利用酿酒酵母YT0801的总DNA为模板,采用PCR技术克隆出转氨酶I基因的DNA序列,利用生物信息学工具对其核酸序列和蛋白序列进行分析。测序结果表明DNA序列含有一个1503bp的开放阅读框,编码500个氨基酸,推测等电点为5.81,相对分子质量为56.2ku。同源性比对结果显示,该基因及推测的氨基酸序列与已报道的ARO8基因(Gen Bank Accession No:NM 001181067.1)的同源性均为100%。此外,对其理化性质、信号肽、疏水性、亲水性、二级结构和三级结构进行了分析。该基因的成功克隆,为其功能研究和生物合成2-苯乙醇提供了分子基础。
海带是天然的保健食品,本研究以淡干海带为原料,从中筛选出具有较强的降亚硝酸盐和胆固醇能力的优良菌株。采用盐酸萘乙二胺法测定菌株在MRS液体培养基中亚硝酸盐的含量,邻苯二甲醛法测定菌株在MRS液体培养基中胆固醇的含量,再对筛出的菌株进行鉴定。结果表明:从淡干海带中分离出的27株菌株中,有7株菌株具有很强的降解亚硝酸盐能力,降解率均达到97%以上。进一步对这7株菌株降解胆固醇的能力进行筛选,结果表明其中3个菌株降解胆固醇能力较强分别为:55.02%(La-3)、61.21%(La-10)、56.85%(La-15);经过形态特征观察、生理生化实验和16S r DNA基因序列相似性分析,结果显示这7株菌株均为植物乳杆菌。本文结果还表明了相同的植物乳杆菌其降解胆固醇的能力存在差异,显示了物种的多样性。
目的:明确芒果源高降胆固醇乳酸菌去除胆固醇的机制,为以后应用于果汁发酵生产具有降胆固醇作用的果汁饮品提供优良的菌种。方法:对降胆固醇能力强的15个菌株进行体外耐受性及其降胆固醇吸附作用的研究,采用气-质联用色谱对体外耐受性好,降胆固醇能力高的菌株MPL1进行细胞脂肪酸组成研究。结果:12个菌株可耐受p H 1.0的极酸性环境,15个菌株在质量浓度0.3 g/100 m L的各种胆盐介质中生长良好;7个菌株在人工肠液中培养4 h后,存活率均在97%以上。菌株MPL1、MPL2、MPL5、MPL8和MPL16的生长菌体对胆固醇的去除量比休眠菌体和热灭活菌体多。菌株MPL1在胆固醇存在或没有胆固醇的培养基中生长,其细胞脂肪酸组成含量发生了变化,说明培养基中的胆固醇被菌株同化到细胞膜中。结论:15个高胆固醇降解乳酸菌中,有7个菌株可以体外高度耐酸、耐胆盐,能顺利通过胃部进入肠道环境并在肠道里良好生长。菌株MPL1通过同化和吸附胆固醇来去除胆固醇。