国家自然科学基金(81202231)
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
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- 多聚聚合酶-1在氢醌诱导的DNA损伤应答中的作用及其机制被引量：8
- 2015年
- 目的探讨多聚聚合酶-1(PARP-1)在氢醌(hydroquinone,HQ)诱导的DNA损伤应答中的作用及其相关的调控机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以10μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组,分别在染毒0.5、1、2、3、4、5和6 h时收集细胞,以0 h为对照组,或用HQ处理PARP-1沉默细胞,运用western bloting技术检测TK6细胞中磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)以及DNA损伤应答(DDR)相关蛋白PARP-1和抗凋亡转录因子(AATF)的表达情况。结果 HQ处理TK6细胞后,γ-H2AX的含量在3 h时达到高峰[(14.83±1.14)倍](P<0.05),此后逐渐下降;AATF的含量一直上升,6 h含量最高[(15.62±1.14)倍](P<0.05)。PARP-1的含量先下降后上升,3 h其含量最低[(0.66±0.04)倍](P<0.05)。PAR的含量在0.5 h达高峰[(1.78±0.13)倍](P<0.05),而后逐渐下降。PARP-1沉默细胞中,HQ处理使得PARP-1、PAR和AATF的含量分别降了77%(P<0.05)、64%(P<0.05)和68%(P<0.05),γ-H2AX的含量上升了1.65倍(P<0.05)。结论 PARP-1通过聚多聚腺苷二磷酸(ADP)核糖基化作用增强AATF稳定性参与由氢醌诱导的DNA损伤修复。
- 凌晓璇温桥生杜谕君云林唐焕文徐永春刘林华
- 关键词：氢醌DNA损伤修复PARP-1TK6细胞
- 肺癌相关lncRNA在PM_(2.5)处理细胞中的表达被引量：1
- 2019年
- 目的探讨PM_(2.5)对人支气管上皮BEAS2B细胞肺癌相关lncRNA表达的影响。方法磷酸盐缓冲液(PBS)处理人正常支气管上皮细胞(BEAS2B细胞)为对照组,300μg/ml PM_(2.5)处理BEAS2B细胞为处理组,48 h后用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测lncPVT1、lncUCA1、MIR31HG、lncIRAIN、lncCASC2、lncH19和lncSNHG表达的改变。结果与对照组相比,处理组细胞lncPVT1、lncUCA1、MIR31HG和lncIRAIN的表达量均为上升,分别上升了0.93、0.45、2.80和2.94倍,差异均有统计学意义(P<0.05),其中lncIRAIN的表达量上升最为明显。lncCASC2、lncH19的表达量下降,分别下降到0.17和0.08倍,差异均有统计学意义(P<0.05),其中lncH19表达量下降较为明显。结论 PM_(2.5)能促进MIR31HG、lncPVT1、lncUCA1和lncIRAIN的表达,抑制lncCASC2和lncH19的表达。
- 凌晓璇罗致远李洁优钟柏森刘嘉贤温赛娴陈振发袁倩刘林华
- 关键词：PM2.5长链非编码RNA
- 沉默PARP-1对miR-221表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨PARP-1沉默TK6细胞miR-221的表达。方法以空载体TK6细胞为对照组,以PARP-1沉默TK6细胞为处理组。免疫印迹法检测PARP-1蛋白表达量,反转录实时荧光定量-聚合酶链反应检测miR-221的表达改变。结果 PARP-1-shRNA组细胞PARP-1蛋白表达量与对照组细胞[(1.00±0.11)倍]相比,下降了75%(P<0.05),miR-221表达量与对照组细胞[(1.00±0.07)倍]相比,下降了26%(P<0.05)。结论 TK6细胞miR-221表达受PARP-1调节。
- 刘嘉贤唐焕文杜谕君云林凌晓璇刘林华
- 关键词：PARP-1MIR-221
- 非霍奇金淋巴瘤组织和氢醌诱变TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤组织Ki-67和Bcl-6基因表达及意义被引量：4
- 2020年
