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国家自然科学基金(30540070): 作品数：12 被引量：27H指数：3; 相关作者：周明赵开弘汪星廖兴盛陈芳更多>>; 相关机构：华中科技大学华中农业大学中南民族大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>

鱼腥藻PCC7120核膜连接蛋白ApcE体内重组研究被引量：1: 2006年; 为了研究鱼腥藻PCC7120核-膜连接蛋白ApcE(1-240)脱辅基蛋白与藻蓝胆素的连接机制,通过体内重组方式得到色素蛋白PCB-ApcE(1-240)。吸收光谱、荧光光谱分析表明,核-膜连接蛋白ApcE(1-240)与藻蓝胆素进行了正确的体内重组。ApcE(1-240)脱辅基蛋白可与藻蓝胆素体内自催化共价连接,获得的色素蛋白溶于含有4 mol/L尿素的磷酸钾缓冲体系中,并具有最大吸收峰(λm ax=660 nm)和荧光发射峰(λm ax=668 nm)。; 贾丽莉周明苏平赵开弘; 关键词：藻胆体藻蓝胆素

藻红蓝蛋白β亚基体内重组及其色谱分析: 2008年; 藻胆蛋白是蓝藻中的捕光蛋白,其生物合成的重要一步是藻胆色素与脱辅基蛋白的连接。大多数藻胆色素的正确连接都需要结合位点专一和对色素的构象有选择性的裂合酶来催化完成,但是这方面的报道不是很多。藻红蓝蛋白由两个亚基组成,β亚基(简称β-PEC)含171个氨基酸残基及两个辅基色素藻蓝胆素(简称PCB),分别在Cys-84和Cys-155位以硫醚键共价相连。通过同源性分析获得的由编号为alr0617基因编码的蛋白为藻红蓝蛋白β亚基(β-PEC)中的Cys-84与PCB的连接的催化酶。为了研究层理鞭枝藻藻红蓝蛋白(PEC)β亚基(β-PEC)中藻蓝胆素(PCB)与脱辅基蛋白的连接机制,通过体内重组方式得到色素蛋白PCB-PecB(C155I),分析表明该色素蛋白与β-PEC的吸收光谱和荧光光谱一致。酸性尿素变性实验证明得到的色素蛋白中的藻蓝胆素PCB没有被破坏。使用胃蛋白酶对天然藻红蓝色素蛋白和重组藻红蓝色素蛋白进行相同条件的水解并得到各自的色素肽,高效液相色谱分析表明这两种色素肽相同,由此证明了编号为alr0617基因编码的蛋白质能催化PCB与PecB(C155I)正确共价偶联。; 王锋周明赵金梅赵开弘; 关键词：水解色谱分析

藻蓝蛋白裂合酶CpeS色氨酸定点诱变及体内重组功能研究: 2006年; 为了研究藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS结构与功能的关系以及色氨酸残基对于该酶功能的影响,构建了藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS的两个色氨酸突变体,分别为CpeS(W 14 I)和CpeS(W 75S)。通过体内重组检测酶活性的变化,研究色氨酸残基的突变对裂合酶催化活性的影响。重组结果显示:突变体CpeS(W 14 I)的催化活性几乎完全丧失,为野生型的8%;突变体CpeS(W 75S)的催化活性为野生型的76%。由此推测,第14位色氨酸可能是CpeS酶活性的必需氨基酸,其所处的位置可能是裂合酶CpeS的活性位点。; 张晓刚周明胡勋赵开弘; 关键词：定点诱变活性位点

鱼腥藻PCC7120基因all5292和alr0647的初步研究被引量：2: 2008年; 通过BLAST软件分别对藻胆蛋白裂合酶(biliprotein lyase)编码基因cpcS和cpcT进行同源搜索分析,在鱼腥藻(Anabaena)PCC7120中获取了同源基因all5292和alr0647。同源分析发现,这两个基因所编码氨基酸序列与其相对应的裂合酶氨基酸序列相似程度分别达到53.4%和61.4%。随后,对这两个基因进行了初步研究。结果显示:All5292和Alr0647无论单独还是共同表达均没有裂合酶催化藻蓝胆素PCB结合到藻蓝蛋白(phycocyanin)或藻红蓝蛋白(phycoerythrocyanin)β亚基上的功能。通过在不同生理条件下对鱼腥藻PCC7120的培养,还对这两个基因的调控表达进行了初步的探索。结果表明:all5292和alr0647的表达与氮源的缺乏与否有联系,在氮胁迫条件下两个基因均进行了转录而在氮源充足的情况下则没有表达。; 陈思礼王建林张娟周明; 关键词：鱼腥藻PCC7120 裂合酶

