黄常志
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 反义热休克蛋白hsc70对突变型p53蛋白稳定性的影响被引量：3
- 2001年
- 目的 探讨反义hsc70RNA对突变型p5 3稳定性的影响。方法 利用DNA重组技术构建反义hsc70真核表达质粒pXAhsc70。脂质体介导将重组质粒转染至MCF 7/Adr人乳腺癌细胞 (突变型p5 3) ,经PCR确定转染细胞中外源DNA存在后 ,以Westernblot检测hsc70蛋白的抑制程度。p5 3稳定性实验分析反义hsc70RNA对突变型p5 3半衰期的改变。结果 建立稳定表达反义hsc70RNA的细胞株MAc70 ,hsc70蛋白表达下降 42 % ,其胞内突变型p5 3含量下降 ,半衰期缩短 ,稳定性下降。结论 反义hsc70RNA能够明显地降低突变型p5 3稳定性。
- 范云霞赵玫黄常志施一江周纯徐枫杜菲林梁
- 关键词：反义RNAP53蛋白乳腺肿瘤基因突变稳定性
- 热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞生长的影响
- 2004年
- 目的 探讨热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞株生物学行为的影响。 方法 构建gp96正义和反义真核重组表达质粒 pcDNA hgp96和 pcDNA anti96P ,并转染B16F10细胞 ,G 418筛选稳定转染的阳性细胞克隆 ,然后Western印迹分析细胞gp96的表达情况 ,绘制细胞生长曲线 ,观察 gp96表达对细胞生长特性的影响。 结果 转染了 gp96正义表达质粒的B16F10细胞gp96表达水平升高 ,细胞生长缓慢 ,倍增时间延迟 ;反义gp96表达质粒明显抑制了B16F10细胞 gp96表达 ,使细胞倍增时间提前。结论 热休克蛋白 gp96表达水平升高可抑制肿瘤细胞的生长 ,而 gp96表达水平下降则肿瘤细胞生长速度加快 。
- 岳培彬赵玫林梁余权王晓霞黄常志
- 关键词：热休克蛋白细胞生长生物学行为
- 热休克蛋白70对突变型p53稳定性的影响被引量：6
- 2001年
- 目的:探讨热休克蛋白70(heatshockprotein70HSP70)对突变型p53(mutanttypep53mtp53)稳定性的影响。方法将反义HSP70真核表达重组质粒pXAHSP70脂质体介导转染至MCF7/Adr人乳腺癌细胞,PCR确定转染细胞中外源DNA存在,Westernblot检测HSP70蛋白的抑制程度,p53稳定性实验分析反义HSP70RNA对mtp53半衰期的改变。结果:转染重组质粒的MCF7/Adr细胞中HSP70蛋白表达下降42%,其胞内mtp53含量下降,半衰期缩短了6h,稳定性下降。结论:反义HSP70RNA能够明显地降低mtp53稳定性,提示肿瘤细胞中HSP70高表达可增强mtp53的稳定性。
- 范云霞赵玫黄常志茆灿泉周纯徐枫杜菲林梁
- 关键词：MTP53反义RNA稳定性
- 反义HSP70对人乳腺癌细胞的抑瘤效应被引量：7
- 2001年
- 目的：观察反义热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）RNA对人乳腺癌细胞的生物学特性的影响，探讨其抗肿瘤作用。方法：将逆转录病毒真核表达载体介导的反义HSP70重组质粒pX-AHSP70和空载体pLXSN-neo转染至MCF7/Adr人乳腺癌细胞，通过细胞生长曲线和软琼脂集落实验以及裸鼠移植瘤实验观察转染反义HSP70重组质粒细胞的体内外抑瘤作用。结果：建立了稳定表达反义HSP70 RNA的MAp70细胞，与空载体细胞相比，HSP70蛋白的表达下降了48％。细胞群体生长速度明显减慢，软琼脂集落形成率和抑制率分别为6.08％和62.14％，裸鼠皮下接种的平均出瘤时间为15天，最终平均瘤重为108 mg，以上参数与空载体细胞相比，均有显著差异。结论：反义HSP70 RNA能够有效地抑制HSP70表达，进而抑制乳腺癌细胞的体外增殖和体内移植瘤的形成与发展。
- 范云霞赵玫黄常志茆灿泉杜菲周纯
- 关键词：热休克蛋白70基因治疗
