王磊
- 作品数：57 被引量：300H指数：10
- 供职机构：鲁东大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省教育厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 反义磷脂酶Dγ基因转化悬铃木的研究被引量：3
- 2006年
- 我们已经建立了利用悬铃木叶片培养诱导植株的高频再生体系。本研究是在这一体系的基础上,以继代生长40天左右的组培苗顶部充分展开的叶片为受体,用含有反义磷脂酶Dγ(PLDγ)基因的农杆菌浸染叶片,通过在含有卡那霉素的培养基上进行抗性筛选,获得了抗性植株。对抗性植株进行了PCR和PCR-Southern杂交鉴定,证明反义PLDY基因已整合进悬铃木核基因组中。
- 李红双王磊宿红艳崔德才
- 关键词：悬铃木根癌农杆菌转基因植株
- 环境因子对栉孔扇贝血淋巴中谷胱甘肽转硫酶活性的影响
- 2011年
- 采用分光光度法研究了环境因子对栉孔扇贝(Chlamys farreri)血淋巴中谷胱甘肽转硫酶(GST)活性的影响。结果表明,血清和血细胞中都存在GST,且血细胞中酶活力高于血清。血细胞中GST的适宜温度范围是20～35℃,最适温度为30℃,在60℃时酶活力完全丧失。该酶的适宜pH为7～8,最适pH为7.5。将血细胞裂解液在不同温度水浴中放置30 min后,GST的热稳定性随温度的升高而降低,35℃时的酶活力为20℃的22%,显示该酶的热稳定性较差;低温下该酶的稳定性也较差,4℃存12 h后酶活力丧失了51%。Cu2+和Pb2+对GST活力有显著抑制作用,在0～2.5 mg/L质量浓度范围内,GST活力随Cu2+质量浓度的升高而降低;在0～5 mg/L质量浓度范围内,GST活力随Pb2+质量浓度的增大而下降。
- 王宜艳孙虎山周彦菊闫冬春王磊
- 关键词：血淋巴谷胱甘肽转硫酶酶活力
- rpoS基因插入突变对铜绿假单胞菌两个吩嗪合成基因簇的调控被引量：3
- 2010年
- 【目的】为了研究铜绿假单胞菌rpoS基因对吩嗪(Phenazine)合成基因簇phz1和phz2的调控方式与机制。【方法】采用抗庆大霉素基因(gentamycin resistance cassette,aacC1)插入失活的策略构建了rpoS基因突变株PA-SG;同时利用lacZ的翻译融合表达载体pME6015,构建了phz1′-′lacZ和phz2′-′lacZ翻译融合表达载体pMEZ1和pMEZ2。采用电转化法分别将pMEZ1、pMEZ2和pME6015导入铜绿假单胞菌突变株PA-SG和野生株PAO1,用Miller法检测融合β-半乳糖苷酶活性。【结果】在KMB或PPM培养基中,pMEZ1在突变株PA-SG中的表达均增强,为野生株的4-5倍;而pMEZ2在突变株PA-SG中的表达均降低,野生株是突变株的2-3倍。【结论】由此推测,铜绿假单胞菌rpoS基因对两个不同吩嗪合成基因簇的调控作用具有特异性,在一定程度上,rpoS负调控phz1,正调控phz2。
- 周金凤葛宜和刘婷程显好王磊高兴喜
- 关键词：铜绿假单胞菌RPOS吩嗪
- 海洋交替单胞菌YTW-10的鉴定及抑菌活性分析被引量：5
- 2011年
- 菌株YTW-10分离自山东烟台海域近海盐场泥样中。该菌能在NaCl浓度为1%～15%的培养基中生长,最适生长NaCl浓度为7%,最适生长温度为37℃,最适pH值为8。经过形态学观察、生理生化特性分析及基于16S rDNA的系统进化分析,该菌株鉴定为交替单胞菌属。以3株水产生物致病细菌和3株农作物致病真菌作为指示菌,检测其抑菌活性。实验结果表明,YTW-10对小麦赤霉病菌、西瓜枯萎病菌和玉米弯胞病菌有明显的抑制效果。
- 王磊宿红艳杨润亚王晓杰林文杰
- 关键词：抑菌活性
- 增强生药学课堂教学趣味性的探索与实践被引量：2
- 2017年
- 2016年国务院明确指出我国中医药发展方向的重点是"加强中药资源保护利用"、"推进中药材规范化种植养殖"、"完善中医药标准体系",这些工作的前提和保障是"加强中医药人才队伍建设",生药学教育工作责任重大。然而,生药学内容枯燥、易学难记,学生缺乏学习兴趣,教学效果不佳。在教学过程中引入传说典故和社会热点焦点能够增强课堂教学趣味性,生药实物进课堂、课内实验的精心设计、考核方式多元化等多项改革措施改变了生药学原本枯燥乏味、流水账式的刻板形象,实现了理论和实践的有机结合,使得生药学成为学生喜闻乐见的课程之一。
- 陈国忠程畔畔王磊肖波辛晓林王晓洁
- 关键词：生药学趣味性教学改革
- 毛果杨中与PtMKK4互作的PtMPKs的筛选及验证
- 2015年
