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高产G418的棘孢小单孢菌: 本发明提出一株高产G418的棘孢小单孢菌，具体地，本发明提出了两种微生物，其分别为棘孢小单孢菌YC101‑2Micromonospora echinospora YC101‑2，于2023年7月14日保藏于中国典型培养物...; 常莹莹

G418发酵液的精制纯化工艺: 本发明提供一种G418发酵液的精制纯化工艺，用草酸调节G418发酵液pH至2.0‑3.0，然后加入助滤剂，充分搅拌，再经板框过滤、得到G418溶液；然后将G418溶液依次经陶瓷膜过滤、阳离子交换树脂吸附、阴离子交换树脂脱...; 任兆龙王福聚李婷婷; 文献传递

外套（G418）: 1.本外观设计产品的名称：外套（G418）。;2.本外观设计产品的用途：用于日常穿着。;3.本外观设计产品的设计要点：在于形状与图案的结合。;4.最能表明设计要点的图片或照片：立体图。;5.无设计要点，省略左视图、右视图...; 杨旎可

G418发酵液的精制纯化工艺: 本发明提供一种G418发酵液的精制纯化工艺，用草酸调节G418发酵液pH至2.0‑3.0，然后加入助滤剂，充分搅拌，再经板框过滤、得到G418溶液；然后将G418溶液依次经陶瓷膜过滤、阳离子交换树脂吸附、阴离子交换树脂脱...; 任兆龙王福聚李婷婷; 文献传递

一种G418在少孢节丛孢菌中遗传转化筛选体系的建立方法: 本发明公开了在少孢节丛孢菌中建立了一种新的遗传转化筛选体系，将有利于该真菌遗传转化体系的多层次应用。该方法包括如下步骤：首先将G418编码的对应氨基酸序列根据少孢节丛孢菌密码子偏好性进行密码子优化；将优化后的DNA序列在...; 王永中彭慧盛康亮汪静敏孔小卫; 文献传递

重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立被引量：1: 2020年; 目的建立定量检测重组蛋白中G418残留量的超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)-蒸发光散射检测(evaporative light scattering detection,ELSD)法,并进行验证。方法G418经UPLC洗脱后,通过蒸发光散射检测器检测,首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶,然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发,余下不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中进行检测,通过标准曲线计算质控品中G418浓度。对建立的方法进行专属性、重复性、中间精密度、定量限、耐用性、线性验证。结果G418浓度在0.01~0.20 mg/mL范围内,标准曲线的线性较好,R2>0.99,定量限为0.01 mg/mL;质控品的加样回收率在80%~120%之间;中间精密度试验回收率的RSD为3.44%;定量限试验回收率的RSD为5.38%;耐用性试验回收率的RSD为4.56%。结论UPLC-ELSD法精密度良好,可用于重组蛋白研发及生产过程中G418残留的监测。; 张旭凡王辉王志明魏敬双; 关键词：重组蛋白 G418 残留量

G418和氨苄青霉素对海水小球藻生长及光化学活性的影响: 2020年; 采用不同质量浓度的2种抗生素---G418硫酸盐(简称G418,试验浓度为0、40、80、160、240、320μg/mL)和氨苄青霉素(试验浓度为0、200、400、800、1 200、1 600μg/mL)对海水小球藻(Chlorella sp.)进行无菌化处理,研究抗生素种类及其质量浓度对海水小球藻细胞密度、叶绿素含量及光化学活性的影响,以确定对海水小球藻细胞无害并能抑制伴杂菌生长的抗生素种类及使用浓度。结果显示,不同质量浓度的G418均能显著抑制小球藻的生长,破坏其潜在光合活性(Fv/F0),降低光合系统II(PSⅡ)的最大量子产量(Fv/Fm),阻碍其相对电子传递速率(ETR),降低光化学淬灭(q P),抑制作用随G418质量浓度的增加而增强;而氨苄青霉素对海水小球藻的影响则呈现低质量浓度促进、高质量浓度抑制的特征,具体表现为低质量浓度氨苄青霉素(≤800μg/mL)能够促进海水小球藻的生长,增强其潜在光合活性(Fv/F0),提高其光合系统Ⅱ的最大光化学量子产量(Fv/Fm),促进其相对电子传递速率(ETR)并且增强光化学淬灭(q P)的能力,高质量浓度氨苄青霉素(1200μg/mL)对海水小球藻的生长、叶绿素含量以及荧光参数等指标则呈现抑制作用。研究结果表明,G418不适用于海水小球藻的无菌培养,可选择添加质量浓度不高于800μg/mL的氨苄青霉素对海水小球藻进行抑菌处理,建议添加的质量浓度为200μg/mL。; 王祎哲范耘硕史雅梅高金伟周文礼贾旭颖; 关键词：海水小球藻 G418 氨苄青霉素细胞密度

