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国家自然科学基金(30871193)

作品数：13 被引量：85H指数：4
相关作者：许化溪王胜军仝佳苏兆亮陈建国更多>>
相关机构：江苏大学镇江出入境检验检疫局河南省中医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇免疫
  • 2篇蛋白
  • 2篇性疾病
  • 2篇实时定量PC...
  • 2篇自身免疫
  • 2篇自身免疫性
  • 2篇自身免疫性疾...
  • 2篇外周
  • 2篇外周血
  • 2篇免疫性
  • 2篇免疫性疾病
  • 2篇关节炎
  • 2篇分子
  • 2篇GITR
  • 2篇IL-17
  • 2篇IL-25
  • 2篇RORΓT
  • 1篇单个核细胞
  • 1篇蛋白表达

机构

  • 11篇江苏大学
  • 1篇河南省中医院
  • 1篇江苏大学附属...
  • 1篇镇江市第一人...
  • 1篇江苏大学附属...
  • 1篇镇江出入境检...

作者

  • 10篇王胜军
  • 10篇许化溪
  • 5篇仝佳
  • 4篇苏兆亮
  • 4篇陈建国
  • 3篇王楷文
  • 3篇邵启祥
  • 3篇郑东
  • 3篇杨恒
  • 3篇何志强
  • 3篇薛渊
  • 2篇石燕
  • 2篇杨先知
  • 2篇马洁
  • 2篇田洁
  • 2篇周成林
  • 2篇李雅贞
  • 2篇柳迎昭
  • 2篇赵银霞
  • 2篇崔大伟

传媒

  • 2篇中华肿瘤杂志
  • 2篇国际免疫学杂...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇临床检验杂志
  • 1篇生命的化学
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中华风湿病学...
  • 1篇江苏大学学报...
  • 1篇Cellul...
  • 1篇World ...

