王健
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学环境科学与工程生物学更多>>
- 高效氯氰菊酯对斑马鱼胚胎毒性的研究被引量：7
- 2014年
- 高效氯氰菊酯是一种Ⅱ型拟除虫菊酯类农药,对鱼类及其它水生生物具有高毒,且在其它食物中也可检测到它的残留,高效氯氰菊酯的残留对人类的健康同样具有不容忽视的影响。为了解高效氯氰菊酯对鱼、对人类的毒性机制,选用0.05、0.1、0.2、0.6、1 mg/L五个梯度浓度的高效氯氰菊酯溶液,对斑马鱼胚胎进行毒性处理,在显微镜下观察其对斑马鱼发育形态变化和孵化率等影响。发现高效氯氰菊酯农药对斑马鱼胚胎有严重的致畸效应,这种致畸性呈现剂量依赖性。使用0.1 mol/L浓度的高效氯氰菊酯农药对斑马鱼胚胎进行处理,进行早期胚胎发育的毒性研究。采用荧光差异双向凝胶电泳(2-D DIGE)-质谱相结合的方法,鉴定出11个差异表达蛋白质。这些蛋白质与细胞骨架、应激反应和新陈代谢有关。这些研究结果为进一步研究高效氯氰菊酯对动物的毒性机制提供了基本信息。
- 王健刘丽丽余凯敏李国超吴巍闫艳春
- 关键词：斑马鱼胚胎DIGE质谱
- 斑马鱼转基因平台的建立被引量：4
- 2013年
- 建立实验室斑马鱼转基因平台,旨在为实验室斑马鱼规模化繁殖、转基因斑马鱼研究提供技术流程、生物材料和执行标准。以一对Tübingen品系斑马鱼为材料,在实验室条件下进行扩大繁殖;将广谱表达绿色荧光蛋白GFP真核载体pEGFPN3通过显微注射的手段转入斑马鱼胚胎,获得转基因斑马鱼;通过荧光显微镜观察斑马鱼GFP表达情况,并初步筛选转基因个体;以观察到GFP表达的斑马鱼为材料,利用PCR验证外源基因pEGFP-N3在宿主细胞内的整合情况。结果显示,在实验室内建立了完善的斑马鱼养殖系统,可以长期进行斑马鱼饲养、繁殖、育种等研究工作;建立了斑马鱼基础分子生物学试验体系,可以进行斑马鱼分子水平的研究工作;建立了斑马鱼转基因平台,为构建转基因斑马鱼品系、外源基因整合机制等研究奠定基础。
- 刘丽丽王健王海胜余凯敏李国超闫艳春
- 关键词：斑马鱼繁殖显微注射
- 斑马鱼在转基因动物研究中的应用被引量：1
- 2013年
- 近年来的研究表明,脊椎动物斑马鱼已发展成为一种十分重要的模式生物,在基因表达调控、发育与分化、形态发生、发病机理、药物筛选和环境检测等诸多研究领域都有重要的应用价值。在回顾模式生物应用与发展的基础上,着重概述斑马鱼作为模式生物的优越性、斑马鱼转基因技术的发展现状、转基因斑马鱼的应用领域,并提出斑马鱼转基因技术进一步发展可能面临的问题。
- 刘丽丽王健吴巍王海胜闫艳春
- 关键词：模式生物斑马鱼DANIO转基因动物
- β-氯氰菊酯对斑马鱼胚胎的发育毒性被引量：9
- 2013年
- 目的以斑马鱼胚胎为模型,探讨一种高效氯氰菊酯β-氯氰菊酯对胚胎发育的影响。方法 丙酮为助溶剂,配制β-氯氰菊酯0.05,0.1,0.15,0.2,0.6和1 mg.L-1,采用换水式每12 h更换一半β-氯氰菊酯溶液,对斑马鱼胚胎进行96 h暴露处理,采用显微镜观察β-氯氰菊酯0.05,0.1,0.15,0.2,0.6和1 mg.L-1对斑马鱼胚胎发育形态,测定受精后24 h(24 hpf)自主抽动次数、48 hpf心率及孵化率、72和96 hpf体轴弯曲个体比例等。结果 与正常对照组比较,β-氯氰菊酯0.05,0.1,0.15,0.2,0.6和1 mg.L-1组斑马鱼胚胎在24 hpf前形态上未出现明显异常,48 hpf以后表现出体轴弯曲、心包囊肿等不同程度的毒性反应症状,β-氯氰菊酯0.2 mg.L-1组幼鱼胸鳍发育即受到严重抑制且黑色素减少体色偏黄;随着β-氯氰菊酯浓度的增加,斑马鱼胚胎在24 hpf时每分钟自主抽动次数由正常对照组的(0.72±0.19)次增加至(3.83±1.07)次(P<0.05);48 hpf孵化率由对照组的(15.5±4.3)%升高至(98.9±1.2)%(P<0.05)。β-氯氰菊酯0.05 mg.L-1组72 hpf和96 hpf体轴弯曲个体比例分别为6.6%和10%,β-氯氰菊酯1 mg.L-1组分别为97.8%和100%。结论 β-氯氰菊酯对斑马鱼胚胎的神经及形态发育均有明显抑制作用,并且呈现一定的时间剂量依赖性。
- 徐永学刘丽丽王健闫艳春
- 关键词：拟除虫菊酯类斑马鱼发育障碍
