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重组人sCR1蛋白对大鼠肢体缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2: 2014年; [目的]探讨重组人可溶性补体受体1型(Soluble complement receptor type 1,sCR1)对大鼠肢体缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。[方法]采用无创血管夹夹闭左侧股动脉制作大鼠肢体缺血再灌注(Ischemiareperfusion,I/R)损伤模型,观察0、4、8 h时间点sCR1蛋白干预组(B组)与生理盐水(NS)对照组(A组)I/R损伤肌组织细胞形态学变化、测定肌肉湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)的表达水平。[结果]sCR1蛋白干预后的B组各时间点腓肠肌组织的W/D均低于NS对照A组,以I/R 4 h组最为显著(P<0.01);B组的MDA、MPO、LDH表达水平明显低于A组,以I/R 4 h组最为显著(P<0.01)。[结论]重组人sCR1蛋白对大鼠模型进行sCR1蛋白早期干预后,可明显减轻大鼠后肢骨骼肌I/R的损伤。; 李琛琪王广兰周明武王飞云朱杰罗彦平; 关键词：缺血再灌注

人sCR1酵母分泌型表达载体构建及其高拷贝转化子的快速筛选: 2009年; 目的采用酵母分泌型载体表达人可溶性补体受体1型(sCR1),研究人sCR1高拷贝重组阳性转化子的快速筛选及鉴定。方法从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,然后将其克隆入毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k中,构建含人sCR1的重组质粒(pPIC9k-sCR1),经测序鉴定正确,电转化入毕赤酵母细胞SMD1168中,将经G418抗性筛选出的重组sCR1酵母细胞株进行PCR鉴定,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化。结果获得毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k-sCR1,经G418筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母细胞株,经甲醇诱导含pPIC9k-sCR1的酵母SMD1168细胞表达出重组sCR1融合蛋白。此蛋白在SDS-PAGE上表现为Mr约31000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别。经Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后得到较纯的sCR1融合蛋白。结论人sCR1融合蛋白在酵母细胞表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原性。; 王广兰宫璀璀刘亚利初霞王文丽李璇; 关键词：分泌型表达载体

兔抗人sCR1抗体制备及临床初步应用被引量：2: 2010年; 目的原核表达人sCR1分子胞外区,制备多克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1,转化大肠埃希菌,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,以其免疫家兔制备抗血清。经纯化并鉴定特异性后建立双抗体夹心ELISA法检测血清中sCR1水平,探讨其对慢性病毒性肝炎及活动性SLE患者的诊断价值。结果研制的兔抗人sCR1抗体ELISA法效价为125 000,纯度和特异性较好。30例健康献血者血清中sCR1为(39.8±7.9)ng/ml;22例慢性病毒性肝炎患者为(48.5±24.7)ng/ml;9例活动性SLE患者为(36.3±17.6)ng/ml。结论制备的兔抗人sCR1抗体效价及特异性较好,用其建立的双抗体夹心ELISA法有望用于临床血清学的诊断。; 王广兰刘亚利初霞张长远宫璀璀王文丽高天蓝星; 关键词：多克隆抗体补体受体1型

人sCR1转化克隆菌的快速筛选和鉴定被引量：3: 2013年; 目的用G418快速筛选及鉴定重组人可溶性补体受体1型(sCR1)高拷贝转化克隆菌。方法采用的sCR1重组质粒,经电转化将其克隆入酵母SMD1168细胞株中,利用G418的抗性,快速筛选转化克隆菌,并对克隆菌株提取基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)鉴定;该克隆菌经甲醇诱导培养后,对其表达产物进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot鉴定分析。结果从G418快速筛选的毕赤酵母克隆菌株中提取的基因组DNA进行PCR鉴定,获得了高拷贝整合的重组毕赤酵母克隆菌株,经诱导培养后,对其表达产物进行SDS-PAGE及Western blot鉴定分析,该表达蛋白在SDS-PAGE上表现为相对分子质量大于30 000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别,成功获得高拷贝整合的重组毕赤酵母细胞株,可表达出重组人sCR1融合蛋白。结论经高浓度G418药物快速筛选的高拷贝毕赤酵母SMD1168细胞株,用于表达人sCR1融合蛋白。; 周明武李琛琪徐立博罗彦平张威方盼盼王广兰; 关键词：毕赤酵母菌 G418

3.0TMRI常规序列联合DWI对胃癌术前T、N分期的诊断价值被引量：12: 2018年; 目的探究3.0T MRI常规序列联合扩散加权成像(DWI)对胃癌术前T、N分期的诊断价值。方法回顾性分析2015年5月—2016年11月38例确诊为胃癌患者的临床资料。所有患者行3.0T MRI常规序列联合DWI检查,以手术病理结果为金标准,将MRI常规序列、MRI常规序列联合DWI检查的T、N分期结果与病理结果进行一致性检验,并比较两种方法的诊断价值。结果 MRI常规序列与MRI常规序列联合DWI对胃癌术前T分期的诊断准确率分别为83.55%与91.45%,对胃癌术前N分期的准确率分别为77.19%与85.96%,均与病理结果比较一致性较好。MRI常规序列联合DWI对胃癌术前T、N分期的检测效果优于MRI常规序列(P<0.05)。结论 3.0T MRI常规序列联合DWI对胃癌术前T、N分期的诊断效果更好。; 闫宇涛梁运鹏游波涛王跃彬于联芳; 关键词：磁共振成像扩散加权成像胃肿瘤肿瘤分期

多排螺旋CT血管成像对四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的评估作用分析被引量：7: 2018年; 目的探讨多排螺旋CT血管成像(MDCTA)对四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的诊断效能。方法回顾分析2016年2月—2017年3月我院经手术病理检查确诊的四肢骨及软组织肿瘤80例临床资料。以术中探查为"金标准",比较术前MDCTA、MRI对四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的诊断效能。结果MDCTA检查诊断四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的灵敏度为92. 31%,特异度为96. 43%,准确性为93. 75%,Kappa值为0. 87; MRI检查诊断四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的灵敏度为76. 92%,特异度为92. 86%,准确性为82. 50%,Kappa值为0. 64; MDCTA与MRI检查诊断四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯的特异度比较差异无统计学意义(P> 0. 05),而MDCTA检查诊断准确性与灵敏度均明显高于MRI(P <0. 05)。结论相较MRI,MDCTA检查诊断四肢骨及软组织肿瘤血管侵犯具有更高的诊断效能,能为手术方案制定提供可靠指导。; 闫宇涛李光景游波涛付海涛梁运鹏; 关键词：骨肿瘤软组织肿瘤 CT血管造影

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