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嗜水气单胞菌非编码RNA的功能研究
2025年
为了探究原核生物嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)中非编码RNA(sRNA)的功能,以嗜水气单胞菌A.hydrophila ATCC 7966菌株为实验材料,采用转录组测序技术进行转录组学分析,预测得到非编码RNA,构建了sRNA基因缺失突变体(△sRNA),并对△sRNA的生理特性和致病性进行测定.结果显示:△sRNA菌株与野生型菌株的生长状况、运动能力和溶血现象基本一致,且在高渗环境下2种菌株受到的抑制程度相同;同野生型菌株相比,△sRNA菌株的生物被膜形成能力与蛋白酶活性均显著降低(P<0.01),且△sRNA菌株对青霉素和红霉素的敏感度增强;sRNA基因的缺失导致A.hydrophila的致病性降低.
王嘉璐蔡彤璇陈甜梦李娜刘瑶瑶赵宝华刘东
关键词:嗜水气单胞菌转录组测序非编码RNA基因敲除
嗜水气单胞菌纳米PCR检测方法的建立
2025年
为了快速检测水生动物的嗜水气单胞菌(A.hydrophila)感染,本试验根据嗜水气单胞菌溶血素hlyA基因序列设计引物,通过对退火温度和引物体积的优化,建立了嗜水气单胞菌的纳米聚合酶链式反应(Nano-PCR)检测方法,分析其敏感性、特异性和临床样本检测结果,并与普通聚合酶链式反应(PCR)方法进行比较。结果显示,优化建立的纳米PCR方法成功扩增出约280 bp的嗜水气单胞菌特异性条带;最小检测浓度为1.61 pg,敏感性是普通PCR(最小检测浓度为16.1 pg)的10倍;纳米PCR和普通PCR方法对创伤弧菌(V.vulnificus)、迟缓爱德华菌(E.tarda)和维氏气单胞菌(A.veronii)均无扩增;对18份病料的阳性检出率为72%,与普通PCR结果一致。结果表明,本试验建立的检测嗜水气单胞菌的纳米PCR方法较普通PCR方法具有更高的敏感性和特异性,为水生动物嗜水气单胞菌感染的鉴别诊断和防治提供了技术支持。
韩雅静赵奇石有权安瑞赵云萍史秋梅吴同垒高桂生
关键词:嗜水气单胞菌
不同16S rRNA引物在溺死组织气单胞菌检测中的性能评估
2025年
目的 分析16S rRNA V3区引物、V4区引物和V3-V4区引物检测溺死组织中气单胞菌的差异。方法 采用PCR-扩增子测序方法,评估3种16S rRNA引物在5例溺死者的11个脏器中检测细菌DNA的能力,特别是气单胞菌DNA的检测效果。结果 相比于其他2个引物,V3引物在检测细菌分类操作单元(Operational Taxonomic Unit, OTU)方面更具优势,检测到的细菌OTU数量更多。测序结果分析表明,V3引物能够检测更丰富的细菌门(Phylum)和科(Family),以及更多的气单胞菌。结论 16S rRNA V3引物在检测溺死脏器中的气单胞菌可能更具优势,对溺死诊断具有潜在应用价值。
宁浩冉代昌海种法国王建鑫王雅萱胡洋洋王业全张磊磊张磊磊
关键词:溺死气单胞菌
鲤源豚鼠气单胞菌的分离鉴定与药敏特性研究
2025年
为明确重庆市万州区某养殖场鲤苗种死亡的病因,为该病的防治提供参考,通过细菌分离纯化、生理生化试验、16S rDNA和cpn60基因检测、系统进化分析、动物回归感染试验对病原进行鉴定,并采用纸片扩散法检测分离株的药敏特性。结果显示,从患病鲤苗种的肝脏、肾脏和脾脏中分离获得1株优势菌(WZ2302),革兰氏染色阴性,菌体两端钝圆,整体呈杆状;菌落表面光滑、颜色为浅黄色半透明;有运动性,氧化酶、精氨酸双水解酶、过氧化氢酶、吲哚试验呈阳性,能发酵葡萄糖(产酸不产气)、蔗糖、七叶苷、阿拉伯糖、甘露醇、水杨苷;16S rDNA和cpn60基因序列与豚鼠气单胞菌同源性最高,分别为99%和98%;回归试验攻毒组与临床病例表现相似。药敏试验结果显示,该菌对恩诺沙星、氟苯尼考、氧氟沙星等13种药物敏感;对环丙沙星、链霉素和麦迪霉素敏感性较差,对青霉素、头孢噻吩、氨苄西林和头孢哌酮存在耐药性。综上,引起重庆市万州区某养殖场鲤鱼苗种死亡的病原菌是豚鼠气单胞菌,可选用恩诺沙星或氟苯尼考进行防治。
张超吕军
关键词:豚鼠气单胞菌药敏试验
一株新种气单胞菌噬菌体phiA050的生物学特性和全基因组分析
2025年
目的:分离气单胞菌噬菌体并研究其特性,为气单胞菌的噬菌体防治提供理论基础。方法:以嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)A050为宿主菌筛选噬菌体,利用双层平板法研究噬菌体一步生长曲线、最佳感染复数和稳定性等生物学特征;通过电镜观察噬菌体形态;利用Illumina Hiseq平台进行噬菌体基因组测序,利用在线工具Blastn、CGView、VipTree、VIRIDIC和Mauve软件进行生信分析。结果:分离得到一株新种噬菌体phiA050,其噬菌斑透明、无晕圈,直径为(0.10±0.02)cm;电镜观察显示,phiA050头部为正廿面体,直径为(70.8±2.7)nm,尾长为(71.3±3.7)nm;宿主谱检测结果显示,phiA050可裂解68株气单胞菌中的19株;phiA050对宿主气单胞菌A050的最佳感染复数为0.001,一步生长曲线显示其潜伏期为30 min,裂解量为158 PFU/cell;phiA050耐受的pH范围在4~10之间,耐受温度可达50℃(1 h),60℃时只有少量存活;phiA050基因组全长53322 bp,GC含量为44.75%,注释出61个开放阅读框(open reading frame,ORFs);Blastn序列比对发现,phiA050与最近源的欧文氏菌噬菌体Faunus总相似度仅为36.30%,根据国际病毒分类委员会(International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)最新的病毒分类标准,噬菌体phiA050应归于新属新种。结论:分离得到一株新种噬菌体phiA050,该噬菌体与现有数据库中噬菌体相似性低,具有独特的研究价值和应用前景。