绵羊皮肤成纤维细胞对G418及Blasticidin S抗性的研究被引量：1: 2019年; 抗生素常被用于对转基因动物、植物及微生物细胞进行筛选。在进行抗生素抗性筛选前,需要摸索合适的抗生素使用浓度,其原因在于:过低的筛选浓度无法抑制非转基因细胞的生长;反之,过高的筛选浓度会导致转基因细胞死亡。为了摸索绵羊皮肤成纤维细胞(sheep skin fibroblasts, SSFs)对G418及Blasticidin S的抗性,本实验以体外培养的SSFs为实验材料,采用不同浓度的上述两种抗生素处理SSFs,采用活细胞计数的方式检测SSFs对上述两种抗生素的抗性。单独使用G418或Blasticidin S导致SSFs全部死亡的最低致死浓度分别为200μg/mL及4μg/mL;当两种抗生素联合使用时,其最低致死浓度为100μg/mL G418+3μg/mL Blasticidin S或150μg/mL G418+2μg/mL Blasticidin S。该实验为采用这两种抗生素筛选转基因SSFs提供了理论基础。; 吴宪荆乾鸽王凤梅贺小英马利兵; 关键词：皮肤成纤维细胞 G418 绵羊

一种具有G418抗性筛选标记的慢病毒RNA干扰表达载体的构建及应用: 2019年; 目的:构建具有新霉素抗性筛选标记的RNA干扰慢病毒表达载体,并检测它对乙型肝炎病毒x基因(HBx)mRNA表达的抑制作用。方法:从pcDNA3.0载体中扩增新霉素抗性基因并插入删除嘌呤霉素编码序列的pLKO载体中;将改构的RNA干扰载体包装成慢病毒后感染肝癌细胞HepG2,并检测感染细胞对G418的抵抗作用;为验证改构RNA干扰载体的有效性,设计了2条针对HBx的RNA干扰序列以及针对编码萤光素酶cDNA的干扰序列并插入该载体,将含新霉素筛选标记的HBx的RNA干扰载体与辅助质粒在293T细胞中包装成慢病毒并感染过表达HBx的HepG2(嘌呤霉素抗性)细胞,运用G418筛选出稳定混合克隆,提取细胞总RNA,运用RT-qPCR检测其在HepG2细胞中对HBx RNA表达的抑制作用。结果:构建的载体与辅助质粒包装出的慢病毒感染肝癌细胞后,细胞获得G418抗性;HBx RNA干扰序列克隆入该载体可有效抑制肝癌细胞中过量表达的HBx mRNA。结论:构建了具有新霉素抗性筛选标记的RNA干扰慢病毒表达载体,运用该载体可有效筛选出抑制目的基因表达的G418抗性的稳定细胞株。; 赵思捷朱文琦孙杰侯俊王友亮李永利李波鲍春梅张浩李伯安; 关键词：慢病毒载体 RNA干扰乙型肝炎病毒X基因

联合G418筛选构建GFP转基因骨髓基质干细胞系的实验研究: 2018年; 目的联合G418筛选构建绿色荧光蛋白(GFP)转基因SD大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)系,用于骨髓基质干细胞体外培养及向内耳神经细胞诱导分化的进一步研究。方法制备大鼠骨髓基质干细胞,选用脂质体Lipofectamine^(TM)2000转染方法将含有pcDNA3.1-GFP的重组质粒转染至大鼠骨髓基质干细胞中,荧光显微镜检测GFP蛋白表达,通过G418筛选法建立稳定、含pcDNA3.1-GFP的单克隆骨髓基质干细胞系。结果 500μg/mL的G418压力筛选后,获得了具有G418抗性的绿色荧光蛋白(GFP)转基因SD大鼠骨髓基质干细胞系。结论成功地培育了G418抗性的GFP转基因大鼠骨髓基质干细胞系,为进行下一步体外特异微环境下的诱导分化提供实验基础。; 王亮亮孙婧刘强和邓铭彭文丽; 关键词：G418 绿色荧光蛋白骨髓基质干细胞

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