年份

  • 2篇2011
  • 6篇2010
  • 5篇2009
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
Toll样受体8在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达及其激动剂对HeLa细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
2011年
目的观察Toll样受体8（TLR8）在人宫颈癌细胞株HeLa中的表达，探讨TLR8激动剂CL075对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法，检测13种肿瘤细胞系中TLR8mRNA和经CL075作用后HeLa细胞中环氧化酶2（COX-2）、Bcl-2和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平；采用免疫荧光技术对HeLa细胞中TLR8蛋白的表达进行定位观察；采用流式细胞术检测不同浓度CL075作用下HeLa细胞的细胞周期和凋亡的变化；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测HeLa细胞的增殖状态。结果与其他肿瘤细胞株相比，HeLa细胞中TLR8mRNA的表达水平最高，达703．7±20．6。TLR8蛋白主要定位于HeLa细胞的胞浆中。0．1、0．5和1．0μg／ml的CL075分别作用于HeLa细胞48h后，G2／M＋s期细胞所占的比例逐渐增高，其中1．0μg／mlCL075作用组G2／M＋S期细胞所占的比例最高，达（57．67±1．73）％，明显高于空白对照组[（39．02±2．33）％，P〈0．01]。经不同浓度的CL075处理后，HeLa细胞的凋亡水平与空白对照组相比，无明显改变（P〉0．05）；但经顺铂处理后，凋亡细胞明显增多（P〈0．01）。MTT法检测结果显示，与空白对照组比较，CL075作用于HeLa细胞48和72h后，HeLa细胞的增殖能力明显增强（P〈0．01）。CIA）75作用于宫颈癌HeLa细胞24和48h后，COX-2、Bcl-2和VEGF mRNA的表达水平明显升高（P〈0．05）。结论宫颈癌HeLa细胞中TLR8的表达水平及其与配体相互作用的信号，可能是肿瘤发生和发展的重要因素之一。TLR8可能是宫颈癌治疗的一个潜在靶点。
杨恒何志强赵银霞王楷文郑东苏兆亮仝佳马洁王胜军许化溪
关键词：宫颈肿瘤HELA细胞细胞增殖细胞凋亡
Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型IL-25表达水平的变化及意义被引量：9
2010年
目的以Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎模型为研究对象,动态观察其IL-25的表达水平,探讨IL-25与关节炎发生发展的关系及其可能的机制,为寻找新的类风湿性关节炎免疫干预新途径积累实验数据。方法采用RT-PCR法扩增目的基因,构建mIL-25标准质粒,QRT-PCR检测模型鼠脾脏及其关节病变局部IL-25的表达水平;应用ELISA技术检测模型鼠血清和脾细胞培养上清IL-25蛋白的含量。结果在Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎的发病过程中,模型鼠脾细胞和关节滑膜组织IL-25的mRNA表达水平、均呈持续上升趋势,与对照小鼠相比差异显著(P<0.05)。这种IL-25蛋白和转录水平的表达,随着关节炎症程度的增加而升高。此外,模型鼠脾细胞对ConA的刺激表现出强IL-25表达性应答。结论 IL-25的表达水平与Ⅱ型胶原诱导的关节炎的发生发展密切相关。
王楷文周成林王胜军赵银霞杨恒郑东薛渊Sandoghchian Siamak仝佳苏兆亮邵启祥许化溪
关键词：IL-25自身免疫性疾病
IL-25与免疫相关疾病关系的研究进展被引量：4
2010年
IL-25又称为IL-17E，是细胞因子IL-17家族的成员之一，主要由活化的Th细胞和肥大细胞所分泌。与其他家族成员不同，IL-25能够诱导Th2型细胞因子如IL-4、IL-5和IL-13的产生，介导Th2类免疫应答，还能够影响Th17细胞的分化并调节自身免疫性疾病的发生发展。总之，IL-25在多种免疫性疾病的发生发展中都发挥着重要的作用。
王楷文许化溪
关键词：IL-25IL-17TH2细胞超敏反应自身免疫性疾病
Toll-like receptors are potential therapeutic targets in rheumatoid arthritis被引量：4
2011年
Toll-like receptors (TLRs) are found on the membranes of pattern recognition receptors and not only play important roles in activating immune responses but are also involved in the pathogenesis of inflammatory disease, injury and cancer. Furthermore, TLRs are also able to recognize endogenous alarmins released by damaged tissue and necrosis and/or apoptotic cells and are present in numerous autoimmune diseases. Therefore, the release of endogenous TLR ligands plays an important role in initiating and driving inflammatory diseases. Increasing data suggest a role for TLR signaling in rheumatoid arthritis, which is an autoimmune disease. Although their involvement is not comprehensively understood, the TLRs signaling transducers may provide potential therapeutic targets.
Siamak Sandoghchian Shotorbani
关键词：AUTOIMMUNEINNATERECEPTORSRHEUMATOIDARTHRITISTOLL-LIKERECEPTORS
Graves病患者外周血单个核细胞GITR mRNA表达水平的变化和意义被引量：3
2009年
目的探讨Graves病(GD)患者糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)mRNA表达水平的变化及意义。方法用实时荧光定量PCR法检测22例GD未治疗组、23例GD临床缓解组及18例健康对照组外周血单个核细胞(PBMC)GITR mR-NA相对表达水平;用化学发光法测定各组血浆中甲状腺激素水平,并评价GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平与甲状腺激素水平的相关性。结果GD未治疗组GITR mRNA相对表达水平明显低于临床缓解组和健康对照组(χ2=18.48,P<0.01;χ2=18.26,P<0.01),而GD临床缓解组与健康对照组差异无统计学意义(χ2=0.12,P>0.05)。GD未治疗组GITRmRNA相对表达水平与FT3、FT4水平均呈负相关(r=-0.509、r=-0.483,P均<0.05),而与TSH呈正相关(r=0.458,P<0.05)。结论GD的发生可能与GD患者体内GITR基因表达下调有关。
王海生王胜军崔大伟陈建国柳迎昭杨先知史烨仝佳许化溪
关键词：GRAVES病实时定量PCR
类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγ／t和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义被引量：3
2010年