- 目的 Ki-67是目前应用最广泛的细胞增殖标志之一,而B细胞淋巴瘤-6(B-cell lymphoma-6,Bcl-6)基因本身具有不稳定性,其在淋巴瘤预后中是否能作为判断标记还需进一步研究。本研究主要探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-non Hodgkin lymphoma,B-NHL)组织、氢醌诱变的TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤体中原癌基因Bcl-6和增殖细胞核抗原Ki-67的表达情况及两者间的相关性。方法采用免疫组化GTVisionTM二步法对东莞东华医院2014-01-01-2018-12-31收治的85例B-NHL组织切片、氢醌诱变的人TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤体中Ki-67和Bcl-6表达情况进行检测;运用Spearman相关性分析及χ2检验分析2个基因的表达相关性及在临床分型诊断中的意义;荧光定量聚合酶链反应法检测氢醌诱导的TK6细胞中Bcl-6和Ki-67基因的表达。结果 85例B-NHL组织中,Ki-67高表达率为82.35%(70/85),Bcl-6阳性率为84.71%(72/85)。Ki-67在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中高表达率为95.35%(41/43),有别于非DLBCL中的69.05%(29/42),χ^2=10.113,P=0.001;Ki-67表达和B-NHL的恶性程度差异有统计学意义的关联(χ^2=21.642,P<0.001),并与Bcl-6在B-NHL组织中的表达呈正相关,r=0.403,P<0.001;但与年龄、性别均无关联,P>0.05;≥45岁患者Bcl-6阳性率高于<45岁患者(χ^2=9.939,P<0.05),说明Bcl-6的表达与年龄有关,而与性别、病理类型和恶性程度均无关联(P>0.05),氢醌诱导恶变的TK6细胞中Ki-67的mRNA表达上升(t=3.853,P=0.031),且诱变细胞的裸鼠荷瘤实验瘤体经免疫组化检测可见Ki-67强阳性(均值为80%)和Bcl-6的阳性(均值为11.5%)。结论 Ki-67高表达是DLBCL的重要判别指标,且与B-NHL的恶性程度有关;氢醌暴露可能引起B-NHL疾病通路中相关癌基因Ki-67和Bcl-6的表达改变,且二者在蛋白水平具有潜在的相关性。
- 李良潘志杰张海桥凌晓璇黄锦叶钟柏森李洁优刘林华
- 关键词：BCL-6KI-67氢醌
- PM_(2.5)诱导BEAS2B细胞Dnmt1下调激活Foxp3表达分子机制被引量：1
- 2018年
- 目的探讨PM_(2.5)激活人正常支气管上皮细胞(BEAS2B)Foxp3表达的分子机制。方法实验设对照组(磷酸盐缓冲液)、PM_(2.5)组(300μg/mL)、5-AzaC组(DNA甲基化转移酶抑制剂,5.0μmol/L)、TSA组(组蛋白去乙酰化酶抑制剂,0.2μmol/L)、PM_(2.5)对照组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测BEAS2B细胞中Foxp3、HOXA1和HOXA2基因表达,蛋白印迹法(Westerm blot)检测Dnmts相关蛋白表达,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)检测DNA甲基化水平。结果与对照组比较,PM_(2.5)处理的BEAS2B细胞Foxp3表达量上升1.15倍,差异有统计学意义(P<0.05);Dnmt1和Dnmt3b表达量分别下降0.51和0.38倍,Dnmt3a上升1.51倍,差异均有统计学意义(P<0.05);5-AzaC或TSA处理后,Foxp3表达量分别上升1.61和1.20倍,差异均有统计学意义(P<0.05),并伴随Foxp3启动子区DNA低甲基化及Dnmt1蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM_(2.5)可能通过抑制Dnmt1表达激活Foxp3表达。
- 凌晓璇张晓晴叶晓冰刘嘉贤温赛娴陈振发孔翠玉黄威黄诗荐岳振虎吴丽玉肖圆圆刘林华
- 关键词：PM2.5DNMT1FOXP3DNA甲基化
- 某密封式铅蓄电池装配项目职业病危害现状评价
- 2014年
