王芳
- 作品数:5 被引量:31H指数:3
- 供职机构:郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 罗尔斯通氏菌菌株H16新杀虫蛋白的纯化及活性测定被引量:1
- 2009年
- 利用(NH4)2SO4盐析、超滤、Sephacryl-400HR凝胶过滤层析及DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析等方法,从罗尔斯通氏菌菌株H16(Ralstonia eutropha H16)中分离纯化出一种新的杀虫毒素蛋白。生物活性测定结果表明,此杀虫毒素蛋白存在于胞内和胞外上清液中,电泳结果显示胞内和分泌到胞外的杀虫毒素可能是同一种物质。此毒素对菜青虫初孵幼虫有较强的口服毒性,LD50为2.7mg/头。SDS-PAGE图谱显示此杀虫毒素是由两个亚基组成的复合蛋白。
- 张一折刘国祥刘伟张守涛王芳
- 关键词:毒素蛋白纯化杀虫活性
- piRNA:一类新的非编码小RNA被引量:6
- 2008年
- piRNA(Piwi-interacting RNA)是从哺乳动物生殖细胞中分离得到的一类长度约为30nt的小RNA,并且这种小RNA与PIWI蛋白家族成员相结合才能发挥它的调控作用。目前,越来越多的文献表明piRNA在生殖细胞的生长发育中的调控是由于Piwi-piRNA复合物引起的基因沉默导致的,但由于对piRNA的研究尚处于初级阶段,它的一些具体的功能和生源论尚在研究当中。综述了piRNA的最新研究进展。
- 黄雪梅张守涛王芳刘伟张一折
- 关键词:PIRNA非编码小RNA生殖细胞发育
- 玉米花粉总RNA提取方法的比较和分析被引量:14
- 2009年
- 以玉米花粉为材料,借鉴其他植物RNA的提取方法,比较了利用Trizol法、酸性酚—异硫氰酸胍法和CTAB改进法提取玉米花粉RNA的效果,利用普通琼脂糖凝胶代替甲醛变性胶电泳分析3种不同方法所提取的RNA的完整性,并用紫外分光光度计分析RNA的纯度。结果表明,CTAB改进法为其中最好的方法。
- 黄雪梅张守涛杨超王芳
- 关键词:玉米花粉总RNA
- 复合干扰素在毕赤酵母中的表达与纯化被引量:2
- 2011年
- 根据复合干扰素的氨基酸序列和毕赤酵母密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成复合干扰素DNA序列,克隆至分泌型酵母表达载体pGAPZαA,线性化后经高效电转化、Zeocin筛选鉴定及培养条件优化,获得了重组复合干扰素高表达菌株pGAP-conIFN/GS115,重组蛋白以可溶性分子的形式存在于上清液中.培养液上清经盐析、凝胶过滤和阴离子交换层析进行纯化,最后用分子筛脱盐.SDS-PAGE分析显示,纯化后的目标蛋白纯度可达到92%左右,比活性可达5.5×108U/mg.
- 张守涛王芳田庆南
- 关键词:毕赤酵母纯化