张伟 作品数:21 被引量:125 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 The Royal Society 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
甲基丙烯酸环氧丙酯与DNA的结合作用 被引量:8 1992年 运用吸收光谱移动法观察到甲基丙烯酸环氧丙酯Glycidyl Mcthacrylate,GMA与哺乳类基因组DNA具有强的结合作用。GMA浓度在0—2.8mmol/L范围内,DNA的吸收光谱随GMA浓度的增加而增加了向长波方向位移,并伴随吸收强度降低。若固定GMA浓度,改变DNA浓度,GMA吸收光谱也出现与上类似现象。实验还表明GMA与DNA的结合键型为共价型。 谢大英 张伟 孙文庆 高惠兰 李忠生 许建宁 方福德关键词:DNA 小鼠IgM/IgA Fc受体(Fcα/μR)的组织定位 背景:IgA、IgM在机体的天然免疫和粘膜免疫中发挥重要作用,针对其Fc受体的研究也一直为人们所重视。但是到目前为止,确定的FcμR基因仍未发现,而在小鼠Fc受体当中也未发现与人FcαRI(CD89)相对应的受体。近年来... 王睿 张伟文献传递 抗核小体抗体与儿童系统型红斑狼疮的相关性 被引量:4 2005年 目的探讨抗核小体抗体(AnuA)在诊断儿童系统型红斑狼疮(SLE)中的敏感性和特异性,了解AnuA与儿童SLE临床特征、疾病活动性的相关性。方法用Hep-2细胞提取核小体。用酶联免疫吸附方法(ELISA)测定血清中的AnuA,分析AnuA和临床表现的相关性。结果52例SLE中18例AnuA阳性。27例疾病对照组中1例AnuA阳性,30例正常对照组AnuA均为阴性。AnuA在儿童SLE中的敏感性为35%,特异性为96%。AnuA阳性组SLE患儿100%有中枢神经系统损害,AnuA阴性组为47%(χ2=14.57,P<0.05)。AnuA阳性组SLE患儿100%有肾脏损害,AnuA阴性组为51%(χ2=13.31,P<0.05)。AnuA阳性和AnuA阴性的SLE患儿SLEDAI评分高于10分者分别为100%和71%(χ2=6.56,P<0.05)。结论AnuA对儿童SLE的诊断具有较高的特异性,有助于抗dsDNA抗体、抗心磷脂抗体阴性的儿童SLE的诊断。 赵青 吴凤岐 张伟关键词:抗核小体抗体 系统型红斑狼疮 人U937细胞吞噬IgA免疫复合物的研究 被引量:2 2003年 目的 对IgAFc受体 (FcαRⅠ )介导的U937细胞吞噬IgA免疫复合物进行研究。方法以异硫氰酸荧光素 (FITC)标记的 8.9NIP BSA为抗原 ,与抗NIP的IgA或IgG抗体结合 ,分别形成IgA免疫复合物 (IgAIC)和IgG免疫复合物 (IgGIC) ,再与经佛波醇乙酯 (PMA)刺激分化为单核细胞样的U937细胞孵育 ,流式细胞仪分析U937细胞吞噬IgAIC和IgGIC的情况。结果U937细胞表面FcαRⅠ表达量高于 3种IgGFc受体 (FcγRⅠ、FcγRⅡ、FcγRⅢ )。PMA刺激后细胞表面FcαRⅠ上调明显 ,吞噬IgAIC能力增加。FcαRⅠ介导的U937细胞对IgAIC的吞噬作用高于FcγRⅠ和FcγRⅡ介导的对IgGIC的吞噬作用 ,且这种吞噬作用是特异性的。在补体受体CR1和CR3作用下 ,U937细胞对IgAIC的吞噬作用有所增强。结论 FcαRⅠ介导单核细胞非常强的吞噬IgAIC的作用。 郭彩云 崔薇 张伟关键词:U937细胞 FC受体 免疫复合物 免疫球蛋白A 表达膜抗AchR抗体的杂交瘤细胞株的建立 被引量:2 2010年 目的建立表达膜特异性自身抗体的细胞株。方法用DNA重组技术表达乙酰胆碱受体α亚基,并用其免疫小鼠。应用杂交瘤技术,建立小鼠脾细胞融合的杂交瘤细胞株。通过流式细胞术分析杂交瘤细胞膜抗体和膜免疫球蛋白的表达,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析膜抗体和分泌型抗体分子质量的差别,用免疫沉淀和W estern b lot等方法鉴定膜蛋白和分泌蛋白。结果杂交瘤细胞既可以分泌抗体又可以表达膜抗体。结论表达膜抗AchR的杂交瘤细胞类似于重症肌无力中表达膜自身抗体的B细胞,可进一步作为靶细胞研究该疾病。 赵青 尹娜 张伟关键词:杂交瘤细胞 重症肌无力 分泌抗人乙酰胆碱受体抗体骨髓杂交瘤细胞的制备及鉴定 2010年 目的:从大鼠骨髓制备抗人乙酰胆碱受体(AchR)的单克隆抗体。