- 采用卫生学调查、检查表法、检测分析、定量分级相结合的方法对某密封式铅蓄电池装配整改项目进行现状评价。主要职业病危害因素有铅尘(烟)、二氧化锡、乙酸乙酯、丙酮、苯、甲苯、二甲苯、1,2-二氯乙烷、正己烷、氢氧化钠、硫酸等。检测显示入槽作业岗位铅尘CTWA和烧焊、装模作业岗位LEX,8 h不符合职业接触限值要求。组装区叠片、烧焊、装模、入槽岗位为职业病危害因素关键控制点。该项目为职业危害严重项目,职业病防护效果基本符合职业卫生相关要求。
- 谭强陈松根顾春晖董雪梅黄燕玲何敏嫦刘林华
- 关键词：铅蓄电池职业病危害
- 氢醌对TK6细胞周期的影响及其相关的调控机制探讨被引量：3
- 2014年
- [目的]探讨氢醌(hydroquinone,HQ)对细胞周期的影响及其相关的调控机制。[方法]磷酸盐缓冲液(PBS)处理人类淋巴母细胞(TK6细胞)为对照组,20.0μmol/L HQ为处理组,48 h后通过碘化丙啶(PI)标记的流式细胞术检测细胞周期分布情况,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PTEN(抑癌基因)、p53基因mRNA表达的改变,流式细胞荧光标记法检测Rb蛋白的表达。[结果]与对照组比较,处理组G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);HQ作用于TK6细胞后上调了Rb的表达,下调了p53的表达,其差异均有统计学意义(P<0.05),而对PTEN的表达没有明显影响。[结论]HQ可能通过上调Rb的表达使细胞阻滞于G1期。
- 刘林华陈玉婷唐焕文张贺程小广杨慧凌晓璇
- 关键词：氢醌细胞周期P53基因RB基因细胞
- 集束化护理在冠心病介入治疗患者二级预防中的效果被引量：13
- 2017年
- 目的对集束化护理在冠心病介入治疗患者二级预防中的护理效果进行观察分析。方法我院2013年7月-2015年8月共收治104例冠心病患者,采取随机双盲法将患者分为A组和B组,分别对两组患者实施集束化护理与常规护理。护理后,比较分析两组患者的冠心病二级预防知识知晓度。结果 A组患者二级预防相关知识知晓度评分明显高于B组(P<0.05)。结论对行介入治疗的冠心病患者实施集束化护理,可大大提高患者冠心病二级预防知识知晓度,值得推广。
- 梁静云韦慧红
- 关键词：冠心病介入治疗集束化护理
- 白血病相关长链非编码RNA在氢醌诱导TK6恶性转化细胞中的表达及其调控机制
- 2018年
- 目的探讨氢醌(hydroquinone,HQ)对白血病相关长链非编码RNA(lncRNA)的表达影响及其相关的调控机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)处理的TK6细胞为PBS对照组,以10.0μmol/L HQ诱导的TK6恶性转化细胞为HQ染毒组;在调控机制探讨中以10.0μmol/L HQ诱导的TK6恶性转化细胞为对照,同时设10.0μmol/L HQ+5μmol/L 5-氮杂胞苷(5-Aza C,DNA甲基转移酶酶抑制剂)组和10.0μmol/L HQ+200 nmol/L曲古抑菌素A(TSA,蛋白去乙酰化酶抑制剂)组。以反转录实时荧光定量-聚合酶链反应(q RT-PCR)检测白血病相关lncRNA表达量以及Tet1、Tet2、Tet3的mRNA表达量。以蛋白免疫印迹检测Tet1、Tet2蛋白表达水平。结果与PBS对照组相比,HQ诱导的TK6恶性转化细胞中lncRNA HOTAIRM1、lncRNA BCO35666和lncRNA NEAT1表达下降,lncRNA HOTAIRM1表达下降最为显著,lncRNA NELT1、lncRNA ANKR036BP1、lncRNA LUNAR1、lncRNA SENCR和lncRNA UCA1表达上升,UCA1的表达升高最为明显;Tet1、Tet2、Tet3的mRNA表达下降,Tet2、Tet3的下降均有统计学意义(P<0.05),Tet1、Tet2的蛋白表达下降。与HQ染毒组比较,经5-Aza C与TSA处理的HQ诱导的TK6恶性转化细胞lncRNA HOTAIRM1和lncRNA NEAT1表达上升,而lncRNA BCO35666表达下降;Tet1、Tet2、Tet3 mRNA在HQ+5-Aza C处理组中表达均升高,Tet1、Tet2升高均有统计学意义(P<0.05),而在HQ+TSA处理组中Tet1表达升高(P<0.05),Tet3表达下降(P<0.05);Tet1、Tet2的蛋白表达与mRNA结果一致。结论在HQ诱导的TK6恶性转化细胞中,DNA甲基化与DNA去甲基化可能相互作用共同调控lncRNA HOTAIRM1、lncRNA NEAT1的表达。
- 袁倩张海桥凌晓璇黄海燕郑冬燕李洁优钟柏森刘林华
- 关键词：氢醌长链非编码RNADNA甲基化恶性转化白血病