- 【目的】在外界刺激传递到胞内引起细胞响应的信号转导网络中,促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)级联途径处于中心环节。该途径由MAPKKK,MAPKK和MAPK 3种蛋白激酶组成,各组分之间以逐级磷酸化的方式构成信号放大途径,特异感受上游刺激,将信号放大并向下传递给靶蛋白。迄今尚未在杨树中确定一条完整的MAPK信号通路。毛果杨MAPKK成员PtMKK4在干旱信号转导中发挥重要作用,筛选、鉴定其进一步激活的靶标MAPKs将为深入理解MAPK级联途径调控植物逆境响应机制提供重要信息。【方法】利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术筛选、鉴定与PtMKK4互作的MAPKs,并采用半定量PCR方法对筛选到的PtMPKs在干旱和高盐胁迫处理下表达水平的变化进行分析。【结果】分别构建pGBKT7-PtMKK4诱饵表达载体和pGADT7-Pt MPKs猎物表达载体,共转化酵母Y2H感受态细胞。仅共转化p GBKT7-Pt MKK4和pGADT7-PtMPK6-1的酵母菌可在营养缺陷型筛选培养基SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His和SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长,且在SD/-Ade/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal中生长的菌落显示蓝色。双分子荧光互补试验进一步证实PtMKK4和PtMPK6-1存在蛋白互作。此外,与PtMKK4相似,PtMPK6-1可被20%PEG和200 mmol·L-1NaCl诱导表达。【结论】在毛果杨MAPK级联途径中,PtMPK6-1可能为PtMKK4激活的靶标。
- 王磊宿红艳顾亮常志远陈娜
- 关键词：酵母双杂交
- 山楂提取物生物合成纳米银对四种常见水产病原菌的抑制作用被引量：10
- 2016年
- 近年来,"绿色"生物合成纳米抑菌材料以其方法简单、价格低廉、环境友好的优势已成为纳米技术领域中的一项激动人心的发展策略。为了研究生物合成纳米银(Silver nanoparticles,Ag NPs)对水产病原菌的抑菌效果,本研究分别以山楂果实超纯水提取物和山楂乙醇提取物作为还原剂和稳定剂,采用生物合成法制备出两种纳米银抑菌材料W-Ag NPs和E-Ag NPs。通过紫外-可见吸收光谱(UV-vis)、透射电镜(TEM)和X射线衍射(XRD)等方法对合成产物的光学特性、形貌特征以及晶体结构等指标进行了比较,并采用琼脂扩散法初步检测了W-Ag NPs和E-Ag NPs对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌两种典型病原菌的抑菌活性。研究结果显示,W-Ag NPs的合成效果较为理想,它的粒径较小、更加均一,并且具有较高的抑菌活性。在此基础上,我们进一步检测了W-Ag NPs对鳗弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌及点状气单胞菌等4种典型的水产病原菌的抑菌圈,并测定了其抑菌动力学曲线、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。研究结果表明,W-Ag NPs对四种供试水产病原菌均有显著的抑菌效果,10μg/m L和20μg/m L的W-Ag NPs均对鳗弧菌的生长产生明显的抑制作用,对鳗弧菌的MIC和MBC分别为6.5μg/m L和12.9μg/m L。研究表明山楂提取物制备的纳米银抑菌剂对水产病原菌有显著的抑制和杀灭效果,在水产养殖领域中有着广阔的开发和利用前景。
- 姜宇李福艳刘冲冲徐慧孙虎山王磊
- 关键词：山楂纳米银生物合成水产病原菌抑菌活性
- 中度嗜盐菌的研究进展被引量：9
- 2009年
- 介绍嗜盐微生物的分类,对中度嗜盐菌的研究历史、嗜盐机制、应用进行综述,并对中度嗜盐菌的应用前景进行展望。
- 冯二梅宿红艳王磊
- 关键词：中度嗜盐菌
- 头孢噻肟钠人工抗原的合成与鉴定
- 2012年
- 采用碳化二亚胺法将头孢噻肟钠(CTX)与牛血清白蛋白(BSA)以及卵清白蛋白(OVA)分别进行偶联,合成完全抗原(CTX-BSA,CTX-OVA),紫外吸收光谱(UV)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定并测定CTX-BSA的偶联比,结果显示:与CTX(235.0 nm)、BSA(278 nm)、OVA(232.0,278.0 nm)相比,CTX-BSA(213.0,275.5 nm),CTX-OVA(223.5,274.5 nm)特征吸收峰位移明显,CTX-BSA的偶联比为5.8∶1.CTX-BSA与BSA以及CTX-OVA与OVA的SDS-PEG图谱相比,完全抗原泳动速度滞后.以CTX-BSA免疫动物并用间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定抗血清效价,血清效价≥1∶100000.以CTX对免疫血清进行间接竞争ELISA测定,CTX可有效抑制免疫血清效价.
- 王守海王晓洁鞠丽萍栾静王磊阮新刘晓晨史倩
- 关键词：头孢噻肟钠牛血清白蛋白
- ADP核糖基化因子的结构及其功能机制被引量：12
- 2007年
- ADP核糖基化因子(ADP-ribosylation factor,ARF)是Ras基因超家族的成员,它们是大小约20kDa的鸟嘌呤核苷酸结合蛋白。ARF最初发现作为霍乱毒素ADP-核糖转移酶的辅助因子共同作用于G蛋白α亚基,促使其ADP-核糖基化。近来人们发现ARF还参与囊泡运输、调节磷脂酶D的活性,在细胞内物质运输和信号转导过程中具有更加重要的生理功能。现就ARF的发现、分类、结构和功能、表达以及生理功能作一综述。
- 王磊宿红艳王昌留穆春华