刘虹彤陈躬浩涂传灯江兴龙蔡鸿娇郑江房文红翁齐彪林茂
关键词:气单胞菌噬菌体生物学特性全基因组
一株高致病性棘胸蛙源嗜水气单胞菌的全基因组测序及其感染后脾的超微病理损伤
2025年
【目的】了解棘胸蛙源嗜水气单胞菌SZW-003菌株的全基因组学特征,明确感染后棘胸蛙脾脏的超微病理损伤,为嗜水气单胞菌的病原学研究及病害防控提供基础资料。【方法】提取SZW-003菌株全基因组DNA构建文库后测序,组装后进行注释分析,结合动态超微病理观察感染后棘胸蛙脾脏的损伤。【结果】SZW-003菌株具备β溶血特性,全基因组总长度为4925442 bp,GC含量为60.64%,编码基因数量为4473个,预测有388个毒力基因。感染后棘胸蛙脾内网状细胞最早发生损伤,也是最早发现吞噬有病原菌的细胞类型;在感染胁迫下,网状细胞大量脱落转化为巨噬细胞和黑色素巨噬细胞;随着病程发展,网状细胞肿胀裂解,脾窦内皮细胞大量坏死,细胞碎片与异形红细胞分布其中,残存的巨噬细胞内可见病原菌。【结论】SZW-003菌株是一株强毒力的嗜水气单胞菌,感染后可导致脾组织结构裂解,细胞成分坏死,引起网状细胞向巨噬细胞与黑色素巨噬细胞转化,造成严重的损伤。
任思宇吴春艳刘震坤杨延辉李新善
关键词:棘胸蛙嗜水气单胞菌全基因组
Cloning and Bioinformatics Analysis of hcp Gene in Aeromonas hydrophila
2024年
[Objectives]To explore the function of hcp gene in Aeromonas hydrophila.[Methods]A pair of specific primers was designed referring to the hcp gene sequence of A.hydrophila.The hcp gene was amplified by PCR,and performed bioinformatics analysis.[Results]The hcp gene had a total length of 1650 bp and encoded 549 amino acids.The theoretical molecular weight of the protein predicted was about 59476.44 kDa.After predicting the N-terminal signal peptide structure of the amino acid sequence,neither obvious signal peptide cleavage site nor signal peptide was found,and the protein had no transmembrane region.The amino acid sequence had a N-glycosylation site,4 protein kinase C phosphorylation sites,7 casein kinase II phosphorylation sites,9 N-myristoylation sites,4 isoprene binding sites,10 microbody C-terminal target signal sites,and an ATP/GTP binding site motif A(P-ring).The amino acid sequence of hcp gene of A.hydrophila was performed homology analysis with other Aeromonas strains,and it showed higher homology with A.veronii.In the secondary structure,theα-helix,β-sheet,random coil and extended strand accounted for 45.36%,6.01%,37.52%and 11.11%,respectively.The tertiary structure model consisted of 18α-helix and 22β-sheet.Analysis of protein-protein network interaction demonstrated that the proteins interacting with Hcp protein were AHA_3407,nrfA,nirB-1,nirB-2 and AHA_1112.[Conclusions]Through the bioinformatics prediction results,the basic information of hcp gene of A.hydrophila is preliminarily understood,and the possible function of this protein is predicted,in order to provide guidance for subsequent vaccine research.
