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人核受体Nurr1基因的克隆和表达及产物纯化(英文): 2004年; 核受体相关因子 1(nuclearreceptor relatedfactor 1,Nurr1)是主要表达于中脑黑质及腹侧被盖区多巴胺能神经元的一种转录因子 ,属于核受体超家族成员 ,其功能性配体尚未被确认 .研究表明 ,Nurr1对中脑多巴胺神经元的发育、存活以及成熟后功能的维持具有特殊重要意义 .如能找到它的特异性配体 ,将为最终筛选出治疗帕金森病等中枢多巴胺失调性疾病的药物或化学合成先导物打下基础 .为了获取Nurr1蛋白以标定其配体以及研究蛋白质间的相互作用 ,采用RT PCR技术 ,从人胚中脑组织特异性扩增及克隆了人Nurr1cDNA ,并获得一个在氨基端缺失 35 0bp碱基的Nurr1突变体 .将正常的Nurr1基因片段亚克隆至表达载体pET2 8a ,分别在TNTRT7偶联网织红细胞溶胞系统和大肠杆菌BL2 1(DE3)中获得表达 ,均以可溶性形式存在 ,且产自于体外转录翻译系统的真核表达Nurr1蛋白已标记上同位素3 5S .Western印迹分析表明 ,所表达的重组目的蛋白具有特异的免疫反应性 .经Ni NTA亲和层析 ,得到了初步纯化的rhNurr1蛋白 .; 赖燕来孙朝晖李鹏谢佐平; 关键词：基因克隆原核表达产物纯化

科研向教学转化与“模块式”、“探究式”教学的研究——从《细胞分子生物学技术教程》再版看“细胞生物学实验”的发展被引量：6: 2010年; 通过回顾了《细胞分子生物学技术教程》的编写发展历程,对3版＂前言＂以及全书的推敲和总结,认为＂前言＂以及教程的更新从侧面反映、体现了两个理念,即＂科研向实验教学转化是实验教学改革的方向和动力＂、＂创新人才培养为实验教学核心目标＂;在这样两个理念的背景下,《教程》以模块的方式由浅入深培养学生能力,倡导了探究式实验教学模式的不断发展和深化。; 印莉萍李鹏于荣祁晓廷盛仙永; 关键词：实验教材教学理念

人BDNF的克隆、表达及其活性检测被引量：1: 2004年; 为了研究脑源性神经营养因子在大肠杆菌中的表达及其在治疗Parkinson病中的作用,采用RT-PCR技术,从人胚脑组织扩增及克隆了BDNF全长及其成熟蛋白编码基因,经测序证实后,将其分别克隆至表达载体pcDNA3.1与pGEX6p-1,构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-BDNF和重组原核表达载体pGEX6p-BDNFs。pcDNA3.1-BDNF经脂质体介导转染至体外培养的E16胚鼠中脑星形胶质细胞,以G418筛选出抗性阳性克隆,该克隆株与E12-E14胚鼠中脑神经干细胞体外共培养,酪氨酸羟化酶免疫细胞化学反应显示,转染细胞株所表达的BDNF蛋白具有生物学活性,可延长前体细胞的存活并促进其向多巴肢神经元分化。将pGEX6p-BDNFs转化大肠杆菌,以IPTG诱导,获得了相对分子质量约为40 kD的GST-BDNF融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的10％,并经免疫印迹证实具有特异的免疫反应性。; 左皓谢佐平孙朝晖李鹏赖燕来; 关键词：脑源性神经营养因子星形胶质细胞多巴胺神经元克隆

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李鹏