目的检测类风湿关节炎（RA）患者外周血高迁移率族蛋白1（HMGB1）及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平，同时分析其与C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）和类风湿因子（RF）的关系，初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系。方法收集80例RA患者外周血标本，其中静止期32例、活动期48例，健康志愿者50名。采用实时荧光定量聚合酶链反应（QRT—PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）中HMGB1、RORγt和白细胞介素（IL）-17的mRNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度，采用单因素方差分析和Spearillan相关分析进行统计学处理。结果RA患者PBMC中HMGB1、RORγt和IL一17mRNA的表达水平均高于健康对照组（P〈0．05），且活动期[HMGB1（0．424±0．262）pg／ml，RORγt（0．34±0．25）pg／ml，IL-17（1．42±0．38）pg／ml]明显高于静止期（R0．01）。血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果，RA组明显高于健康对照组（P〈0．05），且与CRP、ESR、RF呈正相关（P〈0．05）。结论检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平，有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用，也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路。
石燕王胜军陈建国薛渊何志强周成林郑东杨恒李雅贞仝佳苏兆亮邵启祥许化溪
关键词：白细胞介素17
小鼠GITRL融合蛋白的表达、纯化及免疫原性的研究被引量：2
2009年
目的:构建含小鼠GITRL基因原核表达载体,经转化E.coli以表达GITRL融合蛋白,纯化蛋白并制备相应的抗血清。方法:将GITRL-pMD18-T重组质粒经EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收目的基因,与原核表达载体PET32a连接,应用电转法转化BL21(DE3)菌。阳性克隆经鉴定后用IPTG诱导GITRL蛋白表达,经Ni+-NTA层析柱纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE、West-ernblot进行特异性鉴定,CD4+CD25+T细胞免疫抑制试验验证其生物学功能。采用弗氏完全佐剂常规免疫方案,制备抗GITRL抗血清,抗血清的效价和特异性测定采用双向琼脂免疫扩散法。结果:经酶切鉴定和测序分析证实原核表达质粒构建正确,SDS-PAGE和Westernblot结果显示,在40kD处呈现单一蛋白条带,该蛋白具有阻断CD4+CD25+T细胞免疫抑制功能的作用,双向免疫扩散结果显示兔抗小鼠GITRL抗血清效价为1∶16。结论:成功构建GITRL原核表达质粒,制备和纯化的GITRL融合蛋白具有较好的纯度和生物学功能,制备并获得特异性抗血清,可用于GITRL融合蛋白生物学活性的进一步研究。
马洁王胜军毛朝明杨敏王锁英许小朋邱谷风胡正军姜旭淦邵启祥丁庆许化溪
关键词：蛋白表达融合蛋白小鼠
胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子与相关细胞因子的检测及临床意义被引量：24
2010年
目的了解胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的转录因子及其相关细胞因子的表达水平，探讨其在胃癌发展进程中的作用。方法收集57例胃癌患者、31例胃部良性疾病患者和40例健康志愿者的外周血，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术，检测外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞的特异性转录冈子RORγt和FoxP3mRNA的表达水平；采用酶联免疫吸附试验（ELISA），检测胃癌患者血浆中IL一17、IL-23、转化生长因子β（TGF一β）和IL一10的浓度。结果胃癌组FoxP3和RORγt／tmRNA的表达水平分别为2．349±0．491和0．794±0．304，明显高于健康对照组和良性疾病组（均P〈0．05），FoxP3／RORγt比值也高于健康对照组和良性疾病组（P〈0．05），而良性疾病组与健康射照组差异无统计学意义（P〉0．05）。中晚期胃癌组的FoxP3／RORγ／t比值明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。胃癌组血浆中IL一17、IL一23、TGF一β和IL一10的水平明显高于健康对照组（P〈0．05），中晚期胃癌组TGF一β和IL一10水平明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。结论胃癌患者存在高Th17和Treg细胞水平，且随着病程的进展Treg细胞仍维持强势，FoxP3／RORγt比值明显增高。监测胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子和相关细胞因子水平，有助于对病程的判断。
彭素芳王胜军陈建国戴晓莉石燕李雅贞苏兆亮薛渊何志强黄新祥许化溪
关键词：RORΓTFOXP3TREG细胞
人RORγtm RNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2
2009年
目的:建立检测人RORγt(retinoid-related orphan receptor gammat)mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:根据人RORγt mRNA的保守序列设计特异性引物,提取经PMA和离子霉素刺激的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,并逆转录成cDNA,与pMD-18T载体连接构建质粒标准品。采用qRT-PCR方法检测RORγt mRNA水平,并评价该方法的线性、特异性及重复性。应用该方法检测Graves病(Graves′disease,GD)患者外周血中RORγt mRNA的相对表达。结果:该方法标准曲线的相关系数为0.998,融解曲线分析显示单个峰,pMD18T-RORγt质粒标准品高、低拷贝数的批内、批间变异系数分别为6.5%,8.4%和9.6%,11.2%。初步研究表明GD患者组RORγt mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(t=-3.72,P<0.01)。结论:建立的检测人RORγt mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法灵敏、特异且重复性好,为临床应用提供了实验基础。
王海生王胜军崔大伟陈建国柳迎昭杨先知史烨田洁仝佳许化溪
关键词：RORΓT实时定量PCRSYBR
GITRL的分子结构被引量：3
2009年
糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand,GITRL)是TNF家族新成员,与糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)结合后,提供正向的刺激信号,参与T细胞反应。与其他TNF家族成员不同的是:hGITRL胞外功能区自身聚集形成疏松的三聚体结构,而mGITRL则表现出独特的二聚体结构。在溶液中,GITRL通过寡聚化作用形成多种形式的低聚体,通过寡聚化作用可以调节低聚体的数量,优化GITRL/GITR信号的发挥。此外,GITRL还可以通过传递反向信号发挥其独特的生物学功能。
唐莉王胜军
关键词：晶体结构
全选 清除 导出
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