张伟
- 作品数：89 被引量：249H指数：8
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学化学工程更多>>
- Bit1基因在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因激活作用的检测
- 2006年
- 目的:用Bit1基因片段构建酵母双杂交诱饵载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用.方法:运用RT PCR技术从卵巢癌细胞系Caov3中扩增出Bit1基因片段,克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用.结果:成功获得Bit1基因片段,Bit1基因表达的蛋白对酵母菌AH109无毒性,对报告基因亦无激活作用.结论:可以利用酵母双杂交Gal4系统来研究与Bit1相互作用的蛋白.
- 滑玮张伟吕海鹏辛晓燕
- 关键词：凋亡报告基因
- EPO/EPOR在非小性细胞肺癌发展中的作用研究
- 2015年
- 目的:研究促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)及其受体(EPOR)在非小性细胞肺癌中的生物学作用。方法:收集27例非小性细胞肺癌(NSCLC),免疫组织化学方法检测肺癌组织中EPO和EPOR的表达;观察人源重组EPO(rh EPO)对HCC15和HCC1819细胞活力和细胞周期的影响;分析缺氧对NSCLC细胞EPO及EPOR表达的影响。结果:27例非小细胞肺癌的组织标本中13例表达EPO,表达率为48%,25例表达EPOR,表达率为92%。rh EPO明显增加了高表达EPOR的HCC1819细胞克隆数,而对低表达EPOR的HCC15细胞的克隆形成没有影响。rh EPO增强了HCC1819的细胞活力,但以si RNA干涉HCC1819EPOR后,EPO对HCC1819细胞活力增强作用消失。rh EPO明显增加了HCC1819细胞的细胞周期。缺氧促进了HCC1819细胞的EPO的表达,增强了细胞活力。结论:EPO和EPOR在非小性细胞肺癌中表达增高,EPO通过EPOR促进了NSCLC细胞的增殖,缺氧诱导了NSCLC细胞EPO的表达。
- 吴守振李海龙张阔张旺倩薛晓畅张伟张英起
- 关键词：EPOEPORNSCLC细胞周期
- HCV核心蛋白在HepG2细胞中对COX-2表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白是否影响环氧化酶-2(COX-2)的表达。方法用PCR从含HCVH77株全长基因组序列质粒中扩增HCV核心蛋白基因,并克隆至pcDNA3.1载体中,构建HCV核心蛋白基因的真核表达载体HCV-C/pcDNA3.1。用HCV-C/pcDNA3.1和含COX-2启动子的荧光素酶报告载体COX2pro1.5kb/luc瞬时共转染HepG2细胞,测定萤火虫荧光素酶的活性,并用Westernblot检测COX-2蛋白的表达水平。结果成功地构建了HCV-C/pcD-NA3.1重组质粒。瞬时转染后的HepG2细胞中,COX2启动子荧光素酶的活性显著增强。Westernblot检测,发现COX-2的表达明显升高。结论HCV核心蛋白在HepG2细胞中激活COX-2启动子,并且明显诱导COX-2的表达,为进一步研究COX-2与HCV致病性的关系提供了新的实验依据。
- 刘艳丽闫岩白文涛张芳琳吕欣张伟徐志凯
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白环氧化酶-2
- 重视'小病案'授课法在医学微生物学教学实践中的应用
- 随着现代医学科学技术的飞速发展,医学微生物学的新病原、新技术、新方法日新月异,教学内容也在不断地增加,教学模式从古老单一的黑板加挂图向多媒体课件、声像并茂的网络课程转变.虽然多媒体教学在信息量、生动性、可视性和可重复性等...
- 宋建华丁天兵张伟
- 关键词：教学应用教学实践微生物学
- 文献传递
- 16例国际标准化心脏死亡捐献肾移植受者术后早期临床效果分析
- 目的:探讨16例国际标准化心脏死亡捐献(DCD)供肾来源肾移植受者术后早期临床效果.方法:我院自2013年1月至2014年1月,接受陕西省红十字会分配的DCD的肾脏,完成了16例DCD肾移植.8例供者均符合荷兰马氏(Ma...