Fan LIXingjun FUHaiyun FENGShi WANGWeijie ZHANGHuanying PANGNa WANG
关键词:AEROMONASHYDROPHILAGENEHCPGENEBIOINFORMATICS
一起混合性气单胞菌引起食源性疾病暴发的病原学检测
2024年
目的探究引起细菌性食源性疾病暴发的病原学原因,了解气单胞菌污染食品引起聚集性事件的特征,为类似事件的调查处置提供参考。方法采集本起疫情患者肛拭子、食品留样、食品加工工具涂抹样,参照《食品卫生微生物学检验》《全国临床检验操作规程》(第四版)进行检验。结果在小黄鱼食物留样和两名患者肛拭子中,检出温和气单胞菌。在一份厨房用具涂抹液和其中一名患者肛拭子中,检出嗜水气单孢菌。结论这是一起罕见的混合性气单胞菌引起的食源性疾病暴发事件,提示我们在肠道感染性腹泻的诊治过程中,除了考虑常见肠道致病菌外,气单胞菌等罕见致病菌也不容忽视,以免给临床诊断和治疗带来困扰。
帅小博陈彬余雯韩颖颖季霄雷
关键词:豚鼠气单胞菌温和气单胞菌Β-内酰胺酶感染性腹泻
海洋菌株Aeromonas sp.YS-54来源几丁质酶的制备与性质研究
2024年
为实现甲壳类原料的高效降解与N-乙酰氨基寡糖的绿色制备,本研究以青岛近海土壤中筛选的菌株YS-54为材料,使用60%硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤层析制备几丁质酶;对几丁质酶的最适温度、最适pH、底物偏好性等性质进行表征;使用质谱技术确认了酶解产物的聚合度。结果表明,菌株YS-54为Aeromonas属,该菌株来源几丁质酶比活力为23.44 U/mg,分子量为63与75 kDa。几丁质酶在40℃和pH为5.0条件下具有良好的稳定性,Ba^(2+)、Co^(2+)、Mg^(2+)与TritonX-100显著促进了几丁质酶活力(P<0.05),而Fe^(3+)、Cu^(2+)、SDS对酶活力起抑制作用。几丁质酶对α-几丁质的比活力为7.99 U/mg,为水解胶体几丁质比活力的34.09%。几丁质酶对胶体几丁质与α-几丁质的酶解产物聚合度分别为1~4与1~3。Aeromonas sp.YS-54来源几丁质酶在较宽的温度与pH范围内保持稳定,同时对α-几丁质具有良好的水解能力,可为甲壳类废弃物的高效综合利用提供技术支持。
陈苏南冷凯良闫鸣艳李银平于源
关键词:几丁质酶酶学性质
Antimicrobial Resistance of Aeromonas spp.and Vibrio spp.Isolated from Fresh Pangasius Fish in Cambodia
2024年
The study was conducted to identify Aeromonas spp.and Vibrio spp.from fresh Pangasius fish(n=153)in Cambodia and test their antimicrobial susceptibility to antibiotics.The samples were collected from different wet markets of Phnom Penh city and Kampong Thom,and Siem Reap provinces.The bacteria were isolated by using selective medium and their AMR(Antimicrobial Resistance)profile was tested by API 20E technique,respectively.Susceptibility profile was determined for seven antibiotics commonly used.The Vibrio spp.(34.64%,n=53)was found to be higher than Aeromonas spp.(24.83%,n=38).Four Vibrio and four Aeromonas species were identified where V.parahaemolyticus(57%,n=30)was the highest,followed by V.cholerae(38%,n=20),V.fluvialis(3.8%,n=2)and V.aglinolyticus(1.9%,n=1),whereas A.hydrophila(47%,n=18)was the highest,followed by A.hydrophila/caviae(45%,n=17),A.sobria(5%,n=2),A.caviae(2.6%,n=1).All the species presented high multi-resistance to the tested antibiotics.The antibiotic susceptibility profile to ampicillin(74%-100%),ciprofloxacin(7%-100%),sulfamethoxazole/trimethoprim(14%-100%),florfenicol(14%-100%),oxytetracycline(7%-100%),erythromycin(10%-100%)and colistin sulphate(33%-100%)was revealed resistance level in Aeromonas spp.whereas few species of Vibrio spp.resistant to ampicillin(43%-100%),ciprofloxacin(14%-100%),sulfamethoxazole/trimethoprim(14%-100%),florfenicol(14%-100%),oxytetracycline(20%-100%),erythromycin(29%-100%),colistin sulphate(33%-100%)were also identified.The results revealed these Aeromonas spp.and Vibrio spp.are potentially reservoirs of antibiotic resistance genes.MDR(Multidrug Resistance)was widespread among the samples isolated.That is a high-risk source of contamination since those pathogens and antimicrobials are often used.Our findings highlight that the aquatic environment and fresh Pangasius fish act as reservoirs of AMR Aeromonas spp.and Vibrio spp.which underline the need for a judicious use of antimicrobials and timely surveillance of AMR in aquaculture.Overall,the findings of our stud
Duk SeyhaChrun RithyNguon SamnangSudsai TrevanichNora Navarro-GonzalezSégolène CalvezChea RortanaVenn Vutey
关键词:MDRAMR

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杨先乐
作品数:624被引量:2,672H指数:27
供职机构:上海海洋大学
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艾晓辉
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