学等方法分析AE和EE致肝损伤作用。结果显示,各剂量组AE和EE对大鼠主要肝功能指标ALT、AST均无显著影响(P>0.05),肝脏病理和血清细胞因子等指标也未见明显改变。而在LPS模型中, 4.2 g·kg^(-1)AE和EE均可使ALT、AST显著升高(P<0.01),其中AE作用显著高于EE,肝脏病理显示两组肝细胞呈不同程度损伤, TUNEL染色则可见大量凋亡细胞,血清细胞因子检测则发现AE可显著促进肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)和白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6)的表达(P<0.01)。上述结果表明,在免疫应激状态下,白鲜皮可导致特异质肝损伤, AE所致肝损伤程度较EE更重。本研究为白鲜皮及其制剂肝损伤的机制研究和临床肝损伤风险防控提供依据。
- 石伟高源高源徐广王智磊秦楠王智磊肖小河
- 关键词：白鲜皮免疫应激脂多糖网络药理学
- 免疫调控与特异质型药物性肝损伤发生机制研究进展被引量：32
- 2017年
- 特异质型药物性肝损伤(idiosyncratic drug-induced liver injury,IDILI)是仅在少数人群发生的药物不良反应,其发生往往与服药时间、剂量无明确对应关系,具有不可预测性和发病率低等特点。研究表明,IDILI是机体、环境和药物因素协同作用的结果,而机体免疫是IDILI发生的主要诱因。目前,化学药物诱导的IDILI研究较为广泛和深入,形成了多种免疫学机制假说,较好地阐释了其发病特点和机制。近年来,中药特异质肝损伤也逐步被证实,并且形成了中药特异质肝损伤免疫应激"三因致毒"机制假说,较为全面地揭示了中药IDILI的发病特点和机制。本文就化学药物和中药诱导的IDILI免疫学机制假说进行综述,以期为IDILI评价和临床风险防控对策建立提供科学依据。
- 柏兆方高源左晓彬王伽伯肖小河
- 关键词：免疫调控化学药物中药