方法:在E.coli中表达人AchRα1亚基,Ni-NTA层析纯化包涵体,并经透析复性。用所纯化的蛋白免疫Lewis大鼠诱导重症肌无力,免疫后大鼠的脾脏和骨髓分别与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体。结果:成功在E.coli中表达了人AchRα1亚基的膜外区,用复性蛋白免疫大鼠诱导出重症肌无力症状。用免疫大鼠的脾脏和骨髓分别制备了单克隆抗体。结论:可以用制备杂交瘤的方法将骨髓B细胞永生化,为进一步研究重症肌无力发病机理和检测奠定了基础。 赵青 尹娜 张伟关键词:ACHR 骨髓 杂交瘤 重症肌无力 稳定表达人可溶性增殖诱导配体(sAPRIL)的CHO细胞株的建立及鉴定 2011年 目的:构建稳定表达人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-inducing ligand,sAPRIL)的CHO细胞株。方法:利用RT-PCR方法克隆出sAPRIL基因,构建表达该基因的慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染HEK-293T细胞,以包装病毒颗粒。将病毒上清感染CHO细胞,获得稳定表达sAPRIL的细胞株。利用RT-PCR、Western blot及FACS等方法鉴定其表达。结果:成功克隆出人sAPRIL基因,RT-PCR、Western blot及FACS结果显示成功构建了稳定表达sAPRIL的CHO细胞株。结论:结论:成功获得了稳定表达sAPRIL的细胞株,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 张琳 赵青 张伟关键词:增殖诱导配体 慢病毒载体 基因表达 人IgA/IgM Fc受体(hFcα/μR)的真核表达及功能研究 目的:近来研究发现一种既可以结合IgM,又可以结合IgA的新型人Fc受体(hFcα/μR)。目前没有发现与hFcα/μR有同源性的其他蛋白,因此将其归为单基因家族。本实验室已在大肠杆菌中表达了hFcα/μR 的膜外区全长... 杨丽君 付莹 王睿 张伟文献传递 补体介导Fcα/μ受体对人肾小球系膜细胞的杀伤 2010年 目的研究补体能否经由Fcα/μ受体(Fcα/μR)介导杀伤人肾小球系膜细胞。方法应用脂质体将带有Fcα/μRcDNA的质粒pcDNA3.1-Fcα/μR转染入人肾小球系膜细胞(NHMC),用Western blot检测Fcα/μR在NHMC细胞的表达,激光共聚焦显微术检测Fcα/μR在细胞膜的表达。用流式细胞术与激光共聚焦显微术检测所制备的IgM型免疫复合物(IgM-IC)与膜表达Fcα/μR的NHMC细胞的结合,用台盼蓝染色检测补体介导的细胞杀伤作用。结果成功制备了胞膜表达Fcα/μR的NHMC细胞,IgM与IgM-IC能经由Fcα/μR结合于NHMC细胞。在补体作用下,结合有IgM-IC的pcDNA3.1-Fcα/μR转染细胞死亡率显著高于对照组野生型细胞、空载质粒转染细胞及无IgM-IC结合的pcDNA3.1-Fcα/μR转染细胞(P<0.001)。结论胞膜表达Fcα/μR并结合有IgM-IC的人肾小球系膜细胞能为补体所杀伤。 沈濂 王晓燕 赵青 张伟关键词:IGM 免疫复合物 补体 肾小球系膜细胞 IgA Fc受体介导的中性粒细胞脱颗粒反应的机理研究 2001年 目的 对IgAFc受体 (FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒行为进行研究。方法 分别用IgA免疫复合物 (IgAIC)和单克隆抗体 (MIP8a)交联中性粒细胞表面的FcαR ,用细胞释放的乳铁蛋白作为脱颗粒反应的指示剂 ,比较不同交联物激活细胞后产生的脱颗粒现象。结果 MIP8a交联FcαR后中性粒细胞发生迅速脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子的情况下 ,该反应减弱。但是在胞外无镁离子的情况下 ,反应不受影响。IgAIC交联FcαR后仅引起缓慢的脱颗粒反应 ,在胞外无钙离子或无镁离子的情况下 ,都不能发生反应。结论 FcαR作为受体 (由IgAIC交联FcαR)和FcαR作为抗原 (由MIP8a交联FcαR)介导的中性粒细胞脱颗粒反应不同。 毕波 张伟 石敏鹿关键词:FC受体 中性粒细胞 脱颗粒