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张亚男
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南京医科大学医药实验动物中心
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医药卫生
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周建丽
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赵书琴
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C57BL/6J小鼠冻融IVF原核胚用于Cas9显微注射探讨
2017年
目的探讨小鼠体外受精(IVF)冻融后用于Cas9注射的可行性。方法新鲜C57BL/6J小鼠卵子IVF后采用冻存管法(EFS20/40)冷冻原核胚(单细胞胚)和2细胞胚胎,次日复苏后培养。比较冻融原核胚和2细胞胚胎的回收率及成活率。选取部分冻融原核胚与新鲜原核胚同时进行Cas9和稀释液胞质注射并培养至2细胞,分别比较注射后的存活率及2细胞发育率。结果冻融后的B6小鼠原核胚的回收率为92.5%、成活率为92.8%,2细胞胚的回收率为90.5%、成活率95.8%,两组数据差异无显著性(P>0.05)。新鲜原核胚Cas9注射后的存活率为92.7%,空白组注射组为97.5%,冻融原核胚Cas9注射后的存活率为82.6%,空白组为92%,冻融组Cas9注射与各组差异有显著性(P<0.05),其它各组差异无显著性(P>0.05)。注射后的2细胞胚发育率差异无显著性(P>0.05)。结论冻融原核胚可用于Cas9显微注射。
曾文滔
周建丽
赵书琴
张亚男
梅云
关键词:
受精卵
胚胎冷冻
显微注射
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