国家自然科学基金(30710103093)
- 作品数：2 被引量：30H指数：2
- 相关作者：许化溪王胜军黄新祥陈建国苏兆亮更多>>
- 相关机构：江苏大学江苏大学附属人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MyD88-铜绿假单胞菌表位核酸疫苗的构建及其真核表达被引量：6
- 2009年
- 目的:构建重组MyD88基因的铜绿假单胞菌(PA)表位核酸疫苗,并研究其在真核细胞中的表达。方法:将PA的OprF的三个中和性B细胞表位及一个外源通用T细胞表位串联,表位之间用赖氨酸间隔,采用重叠PCR方法合成全基因,并在此序列前插入组织纤溶酶原激活物(tPA)的信号肽基因,将获得的片段与MyD88基因分别克隆到pIRES载体的两个多克隆位点,构建真核双表达重组质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88。电穿孔法将pIRES-tPA-OprF-MyD88转入COS-7细胞,通过Westernblot检测其细胞上清tPA-OprF蛋白及细胞内MyD88蛋白的表达。结果:构建的真核表达质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88,经电转COS-7细胞后,在其培养的上清液及细胞内检测到目的蛋白。结论:成功构建pIRES-tPA-OprF-MyD88表达载体,并在转染的真核细胞中得以有效地表达,为研究PA预防性疫苗奠定了实验基础。
- 陈建国苏兆亮柳迎昭王胜军黄新祥邵启祥许化溪
- 关键词：铜绿假单胞菌MYD88表位疫苗真核表达
- 胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子与相关细胞因子的检测及临床意义被引量：24
- 2010年
- 目的了解胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的转录因子及其相关细胞因子的表达水平，探讨其在胃癌发展进程中的作用。方法收集57例胃癌患者、31例胃部良性疾病患者和40例健康志愿者的外周血，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）技术，检测外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞的特异性转录冈子RORγt和FoxP3mRNA的表达水平；采用酶联免疫吸附试验（ELISA），检测胃癌患者血浆中IL一17、IL-23、转化生长因子β（TGF一β）和IL一10的浓度。结果胃癌组FoxP3和RORγt／tmRNA的表达水平分别为2．349±0．491和0．794±0．304，明显高于健康对照组和良性疾病组（均P〈0．05），FoxP3／RORγt比值也高于健康对照组和良性疾病组（P〈0．05），而良性疾病组与健康射照组差异无统计学意义（P〉0．05）。中晚期胃癌组的FoxP3／RORγ／t比值明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。胃癌组血浆中IL一17、IL一23、TGF一β和IL一10的水平明显高于健康对照组（P〈0．05），中晚期胃癌组TGF一β和IL一10水平明显高于早期胃癌组（P〈0．05）。结论胃癌患者存在高Th17和Treg细胞水平，且随着病程的进展Treg细胞仍维持强势，FoxP3／RORγt比值明显增高。监测胃癌患者外周血Th17和Treg细胞的特异性转录因子和相关细胞因子水平，有助于对病程的判断。
- 彭素芳王胜军陈建国戴晓莉石燕李雅贞苏兆亮薛渊何志强黄新祥许化溪
- 关键词：RORΓTFOXP3TREG细胞
