章慧
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 供职机构：上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨肉瘤化疗耐药与自噬的研究进展被引量：5
- 2017年
- 骨肉瘤是起源于间叶组织的恶性肿瘤,多发生于儿童和青少年,是最常见的原发于骨的恶性肿瘤,好发于股骨远端和胫骨近端。单纯依靠手术治疗效果差,容易复发和转移。化疗和手术的结合是骨肉瘤的重要治疗手段,而多药耐药的发生是导致骨肉瘤化疗失败的主要原因之一。自噬对化疗耐药的影响主要认为其是骨肿瘤细胞逃避凋亡的一种重要机制,抑制自噬则可以显著提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。本文主要探讨骨肉瘤化疗耐药与自噬相关因子的关系、相关机制和最新研究。
- 章慧闵大六
- 关键词：骨肉瘤多药耐药自噬
- 微RNA-129-5p下调PAK5表达并调控骨肉瘤细胞增殖和凋亡被引量：3
- 2019年
- 目的 :探讨微RNA-129-5p(microRNA-129-5p,miR-129-5p)对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响,以及其可能的分子作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测骨肉瘤细胞MG63和成骨细胞hFOB1.19中miR-129-5p表达的差异。将miR-129-5p模拟物转染至骨肉瘤MG63细胞,并采用实时荧光定量PCR法验证转染效率后,CCK-8和平板克隆形成实验检测骨肉瘤细胞增殖;FCM法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-129-5p和靶基因p21活化激酶5(p21-activated kinase 5,PAK 5)的相互作用;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测PAK5 mRNA和蛋白水平的变化;蛋白质印迹法检测磷酸化糖原合成酶激酶3β(phospho-glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平的变化。将siRNA-PAK5、PAK5重组质粒以及miR-129-5p mimics+PAK5重组质粒分别转染骨肉瘤MG63细胞后,采用上述方法进一步验证miR-129-5p对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的分子作用机制。结果 :miR-129-5p在骨肉瘤MG63细胞中低表达(P <0.05)。转染miR-129-5p模拟物后,骨肉瘤细胞的增殖和克隆形成能力降低(P <0.001,P <0.01),而细胞凋亡率升高(P <0.05)。mi R-129-5p负性调控PAK5基因表达(P <0.05)。转染miR-129-5p模拟物或siRNA-PAK5后,PAK5mRNA和蛋白表达水平明显降低(P值均<0.01),而且p-GSK-3β和β-catenin蛋白表达水平也明显降低(P <0.05,P <0.01);而过表达PAK5可以恢复miR-129-5p对骨肉瘤细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响(P值均<0.05)。结论 :miR-129-5p通过下调PAK5基因表达,抑制骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡;其作用机制可能与调控p-GSK-3β和β-catenin蛋白表达相关。
- 章慧孙星星周梅香韩坤田聪甘志华闵大六
- 关键词：骨肉瘤微RNAS基因表达调控
- 微RNA-137-3p通过下调PTN表达调控骨肉瘤细胞耐药被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨多效生长因子PTN(pleiotrophin)对骨肉瘤细胞耐药的作用,以及其可能的分子机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测骨肉瘤耐药细胞MG63/ADR和亲本细胞MG63中PTN和微RNA(microRNA,miR)-137-3p表达的差异。分别将siRNA-PTN和miR-137-3p模拟物转染骨肉瘤耐药细胞MG63/ADR,将PTN重组质粒或miR-137-3p抑制剂转染亲本细胞MG63,验证转染效率后,采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖活力的变化。应用双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-137-3p和靶基因PTN相互作用。将siRNA-PTN、miR-137-3p模拟物及miR-137-3p模拟物+PTN重组质粒分别转染骨肉瘤耐药细胞MG63/ADR后,采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测PTN mRNA和蛋白表达水平的变化,并采用CCK-8法检测骨肉瘤细胞增殖能力的变化。结果:与亲本细胞相比,骨肉瘤耐药细胞MG63/ADR中PTN呈明显高表达(P<0.01),而miR-137-3p水平明显较低(P<0.01)。转染siRNAPTN或miR-137-3p模拟物后,MG63/ADR细胞增殖和克隆形成能力均明显降低(P值均<0.01);转染PTN重组质粒或miR-137-3p抑制剂后,MG63细胞增殖和克隆形成能力均明显增强(P值均<0.01)。PTN是miR-137-3p的下游靶基因,miR-137-3p能负调控PTN的表达(P<0.01)。转染siRNA-PTN或miR-137-3p模拟物后,骨肉瘤耐药细胞MG63/ADR中PTN mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P值均<0.01),而过表达PTN可以逆转miR-137-3p对MG63/ADR细胞增殖和克隆形成的抑制作用(P<0.01)。结论:PTN能够调控骨肉瘤化疗耐药,其机制可能与miR-137-3p下调其表达有关。
- 孙星星章慧韩坤周梅香甘志华田聪朱洪玲闵大六
- 关键词：骨肉瘤微RNAS基因表达调控PTN
