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基于功能核酸的传感器研究: 功能核酸是具有特殊功能的核酸序列，可以特异性识别目标或是催化反应，该类物质因其特性，在生物分析、食品安全检测、环境分析、药物检测等方面表现出了巨大的潜力。本文利用利用功能核酸的识别以及催化功能，结合纳米粒子良好的修饰功能...; 周梦云; 关键词：脱氧核酶重金属离子光学特性

Mer基因过表达对内皮细胞株HMEC-1细胞血管形成的影响及其机制探讨: 2007年; 目的探讨受体酪氨酸家族成员 Mer 基因对体外血管形成过程的影响及其具体作用机制。方法利用脂质体法将人全长 Mer 基因真核表达质粒转染到内皮细胞株 HMEC-1细胞中,G418筛选转染细胞得到阳性克隆,利用 PCR 和 Western blot 分别在 mRNA 和蛋白水平验证转染情况。利用Transwell 和 Matrigel 分别观察 Mer 基因过表达对于内皮细胞迁移能力和血管形成能力的影响。通过荧光定量 PCR 筛选血管内皮生长因子(VEGF)-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D以及血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1、VEGFR-2基因的表达情况。结果经过 G418筛选后,PCR 和 Western blot 检测结果显示 Mer 基因在阳性克隆细胞中有较高水平表达,分别较空质粒对照组上升3.61倍和2.12倍;高表达 Mer 的 HMEC-1细胞迁移能力[迁移到 Transwell 下室壁的细胞为(21±6)/视野]较对照组[(36±11)/视野]明显下降。体外血管形成实验也表明高表达 Mer 基因的 HMEC-1细胞血管形成能力明显下降,抑制率为76.9%;荧光定量 PCR 结果显示 VEGF-C 和 VEGFR-2表达明显下降,VEGF-C 表达量为对照组的44.7%,VEGF-C 表达为对照组的25.6%。结论 Mer 过表达可以显著抑制 HEMC-1细胞的迁移能力和血管形成能力,并且可能是通过 VEGF-C/VEGFR-2信号途径发挥作用。; 范磊周梦云沈飞谢丽倩阮长耿; 关键词：受体酪氨酸激酶血管新生内皮生长因子

组织基质金属蛋白酶抑制剂-4真核表达载体的构建和功能研究: 人组织基质金属蛋白酶抑制剂-4(tissue inhibitor of matrix metalloproteinasestyoe-4，TIMP-4)是近年发现的TIMPs家族新成员，1996年由Greene等首先从人心...; 周梦云; 关键词：真核表达载体血管形成血管内皮细胞内皮细胞迁移; 文献传递

Mer免疫球蛋白样区原核蛋白表达和单克隆抗体制备被引量：3: 2007年; 目的利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体。方法从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断。经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克隆,经诱导和纯化后获得原核蛋白。利用所得的重组蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对Mer的IgG样区的特异性抗体。利用ELISA方法筛选阳性克隆,Westernblot方法进行验证。结果体外成功表达MerIgG样区的原核蛋白,片断大小经修饰后约为26kd,表达量占菌体总蛋白的15%,经Ni-NTAagrose柱纯化后得到纯化蛋白并免疫Balb/c小鼠。将小鼠脾脏细胞和杂交瘤细胞融合后得到1株特异性抗MerIgG样区的单克隆抗体——SZ-128,Westernblot显示此单抗可以和表达的重组蛋白和Mer胞外区真核蛋白反应。结论成功制备1株抗MerIgG样区的特异性单克隆抗体,为研究Mer的功能提供了有力的工具。; 范磊沈飞谢丽倩周梦云阮长耿; 关键词：MER 原核表达单克隆抗体

《儿女英雄传》里“啊”类语气词及其相关句类研究: 语气词是汉语区别于印欧语言的重要特征之一。语气词作为语气的外在标记，常常在句末或句中帮助表达语气。近代汉语语气词在汉语发展史上具有重要的地位。本文借鉴既有的研究成果，着重对近代汉语的句末语气词“啊”及“呀”、“哇”、“哪...; 周梦云; 关键词：近代汉语句末语气词; 文献传递