- 毛天赐王禾赵致广张伟雷永华杨帆许志斌罗娟
- 蛋白质研究技术实验课教学及改革被引量：4
- 2015年
- 蛋白质研究技术是医学、药学、生物技术和生物制药专业的一门必修课程,也是理论与实践紧密结合的一门课程。蛋白质研究技术的实验课是这门课程的重要组成部分,具有重要的作用,实验课教学质量的高低极大地影响着这门课质量的好坏。在总结蛋白质研究技术实验课教学特点的基础上,加强教师团队建设,使教学内容具有连贯性和连续性,改变了常规课时制,让学生参与到实验准备中。经过实践发现,这些改革措施提高了教学质量,调动了学生的积极性和主动性,激发了学生的创造性。
- 张阔吴守振张旺倩张伟张英起
- 关键词：实验课教学
- 组织芯片技术在肿瘤病理学研究中的进展
- 织芯片是研究同一种基因或蛋白分子在成千上万种细胞或组织中表达的情况的新兴的芯片技术,具有高通量、大样本、省时快速、用途广泛和便于设计实验对照等优点,近两年已经逐渐运用于医学、生物学的多个领域学科。本文针对组织芯片在肿瘤病...
- 晏伟李涛薛洋张伟
- 文献传递
- 人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因的克隆、原核表达和纯化被引量：6
- 2006年
- 目的:获得原核表达的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白。方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质样细胞系中获得cDNA,亚克隆至PUC18载体中,经测序确认后,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,通过电穿孔技术转化E.coli表达菌DH5α,以IPTG诱导蛋白表达,并经Ni-NTA亲和柱层析纯化,SDS-PAGE鉴定。结果:获得的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性cDNA序列与GenBank登录的cDNA序列一致。结论:成功克隆人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因,建立了原核表达、纯化体系,制备了纯化的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白。
- 吕海鹏史俊南赵守亮张伟滑玮雷迎峰Athony J.Smith
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 新基因C1orf63功能的初步研究
- 2011年
- 目的检测C1orf63基因在肝癌和癌旁组织中的定位,以及C1orf63在多种人肝癌细胞系和人胃癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平;检测干涉C1orf63后对人胃癌细胞MKN28的细胞周期的影响。方法免疫组化染色法检测C1orf63基因在组织中的定位;Real-time PCR和Western blot分别检测C1orf63基因在细胞中的表达;脂质体转染法将干涉片段转染至MKN28细胞中,Real-time PCR和Western blot法筛选有效干涉片段;流式细胞术检测C1orf63干涉后对MKN28细胞的细胞周期的影响。结果 C1orf63在肝癌和癌旁组织细胞中都有胞浆表达,在MKN28细胞中表达量较高,在MKN45细胞中表达量较低;成功筛选出C1orf63基因的有效干涉片段;C1orf63干涉后,胃癌细胞MKN28发生G1期阻滞,经统计学分析,C1orf63干涉后MKN28细胞增殖指数降低(P<0.05)。结论 C1orf63在人肝癌和癌旁组织细胞胞浆中都有表达,在MKN28细胞中表达量最高;干涉C1orf63基因后,可使MKN28细胞发生G1期阻滞,为该基因功能的后续研究奠定了基础。
- 何颖郝强李维娜舒震张阔金亮亮张伟张英起
- 关键词：MKN28RNAI细胞周期
- 人成牙本质细胞L型钙离子通道α_1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒的构建和鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的:构建人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒。方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质样细胞系中获得cDNA,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,通过电穿孔技术转化E.coli表达菌DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定,同时对阳性克隆进行测序鉴定。结果:获得的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性cDNA序列,与GenBank登录的cDNA序列一致。结论:成功地构建了人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒。
- 吕海鹏史俊南滑玮张伟Athony J.Smith4赵守亮
- 关键词：基因克隆原核表达