UV-C光催化纳米TiO_2对蓝藻生长影响的研究被引量：9: 2007年; 研究了UV-C光催化纳米TiO2对蓝藻生长的影响。从生理上分析了UV-C光催化纳米TiO2具有促进蓝藻中鱼腥藻7120体内活泼态氧化物O2,.OH和H2O2的产生,抑制藻体中过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和超氧歧化酶(SOD)在内的抗氧化酶活性,降低可溶性蛋白(Soluble Pr)、藻蓝蛋白(C-PC)、叶绿素a(C-Chl a)和类胡萝卜素(C-Carotenoids)含量,最终表现为藻细胞生长代谢中光合速率和呼吸速率迅速降低,细胞增殖中遗传物质核酸含量下降,并出现几乎达到100%的细胞致死率;同时,通过显微镜观察发现,受试蓝藻细胞形态结构发生了明显变化。可以看出,UV-C光催化纳米TiO2能够有效抑制蓝藻生长。; 廖兴盛汪星赵开弘周明; 关键词：纳米TIO2 鱼腥藻7120 抗氧化酶

Photocatalytic Inhibition of Cyanobacterial Growth Using Silver-doped TiO_2 under UV-C Light: 2009年; Capacity of the silver-doped TiO2 under UV-C light to restrain cyanobacterial growth was explored with Anabaena sp. PCC 7120 and Microcystis aeruginosa as test species. The survival, chlorophyll bleaching, photosynthetic activity, DNA breakages, antioxidant enzyme activities, lipid peroxidation, and cellular morphologic structure of test cyanobacteria were analyzed. The results indicate that the test cyanobacteria with UV-C photocatalysis by silver-doped TiO2 sufferd from effects of reactive oxygen species, which promote the damage of the cell wall and the peroxidation of cell membranes, and subsequently, aggravate the losses of cell organelle and viability. The results suggest that UV-C photocatalysis by the silver ions doped TiO2 could be a promising method to prevent fast and excessive growth of cyanobacteria in eutrophic water sources.; 廖兴盛周明

层理鞭枝藻藻蓝蛋白β亚基的体内重组被引量：2: 2006年; 为研究藻蓝蛋白β亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pET-cpcB(C155I)、pCDFDu-et-cpeS和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因cpeS、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和藻蓝蛋白β脱辅基蛋白基因cpcB(C155I)共同转入大肠杆菌.通过色素蛋白锌电泳和光谱检测,结果表明产生了有生物活性的CpcB(C155I)-PCB.而在裂合酶基因cpeS不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有7.6%的CpcB(C155I)-PCB产生.实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白β亚基84位半胱氨酸残基与PCB连接,为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础.; 赵金梅朱菁萍王锋周明赵开弘; 关键词：C-藻蓝蛋白

层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶色氨酸环境的光谱探测: 2007年; 应用N-溴化琥珀酰亚胺(N-bromosuccinimide)研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶(PecE、PecF)色氨酸的化学修饰,用紫外吸收光谱、圆二色光谱和荧光光谱探测了色氨酸化学修饰过程中蛋白质结构微观环境,发现PecE和PecF的色氨酸都处在疏水区域或带负电荷区域,PecE的色氨酸残基更靠近分子表面.由于色氨酸是藻红蓝蛋白裂合异构酶的必需氨基酸,这些分析加深了解了色氨酸在藻红蓝蛋白裂合异构酶催化过程中的作用.; 周明武栋; 关键词：藻红蓝蛋白色氨酸

鱼腥藻PCC7120藻蓝蛋白α亚基体内重组研究被引量：6: 2006年; 为了研究藻蓝蛋白α亚基的生物合成途径,通过构建相容的3种重组质粒pETDuet-cpcA、pCOLADuet-cpcE-cpcF和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因cpcE和cpcF、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和脱辅基藻蓝蛋白α亚基基因cpcA共同转入大肠杆菌BL21(DE3)。通过色素蛋白锌电泳和光谱检测表明产生了生物活性的CpcA-PCB。成功实现了大肠杆菌内藻蓝蛋白α亚基84位半胱氨酸残基与PCB的连接。而在裂合酶基因cpcE和cpcF不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有0.2%的CpcA-PCB产生。以上研究为进一步在大肠杆菌内合成天然的藻蓝蛋白奠定了基础。; 陈芳周明赵岩滕吟朱菁萍赵开弘; 关键词：藻蓝蛋白 CPCA

藻蓝蛋白裂合酶CpeS半胱氨酸的定点突变及功能研究: 2008年; 胡勋周明苏平赵开弘; 关键词：半胱氨酸定点突变体外重组

国家自然科学基金(30540070)

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