Mer在Jurkat细胞中的表达和抗凋亡作用被引量：1: 2007年; 背景与目的:Mer是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员,其配体Gas6和Mer结合后可以激活Mer的酪氨酸激酶活性以及下游信号转导途径,在细胞炎症、凋亡等方面发挥作用。近年来对于Mer及其家族成员功能的研究不断完善,但关于其在恶性疾病方面的研究报道甚少。本实验探讨Mer在恶性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat中的表达及其对Jurkat细胞凋亡过程的影响,并对其抗凋亡机制进行初步探究。方法:利用流式细胞仪分别检测正常外周血、骨髓中T淋巴细胞以及Jurkat细胞中Mer的表达。利用RNAi技术敲除Jurkat细胞中Mer的表达后采用噻唑蓝(MTT)法检测Mer对于Jurkat细胞增殖的影响,AnnexinV/PI双染流式细胞术检测Mer对于Jurkat细胞血清撤离诱导凋亡过程的影响。最后利用荧光定量PCR检测RNA干扰后凋亡相关基因Bcl-2和Caspase-3以探讨Mer在Jurkat细胞中抗凋亡机制。结果:Mer在正常外周血和骨髓的T细胞中均未见表达,而在Jurkat细胞中高表达(51.1%)。特异性的siRNA(第1403位点)可以抑制86.0%Mer在Jurkat细胞中的表达。在血清撤离48h导致的凋亡实验中正常Jurkat细胞仅有1.5%的凋亡率,而敲除Mer后的Jurkat细胞凋亡率达到15.3%,而MTT增殖实验中阻断Mer前后差异无统计学意义(P>0.05)。定量PCR结果显示敲除Mer基因后Jurkat细胞中Bcl-2明显下调,为对照组的42.7%,而Caspase-3变化不显著。结论:Mer在Jurkat细胞中异常高表达,并可能通过Bcl-2途径影响细胞凋亡过程。; 范磊戴兰沈飞周梦云董宁征阮长耿; 关键词：MER 受体酪氨酸激酶白血病 JURKAT细胞凋亡 BCL-2

Mer基因在急性髓系白血病中的异常表达: 2007年; Mer基因是Axl受体酪氨酸激酶家族中的一员，定位于2q14．1，全长为130755bp，包括19个外显子，MermRNA共3632bp，编码由999个氨基酸组成的相对分子质量为（18～20）×10^3的蛋白。Mer在正常的外周血和骨髓中表达于单核细胞，而在正常的粒细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞均不表达，但在部分恶性血液病细胞株中发现有Mer的异常表达，提示可能与部分血液肿瘤发生发展有关。我们利用流式细胞术和RT-PCR方法分别在蛋白和mRNA水平检测32例急性髓系白血病（AML）患者骨髓中Mer的表达，并初步探讨其与疾病发生发展的关系。; 范磊戴兰沈文红周梦云阮长耿; 关键词：急性髓系白血病 ER基因 RT-PCR方法受体酪氨酸激酶 B淋巴细胞

Mer参与内皮细胞凋亡过程及其机制研究: 目的:研究受体酪氨酸激酶 Mer 对于血管内皮细胞凋亡过程的影响并探讨其分子机制。方法:首先利用经典的血清撤离的方法诱导人微血管内皮细胞株 HMEC-1发生凋亡,细胞 ELISA 和 Realtime-PCR 分别检测凋...; 范磊沈飞谢丽倩周梦云阮长耿; 文献传递

TIMP-4真核表达载体的构建及其作用机制的研究: 2007年; 目的构建人组织基质金属蛋白酶抑制剂-4(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases type-4,TIMP-4)的真核表达载体,并探讨TIMP-4体外对血管新生的影响。方法根据已公布的基因序列设计相应引物,用RT-PCR方法从人微血管内皮细胞株HMEC-1的cDNA中扩增TIMP-4片段,采用限制性内切酶HindⅢ和XholⅠ将目的片段插入PcDNA3.1/V5-His-TOPO真核表达载体中。经过酶切和PCR鉴定后通过脂质体介导转染至HMEC-1细胞中进行表达。以Realtime PCR和West-ern Blotting分别检测TIMP-4在HMEC-1中mRNA和蛋白水平的表达;利用Matrigle进行血管形成试验,观察TIMP-4对血管新生的影响。结论构建PcDNA3.1/V5-His-TOPO-TIMP-4真核表达质粒,并获得高表达TIMP-4的HMEC-1细胞株,证实了TIMP-4体外抑制血管形成的作用。; 周梦云范磊董宁征沈飞阮长耿; 关键词：真核表达血管形成

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周梦云

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